外泌体的产生过程涉及质膜的双重内陷和含有腔内囊泡intraluminalvesicles(ILVs)的细胞内多泡体multivesicularbodies(MVBs)的形成。ILV醉终通过质膜的损伤和MVB胞吐作用以直径范围约为40-160nm的外泌体形式分泌1).质膜的di一次内陷形成杯状结构，包括细胞表面蛋白和与细胞外环境相关的可溶性蛋白2).这导致了早期分选内体early-sortingendosome(ESE)的新生形成，在某些情况下可能直接与预先存在的ESE合并[1]。ESEs可以成熟为晚期分选内体late-sortingendosomes(LSEs)，醉终生成MVBs，...

细胞外囊泡（EVs）因其生物相容性、大小适宜、体循环中保存时间长和低免疫原性等优势，在生物医学应用中得到了普遍的应用。研究发现EV比普通的细胞膜囊泡更有优势。EV的优势在于，由于其表面的跨膜蛋白（如MHC复合物）数量减少，它们的免疫原性低于其宿主细胞膜，具体的多少取决于它们的细胞来源。凋亡小体、微泡和外泌体是根据EV的生物成因进行分类的。当胞内体的膜向内萌发形成外泌体时，就产生多泡体（MVB）。当MVBs与质膜融合时，外泌体被释放到细胞外空间。一旦从细胞表面释放出来，外泌体能够与细胞外基质相互作用，或在微环境内外引发反应。将RNA和蛋白质引入外泌体，并将其定向到身体特定区域的方法仍在开发中。外...

细胞外囊泡(EV)在临床诊治诊断学中有多种应用。然而，目前分离等离子EV的技术存在繁琐的程序和有限的产量。在此，我们报告了一种快速高效的EV分离平台，即EV-FISHER，它由具有可裂解脂质探针（PO43--spacer-DNA-cholesterol，PSDC）的金属有机框架构成。EV-FISHER通过胆固醇从血浆中诱捕EV，并用普通离心机将它们分离。捕获的EV可以在随后被脱氧核糖核酸酶I切割PSDC时释放和收集。我们得出结论，EV-FISHER在时间（-0分钟对240分钟）、分离效率（对)，以及分离要求（12,800g对135,000g）方面具有优势。除了在血浆中的稳定性外，E...

外泌体的产生过程涉及质膜的双重内陷和含有腔内囊泡intraluminalvesicles(ILVs)的细胞内多泡体multivesicularbodies(MVBs)的形成。ILV醉终通过质膜的损伤和MVB胞吐作用以直径范围约为40-160nm的外泌体形式分泌1).质膜的di一次内陷形成杯状结构，包括细胞表面蛋白和与细胞外环境相关的可溶性蛋白2).这导致了早期分选内体early-sortingendosome(ESE)的新生形成，在某些情况下可能直接与预先存在的ESE合并[1]。ESEs可以成熟为晚期分选内体late-sortingendosomes(LSEs)，醉终生成MVBs，...

要使外泌体在临床上得以更加广fan的应用，仍然需要更加深入的研究:(1)外泌体的提纯方式主要是超速离心，这种提纯方式效率较低，耗费时间长并且相对昂贵，并不适宜在临床上应用。(2)外泌体虽然具有一定的靶向性，但这种靶向性较弱，不足以解决中流的靶向zhiliao问题。通过在外泌体表面表达特异性肽的方法可以为上述问题的解决提供较为有效的途径。(3)在外泌体的载药fang式方面，现在常用的电穿孔法虽更具优势，但往往会对外泌体或药物的完整性产生影响，转染外泌体法不能保证基因类药物全部进入外泌体内而不是粘附在外泌体表面，存在着安全隐患。(4)外泌体作为细胞分泌物质，其本身可调性并不如脂质体以及聚合物基药物...

外泌体是tumour发生和转移的关键介质，但S100A10的细胞外功能，尤其是与外泌体(EV-S100A10)相关的细胞外功能尚不清楚。在体外和体内研究了S100A10和EV-S100A10在HCC进展中的功能和机制。针对S100A10的中和抗体(NA)用于评估EV-S100A10的显着性。在功能上，S100A10在体外和体内促进HCC的起始、自我更新、化学抗性和转移。重要的是，我们发现HCC细胞在体外和HCC患者的血浆中都将S100A10分泌到外泌体中。富含S100A10的EV可增强HCC细胞的干性和转移能力，上调表皮生长因子受体(EGFR)、AKT和ERK信号，并促进上皮-间质...

在这项研究中，研究人员检测了内皮细胞衍生的EV对缺氧-葡萄糖剥夺（OGD，模拟人类中风的神经元缺血再灌注损伤）后的神经元的影响。在人脐带内皮细胞（HUVEC）-神经元共培养测定中，研究发现HUVEC减少了OGD下神经元的凋亡，并且这种作用被外泌体释放抑制剂GW4869削弱。纯化的EV可被神经元内化并减轻OGD作用下的神经元凋亡。miRNA-1290在HUVEC衍生的EV中高度富集，并在OGD下负责EV介导的神经元保护。OGD可以增强体外培养的神经元对EV的摄入。对EV摄入受体的表达检测结果显示，在OGD处理的神经元和中脑动脉阻塞（MCAO）的小鼠中，caveolin-1（Cav-1...

姜黄素的临床应用也存在着问题，比如其水溶性差，在体内代谢快速以及易被快速清chu。利用鼠淋巴瘤细胞系(EL-4)的外泌体作为姜黄素的载体，可以提高姜黄素的溶解性、稳定性以及生物利用度，将姜黄素和载有姜黄素的外泌体腹膜内注射到脂多糖(LPS)诱发的败血性休克的小鼠模型中，结果显示经外泌体运载的姜黄素可促进小鼠肺部抑制免疫反应的CD11b+Gr-1+细胞的凋亡而表现出抗yan症的效果，而单纯姜黄素的注射不能起到促进CD11b+Gr-1+细胞的凋亡效果(与注射PBS的对照组类似)。研究者还进行了目前常用的脂质体负载姜黄素，与外泌体负载姜黄素对比。脂质体和外泌体均具备作为姜黄素的载体的能力，但外泌体由...

脂质体纳米药物主动载药、药前设计和固定化酶等策略的启发，团队开发了一个新的工程化小细胞外囊泡平台，名为“酯酶响应型主动载药”(EAL)，可用于高效、稳定的加载活性yao物分子。选择广泛应用的阿魏酸酯类衍生物作为前药，建立连续的跨膜离子梯度，实现阿魏酸活性分子在小细胞外囊泡中的高载药量。结果表明，载药量和包封率分别比被动负载高约6倍和5倍。此外，团队自创的超速离心结合多种膜过滤方法可以实现大规模、高质量的小细胞外囊泡的生产。细胞外和细胞内评估实验进一步证实由EAL所制备的载阿魏酸小细胞外囊泡制剂在缓释和低毒方面的优越性能。综上所述，这些发现将为基于小细胞外囊泡的递药系统开发提供具有指导意义的见解...

细胞外囊泡（Extracellular vesicles，EVs）是几乎所有类型细胞都能分泌的具有膜结构的一类微小囊泡，通过携带携带蛋白质、脂类、核酸等生物活性分子，在细胞间通讯中发挥多功能调节作用。非编码RNA（non-coding RNA,ncRNA）可以通过调节表观遗传、转录和转录后水平的基因表达来影响CA进展。有研究表明EV来源的非编码RNA具有高度的组织特异性和稳定性，因此可以成为有前途的诊断生物标志物。tumour转移是CA治疗失败和患者死亡的主要原因。越来越多的证据表明肿瘤细胞来源的EV通过传递非编码RNA影响“organ特异性转移”，驱使tumour扩散并定植到特定的靶orga...

从体液中高精度分离小细胞外囊泡 (sEV) 对于开发下一代液体活检和再生疗法至关重要。然而，目前的 sEV 分离方法需要专门的设备和耗时的协议，并且难以产生高纯度的 sEV 亚群。在这里，我们介绍了通过波柱激发共振 (ANSWER) 进行的声学纳米级分离，它允许单步、快速（<10 分钟）、高纯度（>96% 小外泌体，>80% 外泌体）分离来自无需任何样品预处理的体液样品。粒子通过激发共振以尺寸选择性的方式迭代偏转。这种以前未发现的现象使用表面声波在流体中产生虚拟的、可调谐的柱状声场模式。无需样品预处理或复杂纳米制造方法的高精度 sEV 分离已使用 ANSWER 进行了证明，显示出作为强大工具的...

外泌体运输的基因类药物也可以是miRNA，miRNA是一类非编码的内源性RNA，主要用于调节转录后的基因表达。miRNA主要通过与mRNA的未翻译的区域(UTRs)结合起到抑制基因表达和降解mRNA的作用。与siRNA不同，miRNA抑制mRNA的表达不需要完美的碱基配对，因此每种miRNA可以抑制多种蛋白质的表达，而每种siRNA只针对一种蛋白质。miRNA的运载也存在着种种挑战:miRNA体内稳定性差、生物分布不理想、易被体内酶降解以及容易引起副反应等。越来越多的研究表明外泌体也是体内运载miRNA的优良载体，并且利用外泌体运输miRNA的zhiliao方法已经在许多疾病模型中得以应用。可...

液体活检是手术活检的微创替代方法，涵盖不同的分析物，包括细胞外囊泡(EV)、循环肿瘤细胞(CTC)、循环tumourDNA(ctDNA)、蛋白质和代谢物。几乎所有细胞都会释放外泌体，但恶性细胞释放率更高。它们是封装原始细胞的天然货物，因此可以提供了解tumour景观的窗口。外泌体通常被批量分析，这阻碍了从大型宿主EV背景分析罕见的肿瘤特异性EV亚群。在这里，我们在体外和体内分离了外泌体亚群，并表征了它们的表型和通用货物。我们使用5-氨基乙酰丙酸(5-ALA)来诱导内源性荧光肿瘤特异性外泌体(EVPpIX)的释放。对来自胶质母细胞瘤(GBM)细胞系的五个不同亚群（EVPpIX、EVC...

内皮细胞损伤在缺血性急性肾损伤（AKI）中起关键作用，并参与AKI的进展。靶向肾内皮细胞诊治可能会改善血管损伤并进一步改善缺血性AKI的预后。在此，鉴定了P-选择素作为内皮细胞缺血性AKI的生物标志物，并开发了具有成像和诊治功能的P-选择素结合肽(PBP)工程化细胞外囊泡(PBP-EV)。结果表明，PBP-EV表现出对受损肾脏的选择性靶向倾向，同时通过分子成像量化肾脏中P-选择素的表达，为AKI的早期诊断提供时空信息。同时，PBP-EVs通过减轻炎症浸润、改善修复性血管生成和改善肾实质的适应不良修复，在促进肾脏修复和抑制纤维化方面显示出优越的肾脏保护功能。总之，PBP-EVs作为本...

外泌体作为药物或作为药物递送载体的诊治潜力正在被积极的探索。与脂质体相比，注射的外泌体可有效进入其他细胞，并可在小鼠外源性给药后以醉小的免疫清chu递送功能性分子。此外，外泌体的诊治应用前景广阔，因为它们已被证实耐受性良好。来源于间充质细胞及上皮细胞的外泌体在小鼠中重复注射时不会诱导毒性。MSC来源的外泌体已被提出是诊治本身，使用MSC来源的外泌体诊治移植物抗宿主病患者表明，重复注射耐受性良好，没有实质性副作用，未引起患者反应。外泌体被工程化改造后，具有靶向特定细胞类型或组织的功能。浙江海洋动物组织外泌体Western blot检测 外泌体对免疫应答的调节也可能涉及免疫调节分子的呈递...

脂质体纳米药物主动载药、药前设计和固定化酶等策略的启发，团队开发了一个新的工程化小细胞外囊泡平台，名为“酯酶响应型主动载药”(EAL)，可用于高效、稳定的加载活性yao物分子。选择广泛应用的阿魏酸酯类衍生物作为前药，建立连续的跨膜离子梯度，实现阿魏酸活性分子在小细胞外囊泡中的高载药量。结果表明，载药量和包封率分别比被动负载高约6倍和5倍。此外，团队自创的超速离心结合多种膜过滤方法可以实现大规模、高质量的小细胞外囊泡的生产。细胞外和细胞内评估实验进一步证实由EAL所制备的载阿魏酸小细胞外囊泡制剂在缓释和低毒方面的优越性能。综上所述，这些发现将为基于小细胞外囊泡的递药系统开发提供具有指导意义的见解...

由于卵巢中流细胞质膜上的磷脂酰丝氨酸（phosphati[1]dylserine，PS）可以外泌体形式分泌入血，恶性卵巢ai患者血浆外泌体中的PS水平明显高于卵巢良xing病变患者和健康对照者，因此外泌体中的PS可用于协助早期卵巢恶性中流的筛查和诊断。外泌体可穿透血-脑脊液屏障的特点也为脑中流患者提供了早期诊断的重要工具。血浆微囊泡EGFRvIII mRNA已被证明可作为胶质母细胞瘤患者诊断的支持证据。2020年，David Lyden和William R. Jarnagin教授团队合作，通过探究来自不同ai种组织、血浆和其他体液的426个人类样品中细胞外囊泡和颗粒（extracellular...

要使外泌体在临床上得以更加广fan的应用，仍然需要更加深入的研究:(1)外泌体的提纯方式主要是超速离心，这种提纯方式效率较低，耗费时间长并且相对昂贵，并不适宜在临床上应用。(2)外泌体虽然具有一定的靶向性，但这种靶向性较弱，不足以解决中流的靶向zhiliao问题。通过在外泌体表面表达特异性肽的方法可以为上述问题的解决提供较为有效的途径。(3)在外泌体的载药fang式方面，现在常用的电穿孔法虽更具优势，但往往会对外泌体或药物的完整性产生影响，转染外泌体法不能保证基因类药物全部进入外泌体内而不是粘附在外泌体表面，存在着安全隐患。(4)外泌体作为细胞分泌物质，其本身可调性并不如脂质体以及聚合物基药物...

外泌体在疾病中的生物学中的作用不断被发现，同时阐述其在各种病理诊断和诊治中的效用的研究数量也大幅增加。这利用了外泌体分泌的复杂物质，允许疾病检测和监测的多组分诊断窗口。外泌体在将功能性货物递送到病变细胞中的特性也有利于其作为诊治载体，无论是在基础水平还是应用水平。外泌体在所有生物体液中都有发现，并由所有细胞分泌，使其作为微创液体活检具有吸引力，有可能纵向采样跟踪疾病进展。外泌体生物发生能够捕获复杂的细胞外和细胞内分子货物，用于全mian的、多参数的诊断检测。外泌体上的表面蛋白也有利于其免疫捕获和富集。一直以来，外泌体诊断应用重点的疾病包括CVDs、影响CNS系统(CNS)的疾病和C...

姜黄素的临床应用也存在着问题，比如其水溶性差，在体内代谢快速以及易被快速清chu。利用鼠淋巴瘤细胞系(EL-4)的外泌体作为姜黄素的载体，可以提高姜黄素的溶解性、稳定性以及生物利用度，将姜黄素和载有姜黄素的外泌体腹膜内注射到脂多糖(LPS)诱发的败血性休克的小鼠模型中，结果显示经外泌体运载的姜黄素可促进小鼠肺部抑制免疫反应的CD11b+Gr-1+细胞的凋亡而表现出抗yan症的效果，而单纯姜黄素的注射不能起到促进CD11b+Gr-1+细胞的凋亡效果(与注射PBS的对照组类似)。研究者还进行了目前常用的脂质体负载姜黄素，与外泌体负载姜黄素对比。脂质体和外泌体均具备作为姜黄素的载体的能力，但外泌体由...

获得囊泡粒径分布的两种方法动态光散射(DLS)和纳米颗粒跟踪分析(NTA)都被广fan应用于外泌体颗粒数目和粒径分布的测量，但两种方法也各有不足。动态光散射法中散射光强度依赖于颗粒质量(体积)，混合体系中大囊泡的存在(即使只有很少的量)将严重影响测量结果，因此动态光散射法更适用于单分散体系。而且动态光散射法所得的结果强烈依赖于所应用的数学算法。而采用纳米颗粒跟踪分析仪对不同粒径范围的囊泡进行检测时，为了得到准确的浓度和粒径信息，需要根据所要测量的颗粒粒径范围对仪器分别校准，操作繁琐。受检测灵敏度所限，纳米颗粒跟踪分析仪适用于粒径范围50nm～1μm的颗粒，粒径小于50nm的外泌体无法检测。除此...

缺氧已被证明会诱导细胞外囊泡(EV)的释放，并对EV的组成和功能产生影响。缺氧EV可增强内皮细胞的存活和血管生成能力，在免疫细胞中具有kang炎作用，并通过改变浸润性单核细胞和巨噬细胞的免疫代谢特征来促进tumour进展和侵袭。miR-21-5p是EV中醉常报道的缺氧诱导的microRNA(miRNA)。载有miR-21-5p的EV与转移呈正相关，促进内皮细胞的血管生成，并已被证明可以增加ai细胞的迁移、扩张和侵袭。在几项研究中，缺氧显示以缺氧诱导因子-α(HIFα)依赖性方式增加EV中miR-21-5p的水平，并且这些EV与受体的kang炎和抗细胞凋亡作用相关细胞。EVs调节受体...

除运输药物进行疾病zhiliao之外，外泌体还能进行免疫zhiliao，外泌体免疫zhiliao和载药zhiliao。进行免疫调节时，外泌体通常运载TGF-β1、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)或MAGE抗原等物质。在这些研究中，分泌外泌体的母代细胞往往选用具有很好抗原递呈(antigenpresentation)能力的树突细胞或者中流细胞。Cao等采用鼠B淋巴瘤细胞作为母代细胞，通过热处理的方式使淋巴瘤细胞分泌的外泌体含有更多的热休克蛋白(HSP60和HSP90)和其他一些刺激免疫的分子，如主要组织相容性复合物(MHC-I和MHC[1]II)以及CD40、CD86等，与未热处理的...

在Rameshwar等的研究中，采用转染间充质干细胞的方法，使外泌体载有anti-miR-9。在进行间充质细胞和多形性成角质细胞瘤(GBM)细胞间anti-miR-9传递的实验时，发现两种细胞不仅可以通过缝隙连接介导的细胞间通讯(GJIC)也可以通过外泌体传递anti-miR-9。且anti-miR-9降低两种GBM细胞(U87和T98G)对中流药物替莫唑胺(TMZ)的抵抗能力的功能主要由外泌体传递的anti-miR-9实现，而非经GJIC传递的anti-miR-9，显示出外泌体在运载miRNA进行基因zhiliao时的潜力。利用外泌体进行GBM的zhiliao不只停留在体外细胞实验上，也已经...

外泌体中包含的mRNAs和miRNAs在进入受体细胞后仍具有翻译蛋白质、促进病毒感ran等功能。据估计，单个外泌体含有约≤100拷贝数的蛋白质和≤10000拷贝数的核苷酸。不同细胞来源的外泌体中既包含与细胞形成、结构和物质转运相关的共有成分，也包含与来源细胞的生物功能相关的特异分子。如B淋巴细胞、树突状细胞、肥大细胞和肠上皮细胞来源的外泌体含有大量的主要组织相容性复合体蛋白质MHCclassⅡ和MHCclassⅠ，血小板和T细胞来源的外泌体则包含诸如血管性血友病因子、穿孔素和颗粒酶等特殊蛋白质，而ai细胞来源的外泌体表面可能含有中流特异的蛋白质分子。这类特异分子在外泌体介导细胞信号转导、参与生...

外泌体的异质性包括：大小异质性、含量异质性、功能异质性和细胞来源异质性。尺寸不等可能是由于MVB界膜内陷不均匀，导致液体和固体的总含量不同，外泌体可能包含由不同大小范围定义的亚群。大小异质性也会导致不同量的外泌体含量；微环境和细胞固有的生物学可能影响外泌体的含量及其生物学标志物。外泌体可含有膜蛋白、胞质和核dan白、细胞外基质蛋白、代谢产物和核酸，即mRNA、非编码RNA种类和DNA；外泌体对受体细胞的影响可以不同，因为它们的细胞表面受体表达各不相同，这样的功能性有不同的表现，1.诱导细胞存活，2.诱导细胞凋亡，3.诱导免疫调节等；异质性也可以基于外泌体的起源organ和组织，包括...

在Rameshwar等的研究中，采用转染间充质干细胞的方法，使外泌体载有anti-miR-9。在进行间充质细胞和多形性成角质细胞瘤(GBM)细胞间anti-miR-9传递的实验时，发现两种细胞不仅可以通过缝隙连接介导的细胞间通讯(GJIC)也可以通过外泌体传递anti-miR-9。且anti-miR-9降低两种GBM细胞(U87和T98G)对中流药物替莫唑胺(TMZ)的抵抗能力的功能主要由外泌体传递的anti-miR-9实现，而非经GJIC传递的anti-miR-9，显示出外泌体在运载miRNA进行基因zhiliao时的潜力。利用外泌体进行GBM的zhiliao不只停留在体外细胞实验上，也已经...

在外泌体中引入药物的方式包括体内装载和体外装载两种。体内药物装载可以通过传统方法(如病毒转染、脂质体转染或电穿孔等)转染来源细胞，编码感兴趣的RNA或蛋白质，也可以使药物与来源细胞共混，使细胞分泌产生含有目标生物分子的外泌体。体外药物装载则首先需要得到纯化的外泌体，然后将感兴趣的药物通过电穿孔或脂质体转染等方法装入纯化的外泌体。外泌体内可装载的药物包括小分子化学药物、蛋白质和多肽、核酸药物、天然产物等。外泌体复杂的内容物被认为是疾病诊断的无创或微创生物标志物。浙江动物组织外泌体Western blot检测细胞外囊泡（EVs）因其生物相容性、大小适宜、体循环中保存时间长和低免疫原性等优势，在生物...

外泌体介导中流耐药性:中流细胞来源的外泌体中某些miRNAs和non-codingRNAs(lncRNA)的变化在中流化疗抗药性的发生中起重要作用。Qu等研究发现lncRNA可以通过竞争性结合miR-34/miR-449，促进晚期肾细胞ai细胞中的跨膜受体酪氨酸激酶anexelekto(AXL)和tyrosine[1]proteinkinaseMet(c-MET)表达，引发舒尼替尼耐药。而外泌体能够将这一lncRNA运输至舒尼替尼敏感的ai细胞，从而传播舒尼替尼的抗性。外泌体中的miR21能够抑制卵巢ai细胞凋亡，并通过结合肌动蛋白丝相关蛋白凋亡酶激huo因子(apoptoticproteas...

卵巢ai患者与良性卵巢疾病患者血清外泌体中的miRNA表达谱有明显差异，表明血清外泌体中的miRNA可以作为卵巢ai活检的替代诊断标志物。多项研究表明外泌体中的miR-21在包括大多数ai症的多种病理条件下过度表达。尿液外泌体来源于泌尿系统相关的各种细胞，包括肾小球足细胞、肾小管细胞和膀胱等，因此尿液外泌体数目、形态和生化性质的改变往往反映泌尿系统疾病。通过对前列腺ai症患者尿液中的外泌体进行转录组分析，鉴定到两种已知的前列腺ai症标志物PCA-3(prostatecanceranti[1]gen3，前列腺ai抗原3)和TMPRSS2:ERG(thefusiongeneoftransmembr...