DTA培养基(葡萄糖胰蛋白胨琼脂)是一种用于微生物培养的培养基,其特点和使用方法如下:1.**用途**:DTA培养基主要用于嗜热菌芽孢(包括需氧芽孢总数、平酸芽孢和厌氧芽孢)的分离培养。2.**成分**:该培养基的成分通常包括胰酪蛋白胨、葡萄糖、琼脂和溴甲酚紫。具体成分比例为胰酪蛋白胨10.0g/L、葡萄糖5.0g/L、琼脂15.0g/L以及溴甲酚紫0.04g/L。3.**pH值**:pH值控制在6.7±0.1(25℃)。4.**检验原理**:胰酪蛋白胨提供碳氮源、维生素和生长因子;葡萄糖作为可发酵的糖,溴甲酚紫作为酸碱指示剂;琼脂作为凝固剂。5.**配制方法**:称取30.0gDTA培养基粉末,加热溶解于1000ml蒸馏水中,然后在121℃下高压灭菌15分钟,备用。6.**使用方法**:在加热灭菌前,培养基成分应边搅拌边溶解于水中。灭菌时间通常要在121℃下保持15~20分钟,这个时间从中心温度达到121℃开始计算。7.**结果观察**:嗜热脂肪芽孢杆菌在DTA培养基上的生长特征为黄色菌落。8.**微生物灵敏度试验**:按标签用法制备培养基,接种质控菌株,放置于55℃需氧培养48小时,以验证培养基的性能。低温是降低细菌代谢的关键因素之一。常用的低温保存方法包括4℃冰箱保存、-20℃至-80℃的低温冰箱保存。改良DG-18琼脂预装培养皿
嗜盐菌选择性琼脂是一种专门用于分离和培养嗜盐菌的培养基,其特点和应用如下:1.**成分**:-蛋白胨:20.0g/L-氯化钠:40.0g/L-结晶紫:0.0005g/L-琼脂:17.0g/L-pH值:8.7±0.1(25℃)2.**检验原理**:-蛋白胨提供氮源和碳源,支持微生物生长。-高含量的氯化钠创造高渗环境,有利于嗜盐菌的生长,同时抑制不耐高盐的细菌。-结晶紫抑制革兰氏阳性菌的生长。-琼脂作为凝固剂,使培养基凝固成固体。-高pH值有助于抑制部分杂菌的生长。3.**配制方法**:-称取77.0g培养基粉末,加热搅拌溶解于1000mL蒸馏水中。-分装后,121℃高压灭菌15分钟,备用。4.**使用方法**:-将培养基倾注成平板,待凝固后使用。-接种样品后,放置于36±1℃恒温培养箱中需氧培养18-24小时。5.**细菌生长特征**:-副溶血性弧菌ATCC17802:无色菌落,较湿润。-溶藻弧菌ATCC17749:无色菌落。-金黄色葡萄球菌ATCC25923:抑制生长。6.**微生物灵敏度试验**:-按标签用法制备培养基,接种质控菌株,放置于36±1℃需氧培养18-24小时。-回收率计算时,用TSA琼脂做对照培养基。DCLS琼脂培养皿CAS培养基的pH值通常控制在6.8±0.1(25℃),以保证微生物的生长和铁载体的活性 。
甘氨酸培养基是一种专门用于微生物培养的培养基,其特点主要包括:1.**培养基成分**:甘氨酸培养基通常包含布氏肉汤、琼脂和甘氨酸。其中,甘氨酸是该培养基的关键成分,通常添加量为10.0克/升。2.**pH调节**:甘氨酸培养基的pH值一般调节在7.0±0.2(25℃)。3.**灭菌处理**:制备好的培养基需要进行灭菌处理,通常采用121℃高压灭菌15分钟。4.**用途**:甘氨酸培养基主要用于弯曲杆菌甘氨酸耐受性试验,如GB标准所规定的。它特别适用于空肠弯曲菌和大肠弯曲菌的分离和培养,因为这些细菌对甘氨酸有耐受性。在微需氧环境下,于42℃培养48小时后,若培养基表面出现云雾状现象,则为阳性结果。5.**培养特征**:在甘氨酸培养基上,空肠弯曲杆菌能够产生灰色、湿润、平铺的菌落,并且可能带有金色金属光泽。6.**制备方法**:将甘氨酸培养基的粉末成分溶解在适量的蒸馏水中,加热以帮助溶解,然后进行灭菌处理。在冷却至大约50°C时,可以进行倒平板或分装试管。7.**储存条件**:甘氨酸培养基通常需要在干燥、避光的条件下储存,以保持其有效性。
牛津琼脂(OXA)基础是一种用于分离培养李斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)的选择性培养基。它的成分包括特殊蛋白胨、可溶性淀粉、氯化钠、七叶苷、柠檬酸铁铵、氯化锂和琼脂等,pH值控制在7.0±0.2(25℃)。**特点**:1.**选择性**:含有氯化锂和抗生物质添加剂(如多粘菌素E、放线菌酮、吖啶黄素、头孢双硫唑甲氧、磷霉素),这些成分能够抑制革兰氏阴性菌和大多数革兰氏阳性菌的生长,特别是非李斯特氏菌。2.**应用**:主要用于食品、水和污水样本中李斯特氏菌的选择性分离培养,符合ISO和SN标准。3.**配制方法**:通常称取5.85g的OXA基础粉末,溶解在100mL蒸馏水中,高压灭菌15分钟后冷却至50℃,再加入配套的添加剂,混匀后倾入无菌平皿备用。4.**结果观察**:李斯特氏菌在OXA培养基上生长时,会形成黑色菌落,并且菌落周围可能有黑色环。牛津琼脂基础因其高选择性和特异性,是检测食品和水样本中李斯特氏菌污染的重要工具。KI培养基主要用于鉴别肠道菌发酵葡萄糖和乳糖的能力,以及产生硫化氢的生化反应。
胰酪胨大豆羊血琼脂(TSSB)基础是一种用于微生物学实验的培养基,主要用于蜡样芽孢杆菌的溶血测试实验。以下是它的一些主要特点:1.**成分**:TSSB基础的配方包含胰酪胨、植物蛋白胨、氯化钠、无水磷酸氢二钾、葡萄糖和琼脂等。具体成分为每升培养基中包含胰酪胨15.0克、植物蛋白胨5.0克、氯化钠5.0克、无水磷酸氢二钾2.5克、葡萄糖2.5克和琼脂12.0克。2.**pH值**:该培养基的pH值通常调节在7.2±0.2(25℃)。3.**灭菌处理**:制备好的培养基需要进行121℃高压灭菌15分钟。4.**添加剂**:每瓶需配套添加脱纤维羊血使用,以提供红细胞,检测微生物溶血特性。5.**检验原理**:胰酪胨、植物蛋白胨在培养基中作为营养物质提供菌体生长所需的碳源、氮源、维生素及矿质元素等;无水磷酸二氢钠作为pH缓冲体系;琼脂作为凝固剂;脱纤维羊血提供红细胞,检测微生物溶血特性。6.**用法**:称取本品42.0g,加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中,分装,每瓶100ml,121℃高压灭菌15分钟,冷至45-50℃时,加入5-10ml无菌脱纤维羊血,混匀后倾注平板,备用。7.**质量控制和典型特征**:在30-32℃培养18-24小时,蜡样芽孢杆菌典型特征为在菌落周围呈现β型完全溶血的溶血环。巴氏芽孢杆菌的芽孢形成需要特定的培养条件,包括营养和环境因素。例如,使用改良的Schaeffer培养基。SDAP平板
尽管哥伦比亚血琼脂基础有许多优点,但也存在一定的局限性,如对嗜血杆菌生长的抑制以及受血液类型的影响。改良DG-18琼脂预装培养皿
锰盐营养琼脂(ManganeseNutrientAgar)是一种用于微生物培养的培养基,特别适用于嗜热需氧芽孢杆菌的检验。以下是它的一些主要特点和用途:1.**成分**:通常包含硫酸锰、蛋白胨、牛肉粉、氯化钠和琼脂。其中,硫酸锰的含量为0.0308g/L,蛋白胨为10.0g/L,牛肉粉为3.0g/L,氯化钠为5.0g/L,琼脂为15.0g/L。2.**pH值**:培养基的pH值控制在7.3±0.1(25℃),为微生物提供适宜的生长环境。3.**用途**:主要用于嗜热需氧芽孢杆菌的检验,也可用于芽孢杆菌或梭菌的培养和孢子的形成。4.**检验原理**:蛋白胨和牛肉粉提供碳氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;琼脂作为培养基的凝固剂;硫酸锰可促进芽孢的生成。5.**使用方法**:称取本品33.0g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,121℃高压灭菌15分钟,备用。需要注意的是,由于培养基中含有少量硫酸锰,灭菌后可能出现微量沉淀。6.**质量控制**:通过接种质控菌株,如短小芽孢杆菌CMCC(B)63202、枯草芽孢杆菌黑色变种ATCC9372等,放置于55℃需氧培养48小时,以验证培养基的性能。改良DG-18琼脂预装培养皿