使用TCBS琼脂进行细菌分离实验的步骤如下:1.**准备工作**:-确保实验室无菌操作条件,穿戴适当的实验服和手套。-准备无菌的接种环、涂布器、无菌吸管和移液器等工具。2.**配制培养基**:-按照培养基包装上的说明,称取适量的TCBS琼脂粉末。-将称取的TCBS琼脂粉末加入到适量的蒸馏水中,通常为100mL。-将混合物加热至沸腾,以确保琼脂完全溶解。3.**冷却和倾注平板**:-将溶解好的培养基冷却至50℃左右(避免过热,以免杀死细菌),此时琼脂应该仍然是液体状态。-将冷却的培养基倒入无菌的培养皿中,一般倾注量为15-20mL/平皿。-等待琼脂凝固,形成固体培养基平板。4.**接种样品**:-使用无菌操作,将待检测的样品涂布或划线接种到TCBS琼脂平板上。-可以使用稀释涂布法、螺旋接种法或其他适当的接种方法。5.**培养**:-将接种后的平板倒置,放入恒温培养箱中。-根据实验要求,通常在36±1℃下培养18-24小时。6.**观察和选择菌落**:-培养结束后,观察平板上的生长情况,记录不同类型菌落的特征。-选择性地挑选出特定的菌落,如蓝绿色或黄色菌落,这些可能是目标弧菌。
TGY肉汤培养基(TryptoneGlucoseYeastBrothMedium)是一种用于微生物培养的培养基,特别适合于芽孢菌的培养。以下是它的一些主要特点和用途:1.**配方成分**:TGY肉汤培养基的主要成分包括胰蛋白胨(或胰酪蛋白胨)、酵母浸粉、葡萄糖和琼脂。胰蛋白胨和酵母浸粉提供氮源、维生素和矿物质,葡萄糖作为碳源和能源,琼脂用于固化培养基。2.**pH值**:该培养基的pH值通常控制在7.0至7.5之间,为微生物提供适宜的生长环境。3.**用途**:TGY肉汤培养基主要用于细菌的培养,特别是对于需要营养丰富环境的细菌,如芽孢杆菌属的细菌。它也适用于细菌总数的测定和微生物的增菌培养。4.**配制方法**:通常需要称取一定量的培养基粉末,加入蒸馏水或去离子水中,加热煮沸至完全溶解,然后进行高压灭菌。灭菌后,冷却至适当温度,分装于无菌容器中备用。5.**质量控制**:通过接种质控菌株,如大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌等,来验证培养基的性能。这些菌株在TGY肉汤培养基上应表现出良好的生长特性。6.**储存条件**:干燥培养基应放置于阴暗干燥处,室温保存。制备好的培养基应避免光线直接照射,并保存于2-8℃。植物胨酵母琼脂预装培养皿普通肉汤培养基通常由蛋白胨、牛肉浸粉(或牛肉膏粉)、氯化钠和水组成,这些成分为细菌提供必需的碳源等。
CIN-1培养基基础是一种用于分离小肠结肠炎耶尔森氏菌的选择性培养基。其配方包含胰蛋白胨、酵母浸粉、甘露醇、氯化钠、去氧胆酸钠、硫酸镁、琼脂、Irgasan、中性红、结晶紫和氯化锶等成分,pH值约为7.5±0.1(25℃)。这种培养基通过其成分的选择性作用,可以有效地促进目标菌的生长,同时抑制其他非目标菌。**CIN-1培养基基础的用途**:主要用于分离小肠结肠炎耶尔森氏菌(GB标准)。**添加剂**:每瓶需配套添加CIN-1添加剂,每200mlCIN-1培养基基础添加1支HB0269-2。**配制方法**:称取58.0gCIN-1培养基基础,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装三角瓶,每瓶200ml,121℃高压灭菌15分钟,冷却至50℃左右时,加入一支过滤除菌的CIN-1添加剂(含头孢菌素3mg,新生霉素0.5mg),混匀,倾入无菌平皿。**检验原理**:胰蛋白胨和酵母浸粉提供菌体生长所需要的氮源、碳源和微量元素;甘露醇作为可发酵碳源;氯化钠维持培养基体系渗透压;硫酸镁提供菌体生长的微量元素;去氧胆酸钠和结晶紫能够抑制革兰氏阳性菌;中性红作为酸碱指示剂;琼脂是培养基的凝固剂。
滤膜肠球菌琼脂(FilterMembraneEnterococcusAgar)是一种用于分离和计数肠球菌的选择性培养基。它通常用于水或其他样品中肠球菌的滤膜法分离或计数。**特点**:1.**成分**:含有胰蛋白胨、酵母浸粉、葡萄糖、磷酸氢二钾、叠氮化钠和2,3,5-三苯基四氮唑氯化物(TTC)等。其中,胰蛋白胨、葡萄糖和酵母浸粉提供碳源和氮源,叠氮化钠作为抑菌剂抑制非肠球菌生长,TTC作为显色剂使肠球菌菌落呈现红色。2.**pH值**:培养基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),为肠球菌提供适宜的生长环境。3.**应用**:适用于水和污水中肠球菌的检测,也可用于食品样本中肠球菌的分离和计数。4.**配制方法**:称取培养基42g,加热溶解于1000mL蒸馏水中,冷却至45-50℃时倾入无菌平皿,备用。无需高压灭菌。5.**结果观察**:肠球菌在滤膜肠球菌琼脂上通常形成红色菌落,便于识别和计数。滤膜肠球菌琼脂因其高选择性和特异性,是检测水和食品样本中肠球菌污染的重要工具。PK琼脂培养基的制备通常包括将干燥的培养基粉末与适量的水混合,加热至琼脂完全溶解,然后分装到培养皿中。
SH培养基(Schenk&HildebrandtMedium)是一种用于植物组织培养的培养基,特别适合于单子叶和双子叶植物细胞的悬浮培养。它含有相对较低的铵盐和较高的硝酸盐,以及丰富的维生素和无机盐,适合许多植物种类的生长。**配方组成**:-硝酸钾(KNO3):2500.00mg/L-磷酸二氢铵(NH4H2PO4):300.00mg/L-氯化钙(CaCl2·2H2O):200.00mg/L-硫酸镁(MgSO4):195.34mg/L-硫酸锰(MnSO4·H2O):10.00mg/L-硼酸(H3BO3):5.00mg/L-碘化钾(KI):1.00mg/L-钼酸钠(Na2MoO4·2H2O):0.10mg/L-硫酸锌(ZnSO4·7H2O):1.00mg/L-硫酸铜(CuSO4·5H2O):0.20mg/L-氯化钴(CoCl2·6H2O):0.10mg/L-硫酸亚铁(FeSO4·7H2O):15.00mg/L-EDTA二钠(Na2EDTA·2H2O):20.00mg/L-肌醇(myo-Inositol):1000.00mg/L-盐酸硫胺素(Thiaminehydrochloride):5.00mg/L-盐酸吡哆醇(Pyridoxinehydrochloride):0.50mg/L-烟酸(Nicotinicacid):5.00mg/L-蔗糖(Sucrose):20000.00mg/L**配制方法**:1.用600ml灭菌后的蒸馏水溶解脱水培养基,用少量蒸馏水冲洗残余培养基粉末。2.轻轻搅动使培养基完全溶解。3.加入所有热稳定添加剂。低温是降低细菌代谢的关键因素之一。常用的低温保存方法包括4℃冰箱保存、-20℃至-80℃的低温冰箱保存。山梨醇麦康凯琼脂预装培养皿
CAS培养基的pH值通常控制在6.8±0.1(25℃),以保证微生物的生长和铁载体的活性 。无盐麦康凯琼脂培养皿
DCR培养基是一种用于植物组织培养的培养基,它支持植物细胞、组织的生长和发育。以下是DCR培养基的一些关键特点和配制方法:1.**配方组成**:-包含大量元素(如硝酸铵、硝酸钾、磷酸二氢钾、硫酸镁、氯化钙等)、微量元素(如硼酸、硫酸锰、硫酸锌、硫酸铜、碘化钾等)、铁盐(如硫酸亚铁、EDTA二钠)和有机物(如盐酸硫胺素、盐酸吡哆醇、烟酸、甘氨酸、肌醇)。2.**配制方法**:-称取培养基粉末1428.68mg/L,溶于1000ml蒸馏水或去离子水中。-加入1ml/L的1000×钙浓缩液。-使用NaOH或HCl调节pH至5.8-6.2。-115℃高压灭菌30分钟。3.**用途**:-主要用于植物组织培养,包括细胞、组织的生长和发育。4.**保存条件**:-2-8°C保存。5.**注意事项**:-避免吸入、摄入或皮肤接触。-配制过程中应严格按配方配制。-pH调节不宜过高或过低。-培养基灭菌后应进行无菌检查。6.**特别说明**:-不适宜制备高浓度母液,会有沉淀产生。DCR培养基的配方是完全定义的,不含动物衍生成分,从而减少了潜在的影响和免疫反应风险。这种培养基在植物组织培养中有着广泛的应用,尤其是在研究植物细胞重编程、干细胞和组织工程等领域。无盐麦康凯琼脂培养皿