营养琼脂方瓶(罗氏瓶)通常是指营养琼脂培养基的一种包装形式,适合实验室进行微生物培养使用。营养琼脂是一种基础培养基,用于非苛养微生物的培养,以及在生化或血清学测试前的质量控制和纯度检查。以下是营养琼脂的典型配方:1.**成分**:-蛋白胨:10.0g/L-牛肉膏粉:3.0g/L-氯化钠:5.0g/L-琼脂:15.0g/L-终pH值:7.3±0.2(25℃)2.**配制方法**:-称取33g营养琼脂培养基粉末,加入1000mL蒸馏水或去离子水。-搅拌加热煮沸至完全溶解。-分装到方瓶(罗氏瓶)中,通常分装量为100mL或500mL。-121℃高压灭菌15分钟。3.**使用方法**:-灭菌完成后,取出方瓶并冷却至大约40-45°C。-如果需要富集,可在灭菌后加入血液或其他生物液体。-在无菌条件下,将培养基倒入无菌的培养皿中或作为液体培养基使用。-培养基凝固后,可将培养皿放置在热空气烤箱中,用较低温度烘烤几分钟,以去除使用前培养皿上的任何水分。4.**储存方法**:-粉末形式的培养基应储存在10至30°C之间,容器需紧密封闭。-制备好的培养基应在20-30°C的环境中储存。PYG培养基的干粉应在避光、干燥处保存,未开封的保质期通常为三年。使用后应立即旋紧瓶盖,避免吸潮结块 。R2A琼脂平板
牛津琼脂(OXA)基础的pH值对李斯特氏菌的生长有影响。李斯特氏菌的适生长pH值为7.0±0.2(25℃),这与牛津琼脂(OXA)基础的pH值相匹配。在这个pH值下,李斯特氏菌能够良好地生长并表现出其特有的生物学特性,如β-溶血和七叶苷的水解。pH值对微生物生长至关重要,因为它可以影响:1.**酶活性**:许多微生物的代谢酶在特定的pH值范围内活性高。2.**细胞膜功能**:pH值的变化可能会干扰细胞膜的完整性和功能,影响营养物质的吸收和废物的排出。3.**代谢途径**:pH值的变化可能会改变微生物的代谢途径,从而影响其生长和繁殖。牛津琼脂(OXA)基础中的pH值是通过添加特殊蛋白胨和可溶性淀粉等成分来维持的,这些成分不仅提供碳氮源、维生素和生长因子,还有助于维持培养基的pH值。如果pH值偏离了范围,可能会抑制李斯特氏菌的生长,或者导致其他非目标微生物过度生长,影响结果的准确性。因此,为了确保牛津琼脂(OXA)基础能够准确地分离和培养李斯特氏菌,实验室人员需要仔细控制和监测培养基的pH值。黄豆粉琼脂预装培养皿克氏双糖铁试验时间通常控制在18-24小时,以确保细菌发酵充分且不过度,避免影响判断结果。
牛津琼脂(OXA)基础是一种用于分离培养李斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)的选择性培养基。它的成分包括特殊蛋白胨、可溶性淀粉、氯化钠、七叶苷、柠檬酸铁铵、氯化锂和琼脂等,pH值控制在7.0±0.2(25℃)。**特点**:1.**选择性**:含有氯化锂和抗生物质添加剂(如多粘菌素E、放线菌酮、吖啶黄素、头孢双硫唑甲氧、磷霉素),这些成分能够抑制革兰氏阴性菌和大多数革兰氏阳性菌的生长,特别是非李斯特氏菌。2.**应用**:主要用于食品、水和污水样本中李斯特氏菌的选择性分离培养,符合ISO和SN标准。3.**配制方法**:通常称取5.85g的OXA基础粉末,溶解在100mL蒸馏水中,高压灭菌15分钟后冷却至50℃,再加入配套的添加剂,混匀后倾入无菌平皿备用。4.**结果观察**:李斯特氏菌在OXA培养基上生长时,会形成黑色菌落,并且菌落周围可能有黑色环。牛津琼脂基础因其高选择性和特异性,是检测食品和水样本中李斯特氏菌污染的重要工具。
溶菌酶营养肉汤基础是一种用于微生物学研究的培养基,特别是在鉴定某些细菌对溶菌酶的敏感性方面。以下是它的一些主要特点:1.**成分**:溶菌酶营养肉汤基础的主要成分包括牛肉浸粉和蛋白胨,这些成分为细菌的生长提供碳源、氮源、维生素和生长因子。此外,还需要添加0.1%的溶菌酶溶液,溶菌酶是一种能够水解细菌细胞壁的酶,主要用于检测细菌对溶菌酶的耐受性。2.**pH值**:该培养基的pH值通常调节在6.8±0.1(25℃),以保证细菌在比较好pH环境下生长。3.**灭菌处理**:制备好的培养基需要进行121℃高压灭菌15分钟,以确保无菌。4.**使用方法**:称取培养基粉末,溶解于蒸馏水中,分装于烧瓶中,每瓶99ml,高压灭菌后冷却至50℃左右时,每瓶中加入0.1%溶菌酶溶液1ml,混匀后分装无菌试管,每管2.5ml,备用。5.**用途**:溶菌酶营养肉汤基础主要用于蜡样芽孢杆菌的溶菌酶试验,如GB4789.14-2014标准所述。它可以用来鉴定细菌是否能够在溶菌酶存在的情况下生长,从而帮助鉴别不同的细菌种类。6.**添加剂**:每瓶培养基需配套添加0.1%溶菌酶溶液使用,每支添加于99mL溶菌酶营养肉汤中。GAM肉汤用于厌氧菌的培养,是一般培养基的基础。它营养丰富,使用时无需加血,适用于各类厌氧菌的增菌 。
胰蛋白酶大豆琼脂(TSA)是一种常用的微生物固体培养基,广泛应用于各种细菌的分离和培养。以下是TSA培养基的一些关键特点:1.**成分**:TSA培养基的主要成分包括胰蛋白胨(Tryptone,15g/L)、大豆胨(Soytone,5g/L)、氯化钠(5g/L)和琼脂(15g/L),这些成分为细菌提供氮源、维生素、生长因子以及维持渗透压和凝固培养基。2.**pH值**:TSA培养基的pH值通常调节在7.3±0.2(25℃),以满足大多数细菌生长的需要。3.**用途**:TSA培养基适用于多种细菌的培养,包括非选择性增菌培养及用于阪崎肠杆菌的纯化培养和产黄色素试验。4.**制备方法**:将TSA培养基的干粉加入到蒸馏水中,加热搅拌至完全溶解,通常分装到试管或平皿中,经过高压灭菌后备用。5.**保存条件**:未开封的TSA培养基通常在室温下避光保存,保质期可达三年。开封后应旋紧瓶盖,避免吸潮结块,并根据存放条件适当延长保存期。6.**注意事项**:在称量和操作过程中应注意无菌操作,避免微生物污染。使用后应立即旋紧瓶盖,防止吸潮。粉尘可能引起呼吸道不适,操作时应佩戴口罩。7.**应用**:TSA培养基在微生物学研究、医学诊断、食品检测和环境保护等领域有广泛应用。长双歧杆菌和婴儿双歧杆菌在PYG培养基上的生长情况通常表现为圆形凸起,奶油色,边缘整齐光滑的菌落 。赫氏琼脂预装培养皿
哥伦比亚肉汤的pH值通常控制在7.3至7.5之间,为微生物生长提供适宜的酸碱环境 。R2A琼脂平板
四号琼脂基础(No.4AgarBase)是一种用于微生物培养的培养基,主要用于霍乱弧菌的选择性分离培养。以下是它的一些主要特点和使用方法:1.**成分**:-蛋白胨:20.0g/L-牛肉浸粉:5.0g/L-氯化钠:5.0g/L-无水亚硫酸钠:3.0g/L-十二烷基硫酸钠:0.5g/L-猪胆粉:5.0g/L-利凡诺:0.03g/L-庆大霉素:500U/L-琼脂:15.0g/L-pH值:8.5±0.2(25℃)2.**检验原理**:-蛋白胨和牛肉浸粉提供碳氮源、维生素和生长因子;-氯化钠维持均衡的渗透压;-亚硫酸钠可刺激弧菌生长;-十二烷基硫酸钠、猪胆粉、利凡诺、庆大霉素和亚碲酸钾及较高的pH值可抑制革兰氏阳性菌和部分革兰氏阴性杂菌;-霍乱弧菌对酸性环境比较敏感,因此该pH值可增强其生长;-琼脂是培养基的凝固剂。3.**配制方法**:-称取53.5g干粉培养基,加入1L蒸馏水或去离子水,加热煮沸充分溶解,冷却至50℃左右,每500mL培养基加入配套试剂1支(SR0080)(5mg亚碲酸钾),摇匀立即倾注平皿。4.**使用方法**:-从冷藏柜中取出平板皿,并恢复至室温。-将包装整体送入试验地点。-试验或接种。-将平板从洁净室取出,按规定的温度和时间倒置培养。-观察、计数。R2A琼脂平板