营养肉汤(NB):基础而重要的细菌培养基营养肉汤(Nutrient Broth,简称NB)是一种广使用的细菌培养基,适用于一般细菌的培养、传代、转种、复壮和增菌。其主要成分包括蛋白胨、牛肉浸粉(或牛肉膏粉)和氯化钠。其中,蛋白胨和牛肉浸粉为微生物生长提供氮源、B族维生素、氨基酸和其他生长因子,同时也提供碳源;氯化钠则用于维持培养基的渗透压。制备方法营养肉汤的典型配方为:蛋白胨10.0g、牛肉浸粉3.0g、氯化钠5.0g,加蒸馏水至1000ml。制备时,将上述成分加热搅拌溶解于蒸馏水中,调节pH至7.2±0.2,分装至三角瓶或试管中,121℃高压灭菌15分钟。灭菌后的营养肉汤应为淡黄色透明无沉淀的溶液,pH值应为7.2-7.4。应用领域营养肉汤适合营养需求较高的细菌的生长,但不适用于苛养型微生物。它广用于食品、牛奶、奶制品的微生物检测,以及其他需要一般细菌培养的实验中。此外,营养肉汤还可作为一些特殊培养基的基本成分,在基础培养基中添加所需营养物质,以满足特定微生物的生长需求。注意事项在制备过程中,应穿戴实验服、护目镜、手套等防护设备,以防止培养基飞溅到皮肤或眼睛中。确保实验环境清洁,以减少微生物污染的可能性。无菌操作台的灯光下,培养皿被小心翼翼翻转,防止冷凝水影响菌种的生长形态。GC琼脂预装培养皿
硫乙醇酸盐流体培养基(不含琼脂,FT)是一种广泛应用于微生物学研究和无菌检测的培养基。其独特的配方和性能使其在需氧菌、厌氧菌和微需氧菌的培养中表现出好的优势。特点与优势硫乙醇酸盐流体培养基(不含琼脂)的优势在于其能够在普通有氧环境下提供厌氧条件,同时支持需氧菌和厌氧菌的生长。培养基中添加了硫乙醇酸钠和L-胱氨酸,这些成分可降低氧化还原电位,形成上层有氧、下层无氧的梯度环境,从而满足不同微生物的生长需求。此外,该培养基不含琼脂,流动性更强,适合混浊样品的检测。培养基的主要成分包括胰酪蛋白胨、酵母浸出粉、葡萄糖、氯化钠、硫乙醇酸钠、L-胱氨酸和刃天青。其中,胰酪蛋白胨和酵母浸出粉提供丰富的氮源和生长因子,葡萄糖作为碳源支持微生物生长,刃天青作为氧化还原指示剂,氧化时呈粉红色,还原时无色。性能与应用硫乙醇酸盐流体培养基(不含琼脂)广泛应用于药品、生物制品和医疗器械的无菌检测,符合中国药典、USP和EP标准。实验表明,该培养基对多种常见菌株(如金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、生孢梭菌等)均表现出良好的生长支持能力。此外,硫乙醇酸盐能够中和含汞、砷等防腐剂的抑菌作用,确保微生物的正常生长。SDA0.25%青霉素酶预装培养皿肌醇测定培养基是一种专门用于检测样品中肌醇含量的微生物培养基。
营养琼脂(pH 6.0):基础而重要的微生物培养基营养琼脂(pH 6.0)是一种常用的微生物培养基,适用于一般细菌的培养和分离。其成分主要包括蛋白胨、牛肉浸粉、氯化钠和琼脂。蛋白胨和牛肉浸粉为微生物提供氮源、碳源和维生素;氯化钠维持渗透压平衡;琼脂作为凝固剂,使培养基形成固体状态。制备方法营养琼脂(pH 6.0)的制备相对简单。通常,称取23.0g培养基干粉,加入1L蒸馏水或去离子水中,加热煮沸至完全溶解。然后,将溶液分装到适当的容器中,121℃高压灭菌15分钟或115℃灭菌30分钟。灭菌结束后,摇匀以防琼脂沉积于器皿底部而凝固。应用领域营养琼脂(pH 6.0)广泛应用于微生物学研究和检测。它可用于细菌总数测定、保存菌种及纯培养,也可用于药敏试验和微生物的初步鉴定。此外,通过添加不同的生物液体,营养琼脂还能增强对特定微生物的选择性。注意事项制备过程中,注意控制加热温度和时间,避免破坏琼脂的营养成分。在无菌环境下操作,避免杂菌污染。干粉培养基使用后应立即旋紧瓶盖,避免吸潮结块。储存于避光、干燥处,未开封产品保质期一般为三年。总之,营养琼脂(pH 6.0)因其成分简单、制备方便和应用广,已成为微生物学研究和检测中的重要工具。
平板计数琼脂(PCA):菌落总数测定的通用培养基平板计数琼脂(PCA)是一种广泛应用于菌落总数测定的非选择性固体培养基,适用于食品、化妆品、饮用水、奶制品等多种样品中微生物的计数。制备方法为:称取23.5g培养基干粉,加入1000ml蒸馏水或去离子水中,加热煮沸至完全溶解,121℃高压灭菌15分钟。检验原理胰蛋白胨提供碳源和氮源;酵母浸粉提供B族维生素;葡萄糖提供能源;琼脂作为凝固剂。应用领域PCA培养基主要用于菌落总数的测定,广泛应用于食品、化妆品、饮用水等领域的微生物检测。使用方法稀释倒平板法:称取23.5g培养基,加入1000ml蒸馏水,加热煮沸至完全溶解,121℃高压灭菌15分钟。取样品25g或25ml,溶解于225ml无菌生理盐水或无菌磷酸盐缓冲液中,进行10倍梯度稀释。选择2-3个合适的稀释度,吸取1ml稀释液于无菌平皿中,加入45-50℃的培养基约15-25ml,混匀后冷却凝固。翻转平板,36±1℃培养48±2小时。平板涂布法:同稀释倒平板法前几步操作。将稀释液0.1ml或0.2ml涂布于已倒好的平板上,36±1℃培养48±2小时。注意事项配制好的培养基应尽快使用,避免长时间放置导致细菌繁殖。倒平板时,培养基温度应适宜,避免烫伤。
样芽胞杆菌显色培养基:高效检测食品中的致病菌蜡样芽胞杆菌显色培养基是一种用于快速检测食品、水、乳制品和肉制品中蜡样芽胞杆菌的微生物培养基。这种培养基通过特异性的显色反应,使蜡样芽胞杆菌在培养基上形成蓝绿色的菌落,并且菌落周围有一圈不透明环。这种显色特性使得蜡样芽胞杆菌能够与其他非目标菌(如枯草芽胞杆菌、金黄色葡萄球菌等)区分开来。制备时,称取基础培养基7.95g,加入180ml蒸馏水,加热溶解并不停搅拌;另取0.6g蜡样芽胞杆菌添加剂,加入20ml无菌水,并加入一些玻璃球,不停振动5-10分钟,使其乳化均匀。将二者分别于121℃高压灭菌15分钟。冷却至45-50℃左右时,把蜡样芽胞杆菌添加剂加入基础培养基中,轻轻混匀,倾入无菌平皿。操作步骤按GB标准、SN标准、FDA标准或其它方法制备样品液。样品液在30±1℃增菌培养18-24小时。取增菌液划线接种于蜡样芽胞杆菌显色培养基平板上,36±1℃培养18-24小时。蜡样芽胞杆菌典型菌落为蓝绿色且菌落周围有一不透明环。若24小时没有出现典型菌落,可延长培养至48小时。对可疑蜡样芽胞杆菌可划线接种到营养琼脂平板上,30±1℃培养18-24小时,挑取单菌落做蜡样芽胞杆菌全套生化试验。李斯特氏菌显色培养基具有高灵敏度和特异性,能够有效抑制其他非目标菌的生长,减少误判的可能性。GC琼脂预装培养皿
游离生物素测定培养基广泛应用于食品检测,特别是婴儿食品和乳粉中游离生物素的测定。GC琼脂预装培养皿
哥伦比亚血琼脂基础:微生物学研究中的关键培养基哥伦比亚血琼脂基础(Columbia Blood Agar Base)是一种广泛应用于微生物学研究和检测的培养基,特别适用于分离和培养营养要求较高的细菌。组成哥伦比亚血琼脂基础的主要成分包括:特殊蛋白胨:23.0g/L,提供细菌生长所需的氮源、氨基酸、维生素及生长因子。可溶性淀粉:1.0g/L,提供碳源。氯化钠:5.0g/L,维持平衡的渗透压。琼脂:10.0g/L,作为凝固剂。pH值:7.3±0.2(25℃)。制备方法称取3.9g培养基干粉,加热溶解于100ml蒸馏水中。分装三角瓶,121℃高压灭菌15分钟。冷却至50℃左右时,加入5%无菌脱纤维羊血,混匀后倾入无菌平皿。应用哥伦比亚血琼脂基础广用于:细菌分离与培养:适用于多种细菌的分离和培养,尤其是营养要求较高的细菌。溶血实验:用于鉴定溶血性细菌,通过观察菌落周围的血红细胞溶解情况,帮助确定微生物对红细胞的溶血能力。临床检测:在医院实验室中,用于分离和识别病原微生物,如细菌和菌,有助于被传染性疾病的诊断。注意事项培养基中含少量淀粉,若灭菌前未加热煮沸溶解,灭菌后冷却可能出现少量白色沉淀。制备好的哥伦比亚血琼脂培养基于2~8℃保存,不可冻藏。GC琼脂预装培养皿