克罗诺杆菌筛选肉汤(CronobacterScreeningBroth,简称CSB培养基)是一种用于检测环境和食品中克罗诺杆菌的选择性培养基。克罗诺杆菌是一种重要的食源性的病原体,能够引起新生儿和婴儿的严重疾病,如坏死性小肠结肠炎、败血症和脑膜炎。以下是克罗诺杆菌筛选肉汤的一些特点和配制方法:1.**配方**:-蛋白胨:10.0g-牛肉浸粉:3.0g-氯化钠:5.0g-溴甲酚紫:0.004g-蔗糖:10.0g-万古霉素:0.01g-pH:7.4+/-0.2(25℃)2.**配制方法**:-称取28gCSB培养基粉末,用1000ml去离子水重悬。-在121°C下灭菌15分钟。-冷却至大约50°C时,加入万古霉素(每100ml培养基中加入1mg万古霉素)。-混匀后分装到无菌容器中。3.**工作原理**:-蛋白胨和牛肉浸粉提供氮源。-氯化钠维持渗透压平衡。-蔗糖作为克罗诺杆菌可发酵的糖类。-溴甲酚紫作为pH指示剂,其变色范围为pH5.2(黄色)至pH6.8(紫色)。-发酵蔗糖产酸,使得培养基的pH下降,溴甲酚紫由紫色变为黄色。4.**用途**:-CSB培养基用于检测环境和食品中的克罗诺杆菌。血琼脂基础2号可用于观察细菌生长引起的溶血现象,这有助于细菌的鉴定。NA-MUG预装培养皿
DTA培养基的pH值对微生物生长有影响。pH值是描述溶液酸碱性的基本指标,对微生物的生长和繁殖有深远的影响。微生物的适应pH范围各不相同,不同种类的微生物对pH值的敏感度不同,存在一定的平衡范围。pH值的过高或过低都可能对微生物的生长造成不利影响。在DTA培养基中,pH值被控制在6.7±0.1(25℃),这个pH值范围是为嗜热菌芽孢的分离培养而优化的。在这个pH值下,胰酪蛋白胨能够提供适宜的碳氮源和生长因子,而葡萄糖作为可发酵的糖,溴甲酚紫作为酸碱指示剂,琼脂作为凝固剂,共同为嗜热菌芽孢提供适宜的生长环境。当培养基的pH值偏离这个范围时,可能会影响微生物的新陈代谢和酶活性,改变细胞膜的通透性,影响微生物对营养物质的吸收和代谢产物的排泄,进而影响微生物的生长。例如,如果pH值过低,可能会抑制菌体中某些酶的活性,阻碍新陈代谢;如果pH值过高,可能会导致细胞膜通透性改变,影响营养物质的吸收。因此,在配制和使用DTA培养基时,严格控制pH值是非常重要的,以确保微生物能够在适宜的环境中生长。NA平板CVT琼脂含有胰酪蛋白胨、酵母浸粉、葡萄糖、结晶紫、TTC(2,3,5-三苯基氯化四氮唑)和琼脂等成分。
TYC培养基(TryptoneYeastCystineMedium)是一种用于分离口腔中链球菌(Streptococcusspp)的选择性培养基。除了用于分离血链球菌外,TYC培养基也可以用于制备变形链球菌(Streptococcusmutans)的分离培养基。这种培养基的配方包含胰蛋白胨、酵母浸粉、L-胱氨酸、亚硫酸钠、氯化钠、磷酸氢二钠、碳酸氢钠、无水乙酸钠和蔗糖等成分,琼脂作为凝固剂,pH值调整至7.3±0.2(25℃)。TYC培养基通过其成分提供了细菌生长所需的氮源、碳源、维生素和生长因子。其中,L-胱氨酸和亚硫酸钠有助于抑制某些非目标细菌的生长,而促进目标链球菌的生长。此外,TYC培养基也可以添加杆菌肽(0.2U/ml)以增加其选择性。在实验室中,TYC培养基通常按照以下方法配制:1.称取98.0g培养基粉末,加入1000mL蒸馏水或去离子水中。2.加热煮沸至完全溶解。3.分装后,在121℃高压下灭菌15分钟。4.灭菌结束后摇匀,以防琼脂沉积于器皿底部而凝固。5.如有需要,培养基冷却至50~55℃时,可选择性添加过滤除菌的杆菌肽0.2U/ml以增加选择性。TYC培养基在微生物学研究和临床诊断中具有重要应用,特别是在口腔微生物的检测和研究中。
PK琼脂培养基,也称为Pikovskaya'sAgar,是一种用于检测解磷微生物(phosphatesolubilizingmicroorganisms)的培养基。这种培养基的原理基于解磷微生物在生长过程中能够将不溶性的磷酸盐转化为可溶性形式,从而使得培养基中的磷酸钙溶解,导致培养基的透明度发生变化。**配方组成**:-酵母提取物:0.5g-D-葡萄糖:10.0g-磷酸钙:5.0g-硫酸铵:0.5g-氯化钾:0.2g-硫酸镁:0.1g-硫酸锰:0.0001g-硫酸亚铁:0.0001g-琼脂:15.0g**配制方法**:1.使用1000ml蒸馏水重悬31.3g培养基。2.不断搅动并加热,煮沸1分钟使培养基完全溶解。3.121°C高压蒸汽灭菌15分钟。4.冷却至50°C时,分装15ml培养基到每个无菌培养皿中。**培养条件**:-通常在35°C下培养48小时。**观察指标**:-在PK琼脂培养基上生长的解磷微生物菌落周围的培养基由不透明变透明,通过观察培养基的透明度变化来判断微生物是否具有解磷能力。**保存条件**:-密封,2-30°C避光保存。**注意事项**:-避免吸入和皮肤接触。这种培养基在土壤微生物学、植物病理学和环境微生物学等领域有着广泛的应用,特别是在研究植物-微生物相互作用以及微生物对土壤养分循环的贡献方面。水琼脂培养基的凝胶结构在不同温度下可能会发生变化,因此需要根据微生物的特性调控培养温度。
嗜热脂肪杆菌恢复琼脂培养基(BacillusStearothermophilusRecoveryAgar)是一种专门用于灭菌与消毒鉴定试验的微生物培养基。以下是它的一些主要特点和用途:1.**配方成分**:该培养基的配方包括蛋白胨、牛肉膏粉、可溶性淀粉、葡萄糖和琼脂。蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、维生素和生长因子;可溶性淀粉和葡萄糖是可发酵的糖类,作为碳源;琼脂作为凝固剂。2.**pH值**:培养基的pH值为7.1±0.2(25℃),为嗜热脂肪杆菌的生长提供了适宜的环境。3.**用途**:主要用于灭菌与消毒鉴定试验,通过观察嗜热脂肪杆菌在该培养基上的生长情况来判断灭菌和消毒的效果。4.**使用方法**:称取35g培养基粉末,加入1升蒸馏水或去离子水,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,然后在115℃下高压灭菌30分钟。5.**质量控制**:使用嗜热脂肪杆菌ATCC7953作为质控菌株,培养条件为56±1℃,24小时,生长率应达到PR≥0.7,表现为生长良好。6.**储存条件与保质期**:贮存于避光、干燥处,未开封的保质期为三年。7.**注意事项**:在称量时应注意防尘,佩戴口罩操作以避免呼吸道不适;使用后立即旋紧瓶盖,避免吸潮结块;质检报告可以登录相关网站下载。普通肉汤培养基通常由蛋白胨、牛肉浸粉(或牛肉膏粉)、氯化钠和水组成,这些成分为细菌提供必需的碳源等。Luria琼脂培养皿
血液增菌培养基含有蛋白胨、牛肉浸出粉、氯化钠、葡萄糖、枸橼酸钠、对氨基苯甲酸、硫酸镁、酚红等成分。NA-MUG预装培养皿
使用TCBS琼脂进行细菌分离实验的步骤如下:1.**准备工作**:-确保实验室无菌操作条件,穿戴适当的实验服和手套。-准备无菌的接种环、涂布器、无菌吸管和移液器等工具。2.**配制培养基**:-按照培养基包装上的说明,称取适量的TCBS琼脂粉末。-将称取的TCBS琼脂粉末加入到适量的蒸馏水中,通常为100mL。-将混合物加热至沸腾,以确保琼脂完全溶解。3.**冷却和倾注平板**:-将溶解好的培养基冷却至50℃左右(避免过热,以免杀死细菌),此时琼脂应该仍然是液体状态。-将冷却的培养基倒入无菌的培养皿中,一般倾注量为15-20mL/平皿。-等待琼脂凝固,形成固体培养基平板。4.**接种样品**:-使用无菌操作,将待检测的样品涂布或划线接种到TCBS琼脂平板上。-可以使用稀释涂布法、螺旋接种法或其他适当的接种方法。5.**培养**:-将接种后的平板倒置,放入恒温培养箱中。-根据实验要求,通常在36±1℃下培养18-24小时。6.**观察和选择菌落**:-培养结束后,观察平板上的生长情况,记录不同类型菌落的特征。-选择性地挑选出特定的菌落,如蓝绿色或黄色菌落,这些可能是目标弧菌。