利用外泌体进行体内药物递送时必须考虑以下因素：①外泌体和细胞之间相互作用的模式是否与所递送的zhiliao剂作用机制一致，是否会对所递送的zhiliao剂功效有所影响；②外泌体广fan参与了机体的生物过程，大量的外源性外泌体的存在可能会破坏内源性外泌体介导的细胞间通讯；③一些尚不明了甚至未知的机制可能会导致不良副作用，如外泌体表面蛋白质的脱靶信号转导，还有其他如ai基因和病毒miRNA，或朊病毒颗粒以及外泌体纯化过程中未能去除的可溶性颗粒因子等物质在外泌体中一起递送，均有可能产生不良副作用。提示纯化方案中采用严格的质控与安全性分析使这些复杂的影响因素小化，对体内和体外研究至关重要。许多抗ai药物、基因药物及抗yan药物均可载入外泌体中。北京动物组织样本外泌体载药
通心络胶囊是心脑血管病常用药, 句有yi气活xue, 通络止痛的功效。选择将通心络胶囊处理过的人心肌细胞 (HCM) 与人心肌微血管内皮细胞 (HCMECs) 缺氧/复氧模型共培养, 结果显示HCMECs的凋亡水平明显下降, 而加入外泌体抑制剂GW4869后该作用消失, 证明HCM来源外泌体可作为通心络胶囊有效成分的载体。研究者还发现通心络胶囊处理过的HCM能提高HCMECs中p70s6k1和GSK-3β的磷酸化水平, 说明通心络胶囊可能通过HCM来源的外泌体激huo再灌注损伤挽救激酶通路, 进而减少HCMECs的缺氧/复氧损伤。上海组织外泌体载药装载了连翘酯苷A(FTA)的A549来源的外泌体无论是4℃还是37℃在1周内可以稳定存在。
外泌体的脂质双分子膜可以保护其在血液循环中不被降解,但是这种膜结构以及其内含各种丰富的物质,使得外泌体载药变得困难。外泌体只有保证膜结构的完整性,才能不引起免疫反应,不被MPS吞噬。目前,将药物载入外泌体的方法主要有两种:(1)前转载,在分离外泌体之前,将药物与母代细胞共培养和对母代细胞进行转染,可以让母代细胞分泌含有药物的外泌体; 主要是用转染剂将“货物”转染进入亲代细胞(或者将“货物与亲代细胞孵育”),然后收集培养基,获得载有“货物”的外泌体的过程。该方法的主要问题是合适有效的转染试剂很少,且转染试剂无法完全去除,导致转染效率低,无法排除转染试剂对实验的影响。(2)后转载,分离出外泌体之后,将药物载入外泌体。
外泌体是细胞分泌的一类膜性囊泡，直径一般在30-150 nm之间，能携带蛋白质，核酸，脂质等多种醉重要的生物信息。几乎所有类型的细胞都能分泌外泌体，于是外泌体成了细胞间传递信息的天然信使，发挥调控作用。基于外泌体本身的特性，在对其进行定向改造后，外泌体便具备了特异性的药物递送功能。细胞外泌体因其低毒性、高生物相容性、低免疫原性、靶向性等特点，已经成为备受关注的药物递送载体，用于各种小分子药物、核酸药物、蛋白质药物等的递送。间充质干细胞外泌体可递送突变型HIF-1α更好地恢复类固醇诱导的早期股骨头缺血性坏死。
载药后EVs表征鉴定载药芳式或负载药物可能对EVs造成一定的影响，例如，电穿孔有引起EVs聚集或融合的风险、超声可能破坏EVs的结构、挤压可能影响EVs膜蛋白及zeta电位等。考虑到这些潜在的问题，EVs载药完成后，通常需要再次分离EVs，去除游离的药物分子，并对载有药物的EVs进行表征鉴定（如TEM、纳米流式、WB等），与载药之前进行比较，以确定载药对EVs存在的影响。比较理想的结果是，载药前后无明显差异，EVs完整性、稳定性等均处于较好状态。外泌体具有透过血脑屏障的能力，包载药物的外泌体可通过鼻腔给药的方式到达脑实质zhiliao脑部疾病。上海外泌体载药技术原理
将紫杉醇载入到外泌体中可以使紫杉醇对MDCKMDR1细胞的毒性提高50倍。北京动物组织样本外泌体载药
外泌体载yao方法已在多种研究中得到应用，但各自有一定的局限性：共孵育依赖药物跨膜运输而包载；超声法和电穿孔法较为常用，但都破坏了外泌体的膜结构而使药物进入外泌体，与参数有较大关系；挤压法依赖仪器的机械力，但机械力是否对外泌体产生影响未知；反复冻融法载药能力较差；对外泌体修饰可以达到提高细胞摄取或者靶向而改善药物的疗效；药物混合物中加入皂苷会有体内溶血的潜在风险。目前研究者应用较多的方法是共孵育结合超声、超声、电穿孔、修饰外泌体。北京动物组织样本外泌体载药
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