吉林外泌体载药实验

外泌体的提取方法在外泌体载药系统中应用——聚合物沉淀法。用于分离病毒和其他的生物大分子，已有50多年历史,近几年,将其作为一种新的方法来分离外泌体。目前,市场已经有应用聚乙二醇(polyeth yleneglycol,PEG)溶液提取外泌体的试剂盒,常见的是SystemBiosciences公司的ExoQuick®和ExoQuick-TC®kits,该试剂盒操作简单不需要特殊的仪器,但是价格昂贵。提取外泌体的试剂盒主要成分是PEG8000(30%~50%),将试剂盒与体液或细胞培养液4℃孵育过夜,之后再低速离心。即可进行外泌体的提取，此方法实行起来较为简单。外泌体装载小分子药物的方法有很多,主要有被动孵育、超声、电穿孔及供体细胞载药等。吉林外泌体载药实验

    细胞外囊泡是细胞分泌的膜囊泡，具有低免疫原性和、低毒性、高生物相容性等特点，被认为是药物递送的理想纳米载体。研究团队构建包载了针对YTHDF1的小干扰RNA(siRNA)的工程化细胞外囊泡，靶向递送siRNA敲降YTHDF1。该工程化细胞外囊泡被证明以m6A依赖的方式抑制Wnt通路受体卷曲蛋白FZD7的翻译，导致Wnt/β-catenin通路失活，进而抑制胃ai细胞的增殖和发生进展。同时，肿瘤细胞的YTHDF1降低后，可介导干扰素(IFN)-γ受体1(IFNGR1)的过表达，增强IFN-γ效应，促进肿瘤细胞主要组织相容性复合体I(MHC-I)的表达，使免疫原性肿瘤细胞直接实现自呈递，有效ji活细胞免疫反应，通过表观遗传调控和免疫调节相互作用抑制胃ai的发展和转移。该工作提供了tumourm6A表观遗传调控的高效低毒新方法，并证明m6A表观遗传调控在恢复抗肿瘤免疫中的作用，为tumour表观遗传调控和免疫疗法开辟了新途径。 吉林外泌体载药实验外泌体作为内源性的天然药物载体可穿透许多生物膜,提高药物的运输效率和靶向性。

大分子蛋白类药物可以通过以下方法进行外泌体载药。Haney等人采用常温下共孵育、加入皂素后孵育、反复冻融、超声、挤出等多种不同的方法将过氧化氢酶包载到外泌体中。结果显示，外泌体通过超声和挤出两种方式句有较高的载药量，分别为26.1％和22.2％，通过被动扩散方式的载药量jin为4.9％，但当加入句有透皮促进作用的皂素后，外泌体的载药量会明显提高至18.5％。值得注意的是，外泌体的载药量不jin与载yao方式有关，也取决于药物的性质、外泌体脂质的组成，而且不同的载yao方式也会影响细胞对外泌体的摄取。

    外泌体载药评估载药完成后，还需要对EVs载药效果进行评估，包封率（encapsulationefficiency）、载药量（loadingcapacity）、阳性率等都可以用于EVs载药评估。包封率包封率指的是成功加载到EVs的药物量与投入制备体系中药物量的比值，是评估药物利用率的重要指标。不同的药物采用不同的装载方式，其包封率往往不同，此外，选择不同的检测方法，计算出的包封率也可能存在差异。计算公式：包封率（%）=（装载药物量/投入药物量）×100%载药量载药量指的是单位EVs（或单位数量EVs）所负载的药物量，载药量越高，后期给药时所需的EVs就越少。根据装载药物的不同，载药量的单位存在差异，负载药物总量的单位可以是摩尔数、质量、拷贝数等。例如，EVs负载siRNA时，载药量通常用copies/EV表示。阳性率阳性率指的是成功装载药物的EVs与投入制备体系中总EVs的比值，是评价EVs载药效率的重要指标。阳性率与载药量相结合，可以对EVs载药进行较为全mian的评价。计算公式：阳性率（%）=（装载药物的EVs量/总EVs量）×100% 外泌体载药系统的临床转化研究与非临床研究具有一定的差异。

中流细胞通常过表达正常细胞中不存在的表面特异性受体，这些受体可能是其外泌体靶向中流细胞的基础。利用中流细胞外泌体对其表面特异性受体的识别，有望将zhiliao药物靶向传递到病变细胞，与普通细胞分泌的外泌体相比，可达到更高的靶向效率。临床上常见的肺ai病理学类型是非小细胞肺ai，其中A549细胞呈鳞状，含有高度不饱和脂肪酸，能够有效维持细胞膜完整性，可较好地模拟中流生长，因此被广fan用于体外研究。以A549中流细胞外泌体为载体，采用电穿孔法包载多烯紫杉醇，构建一种句有肺ai主动靶向性的递药系统，并采用响应面法优化了其载药工艺。连翘酯苷A制备成外泌体载药系统可明显提高其体外抗中流细胞转移的能力。吉林外泌体载药实验

外泌体可以包载疏水性的姜黄素，提高其溶解度、稳定性和体内生物利用度。吉林外泌体载药实验

有实验将an-timiR-9载入到间充质干细胞中，使其分泌的外泌体包载有an-timiR-9。通过体外细胞传递实验发现，间充质干细胞可以通过外泌体递送an-timiR-9到耐药性多形性胶质细胞瘤（GBM）中，致使耐药性细胞株中的MDRI基因下调，P－糖蛋白表达量减少，从而增加耐药性细胞株对替莫唑胺的化学敏感性，有效地抑制耐药性多形性胶质细胞瘤的增殖。研究人员采用外泌体对GBM进行zhiliao不只停留在细胞实验上，相关的体内研究也已有报道。研究者将高表达miR-146b间充质干细胞源性的外泌体用于zhiliaoGBM的移植瘤模型中，结果表明载有miR-146b的外泌体能有效地抑制中流的生长。吉林外泌体载药实验

研载生物科技（上海）有限公司是我国外泌体实验，细胞自噬实验， 细胞功能实验，铁死亡实验专业化较早的有限责任公司之一，上海研载生物是我国医药健康技术的研究和标准制定的重要参与者和贡献者。上海研载生物以外泌体实验，细胞自噬实验， 细胞功能实验，铁死亡实验为主业，服务于医药健康等领域，为全国客户提供先进外泌体实验，细胞自噬实验， 细胞功能实验，铁死亡实验。将凭借高精尖的系列产品与解决方案，加速推进全国医药健康产品竞争力的发展。