支原体培养基基础(含精氨酸)是一种专门用于培养支原体的培养基,它包含精氨酸作为生长因子,适用于那些需要精氨酸才能生长的支原体,如口腔支原体等。以下是该培养基的一些特点和配制方法:1.**配方组成**:通常包含猪胃消化粉、牛肉浸粉、酵母浸粉、氯化钠、葡萄糖、L-精氨酸和酚红等成分。2.**配制方法**:-称取培养基粉末,按照说明书比例(通常是25.52g/L)溶解在蒸馏水中。-加热溶解并调节pH至7.1-0.2(25℃)。-121℃高压灭菌15分钟。-冷却至室温后,无菌操作下加入灭活小牛血清或马血清(通常为200mL)和青霉素(通常为80万单位)。-混匀后分装到无菌试管中备用。3.**用途**:主要用于药品和生物制品中支原体的检测,特别是口腔支原体的培养和检测。4.**培养条件**:通常在36℃±1℃的条件下培养7-14天。5.**观察指标**:培养基中的酚红作为pH指示剂,支原体生长时会因代谢产物改变培养基的pH值,导致颜色变化。例如,口腔支原体分解精氨酸产碱,使培养基颜色由橙色变为红色。6.**质量控制**:通过接种已知的质控菌株来验证培养基的灵敏度和有效性。克氏双糖铁试验时间通常控制在18-24小时,以确保细菌发酵充分且不过度,避免影响判断结果。TSA+头孢菌素酶预装培养皿
TCBS琼脂(ThiosulfateCitrateBileSaltsSucroseAgar)是一种用于分离培养弧菌科细菌,特别是致病性弧菌的选择性培养基。以下是它的一些主要特点:1.**成分**:-酵母浸粉:5.0g/L-蛋白胨:10.0g/L-硫代硫酸钠:10.0g/L-枸橼酸钠:10.0g/L-牛胆粉:5.0g/L-牛胆酸钠:3.0g/L-蔗糖:20.0g/L-氯化钠:10.0g/L-柠檬酸铁:1.0g/L-溴麝香草酚兰:0.04g/L-麝香草酚兰:0.04g/L-琼脂:15.0g/L-pH值:8.6±0.2(25℃)2.**检验原理**:-蛋白胨和酵母浸粉提供氮源、碳源及维生素等生长因子。-氯化钠提供弧菌嗜盐生长的环境,高浓度抑制其他细菌生长。-蔗糖作为可发酵碳源。-枸橼酸钠、高pH值和硫代硫酸钠抑制革兰氏阳性菌和大肠菌群生长。-硫代硫酸钠与柠檬酸铁反应,检测细菌产硫化氢。-溴麝香草酚兰和麝香草酚兰作为pH指示剂,细菌利用蔗糖产酸会使得指示剂变黄。-琼脂作为凝固剂。3.**使用方法**:-称取8.9g培养基,溶解于100ml蒸馏水中,煮沸后冷却至50℃,倾入无菌平皿,备用。-注意:无需高压灭菌。4.**不同细菌在TCBS琼脂上的生长特征**:-副溶血性弧菌:蓝绿色斗笠状菌落,H2S阴性。-溶藻弧菌:黄色菌落,H2S阴性。-霍乱弧菌:黄色菌落,H2S阴性。
半固体储存培养基是一种在微生物学研究和细胞培养领域中扮演重要角色的培养基。它主要用于观察微生物的动力、菌种的保藏与运输、厌氧菌的培养、菌种鉴定、细胞培养、噬菌体效价测定以及微生物趋化性研究等。半固体培养基通常由液体培养基加入少量凝固剂制成,例如琼脂的用量在0.2~0.7%之间。在具体应用上,半固体培养基可以用于以下方面:1.**微生物动力观察**:通过推测细菌是否有鞭毛来进行鉴定。2.**菌种保藏与运输**:便于菌种的短时间保存和长途运输。3.**厌氧菌培养**:适用于厌氧菌的培养,对于研究厌氧微生物的生长和代谢至关重要。4.**菌种鉴定**:通过观察菌落的形态和生长特性来区分不同的微生物种类。5.**细胞培养**:在细胞生物学领域,半固体培养基广泛应用于干细胞、细胞克隆、细胞表达和细胞毒性等实验。6.**噬菌体效价测定**:用于双层平板法测定噬菌体的效价,是研究病毒与宿主相互作用的重要手段。7.**微生物趋化性研究**:帮助研究微生物的趋化性,即微生物对化学物质的定向移动反应。
NGKG琼脂基础是一种用于食品中蜡样芽孢杆菌分离培养的培养基。以下是它的一些主要特点:1.**成分**:NGKG琼脂基础的配方包含蛋白胨、酵母浸粉、氯化钠、甘氨酸、苯酚红和琼脂等成分。蛋白胨和酵母浸粉提供碳源、氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持渗透压;甘氨酸提供氮源;苯酚红作为酸碱指示剂;琼脂作为凝固剂。2.**pH调节**:NGKG琼脂基础的pH值通常调节在6.8±0.1(25℃)。3.**灭菌处理**:制备好的培养基需要进行121℃高压灭菌15分钟。4.**添加物**:在冷却至50℃左右时,需要加入20%卵黄液100mL(卵黄液制备:取无菌卵黄液20mL,生理盐水80mL,混匀)。卵黄液提供卵磷脂,产卵磷脂酶的细菌可水解卵磷脂,使其菌落周围形成一个白色的沉淀环。5.**抗生物质**:每200mL培养基中添加多粘菌素B溶液1支,以抑制革兰氏阴性细菌生长。6.**用途**:NGKG琼脂基础主要用于食品中蜡样芽孢杆菌的分离培养。7.**培养特征**:在30℃±1℃需氧培养18-24小时后,典型的蜡样芽孢杆菌在NGKG琼脂基础上表现为浅红色菌落,边缘不规则,有卵磷脂沉淀环。8.**质量控制**:通过接种质控菌株并观察培养特征来验证培养基的质量。 木醋杆菌的培养基通常需要含有适量的碳源,如葡萄糖、蔗糖等,以提供细菌生长和合成细菌纤维素所需的能量。
使用TCBS琼脂进行细菌分离实验的步骤如下:1.**准备工作**:-确保实验室无菌操作条件,穿戴适当的实验服和手套。-准备无菌的接种环、涂布器、无菌吸管和移液器等工具。2.**配制培养基**:-按照培养基包装上的说明,称取适量的TCBS琼脂粉末。-将称取的TCBS琼脂粉末加入到适量的蒸馏水中,通常为100mL。-将混合物加热至沸腾,以确保琼脂完全溶解。3.**冷却和倾注平板**:-将溶解好的培养基冷却至50℃左右(避免过热,以免杀死细菌),此时琼脂应该仍然是液体状态。-将冷却的培养基倒入无菌的培养皿中,一般倾注量为15-20mL/平皿。-等待琼脂凝固,形成固体培养基平板。4.**接种样品**:-使用无菌操作,将待检测的样品涂布或划线接种到TCBS琼脂平板上。-可以使用稀释涂布法、螺旋接种法或其他适当的接种方法。5.**培养**:-将接种后的平板倒置,放入恒温培养箱中。-根据实验要求,通常在36±1℃下培养18-24小时。6.**观察和选择菌落**:-培养结束后,观察平板上的生长情况,记录不同类型菌落的特征。-选择性地挑选出特定的菌落,如蓝绿色或黄色菌落,这些可能是目标弧菌。
明胶的凝固点在28℃左右,受运输过程的温度及震荡影响,出现培养基在管壁凝固形成不规则状,此为正常现象。TSA+头孢菌素酶预装培养皿
TYCSB培养基基础(TryptoneYeastCystineSucroseBacitracinMediumBase)是一种用于分离和培养特定细菌的选择性培养基。它的特点包括:1.**成分**:包含胰蛋白胨、酵母膏粉、L-胱氨酸盐酸盐、亚硫酸钠、氯化钠、无水磷酸氢二钠、碳酸氢钠、无水乙酸钠和蔗糖等,琼脂作为凝固剂。这些成分为细菌提供氮源、碳源、维生素和生长因子。2.**pH值**:培养基的pH值控制在7.3±0.2(25℃),为细菌提供适宜的生长环境。3.**选择性**:添加的杆菌肽(Bacitracin)可以抑制革兰氏阴性菌的生长,有助于选择性地分离革兰氏阳性菌,特别是链球菌和肠球菌。4.**应用**:主要用于变异链球菌(Streptococcusmutans)的分离和培养,也适用于其他链球菌和肠球菌的分离。5.**配制方法**:通常称取培养基粉末,加入到一定量的蒸馏水或去离子水中,加热煮沸至完全溶解,分装后进行高压灭菌。6.**质量控制**:通过使用特定的质控菌株进行测试,确保培养基支持目标菌株的生长,同时抑制非目标菌株。7.**储存条件**:未配制的培养基粉末应密封保存在阴凉干燥处,配制好的培养基应保存在2-8°C。8.**结果观察**:在TYCSB培养基上,可以观察到细菌的生长情况,用于进一步的鉴定和分析。TSA+头孢菌素酶预装培养皿