山东技术外泌体分析

外泌体中不仅包含蛋白质成分，还包括一些RNA成分，如微小RNA(microRNA，miRNA)、长链非编码RNA和mRNA、环状RNA（circularRNA，circRNA）。外泌体所携带的这些RNA统称为外泌体来源RNA，具有完整的序列结构和生物活性。外泌体中大约含几百种miRNAs，通过外泌体miRNA测序，研究人员可获得与疾病相关的遗传特征（生物标志物），为将来tumour医治领域通过液体活检来寻找有效药物。外泌体可被大多数细胞分泌，并分布于唾液、血浆、乳汁、尿液等体液中。外泌体中不仅包含蛋白质成分，还包括一些RNA成分。外泌体在tumour中的作用不可忽视，但是它又不只局限于tumour研究。山东技术外泌体分析

大多数常规的膜出芽过程是使膜从细胞器变形到细胞质中，而外泌体是由于细胞膜内吞形成内体，内体限制膜发生多处凹陷，向内出芽形成微囊泡(intraluminal vesicles，ILVs)，从而转变为具有动态亚细胞结构的多囊泡体(multi-vesicle bodys，MVBs)，即晚期内体。MVBs可以在内体限制膜处通过至少2种机制产生：一种是内吞体分选转运复合体机制(endosomal sorting complex required for transport，ESCRT)，另一种是非依赖性的ESCRT机制。ESCRT机制由一组胞质蛋白复合物发挥作用，其能识别泛素化修饰的膜蛋白。海南修饰外泌体结果研究外泌体在这些过程中的作用影响，发表文章的周期会较长，但是相对的，影响因子也高，很多都在10分以上。

上皮-间质转化（EMT）被报道参与tumour细胞和tumour相关巨噬细胞（TAM）之间的相互作用，且EMT的结直肠ai（CRC）细胞促进TAM的M2极化，但具体的机制如何还不清楚。武汉大学中南医院熊斌和WangShuyi合作在MolecularTherapy发表文章，EMT-CRC产生高表达miR-106b的外泌体，直接传递给巨噬细胞，导致巨噬细胞miR-106b升高，激huoPI3Kγ/AKT/mTOR信号，促进M2的极化，从而促进tumour进展。揭示了CRC进展的新机制，为预防CRC转移提供了潜在的靶点。

流式细胞仪不仅可以检测囊泡的大小、数量，而且通过荧光标记可以检测囊泡的来源，将囊泡进行分类，因此，流式细胞仪是进行囊泡快速、高通量、多参数检测的较优de选择。但是，传统流式细胞仪无法测量＜300nm的外泌体，因此很难进行精确地定量和定性分析。纳米颗粒跟zong分析技术（NanosightTrackingAnalysis，NTA）是一种比较新颖的表征纳米颗粒的方法，它可直接并实时观测纳米颗粒。NTA通过光学显微镜收集纳米颗粒的散射光信号，拍摄一段纳米颗粒在溶液中做布朗运动的影像，对每个颗粒的布朗运动进行追踪和分析，从而计算出纳米颗粒的流体力学半径和浓度。人体几乎所有类型的细胞都能分泌外泌体，外泌体普遍存在并分布于各种体液中。

纳米颗粒跟zong分析技术（Nanosight Tracking Analysis，NTA）是一种比较新颖的表征纳米颗粒的方法，它可直接并实时观测纳米颗粒。NTA 通过光学显微镜收集纳米颗粒的散射光信号，拍摄一段纳米颗粒在溶液中做布朗运动的影像，对每个颗粒的布朗运动进行追zong和分析，从而计算出纳米颗粒的流体力学半径和浓度。 通过SDS-PAGE电泳分析得到Exosome中蛋白的含量及种类；通过Western-Blot检测Exosome中特定的蛋白表达情况。外泌体可被大多数细胞分泌，并分布于唾液、血浆、乳汁、尿液等体液中。外泌体中不仅包含蛋白质成分，还包括一些RNA成分。外泌体核酸包括诸多种类的long RNAs和以microRNA为dai表的small RNAs。北京研究外泌体研究

免疫磁珠法：可以保证外泌体形态的完整，特异性高、操作简单，但生理性盐浓度会影响外泌体生物活性。山东技术外泌体分析

多种细胞在正常及病理状态下均可分泌外泌体。其主要来源于细胞内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体，经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中 。 所有培养的细胞类型均可分泌外泌体，且外泌体天然存在于体液中，包括血液、唾液、尿液、脑脊液和乳汁中。 有关他们分泌和摄取及其组成、“运载物”和相应功能的精确分子机制刚刚开始研究。 外泌体目前被视为特异性分泌的膜泡，参与细胞间通讯，对外泌体的研究兴趣日益增长，无论是研究其功能还是了解如何将其用于微创诊断的开发。山东技术外泌体分析

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