LB琼脂(Miller)是一种用于实验室的微生物培养基,特别适合于大肠杆菌(E.coli)的培养。这种培养基的配方包括蛋白胨、酵母提取物和氯化钠,以及作为凝固剂的琼脂。Miller配方的特点是含有较高的氯化钠浓度,这有助于选择性地培养某些细菌。**成分**:-蛋白胨(Tryptone):10.0g-酵母提取物(YeastExtract):5.0g-氯化钠(NaCl):10.0g-琼脂(Agar):15.0g**制备方法**:1.将40克LB琼脂粉末加入到1升蒸馏水中。2.加热至沸腾,同时搅拌以确保粉末完全溶解。3.在121°C下高压灭菌15分钟。4.灭菌后,冷却至50°C,然后分装到无菌培养皿中。**应用**:-适用于非选择性培养大肠杆菌菌株,用于克隆、质粒DNA制备和重组蛋白生产。-当加入适当的抗生物质时,也适合选择性培养。**特点**:-无需复杂配置,快速溶解,方便使用。-经济实惠,适合大量培养基的制备。**储存条件**:-通常建议在常温(10-30℃)下储存。LB琼脂(Miller)因其营养丰富、制备简单的应用,成为分子生物学和微生物学实验室中的标准培养基之一。在实际使用时,应严格按照产品说明书或相关标准进行操作,以确保培养效果。未来研究将进一步探索改良Letheen琼脂培养基在研究领域的优越性能,以及在微生物学实验设计中的灵活性。TTC营养琼脂培养皿
Vogel-Johnson(V-J)琼脂基础是一种用于金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)选择性分离培养的培养基。以下是其特点介绍:1.**成分**:V-J琼脂基础包含明胶蛋白胨、酵母浸粉、甘露醇、酚红、磷酸氢二钾、氯化锂、甘氨酸和琼脂等成分。这些成分为细菌提供氮源、碳源、维生素以及凝固剂。2.**选择性**:甘氨酸和氯化锂对金黄色葡萄球菌以外的其他菌株具有抑制作用,而较高浓度的亚碲酸钾可抑制多数杂菌的生长。3.**鉴别特性**:金黄色葡萄球菌能够还原亚碲酸钾,使菌落显黑色,同时可分解培养基中的甘露醇产酸,使培养基变黄。4.**pH值**:培养基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),适合金黄色葡萄球菌的生长。5.**使用方法**:称取V-J琼脂基础粉末,溶解于蒸馏水中,煮沸后高压灭菌。冷却至45-50℃时加入过滤除菌的1%亚碲酸钾溶液,混匀后倾注平板。6.**培养条件**:接种后的培养基通常在30-35℃下需氧培养24-48小时。7.**结果观察**:金黄色葡萄球菌在V-J琼脂上通常形成黑色菌落,周围培养基变黄;而大肠埃希氏菌等非目标细菌则被抑制。8.**储存条件**:V-J琼脂基础应在避光、阴凉干燥处储存,使用后立即旋紧瓶盖,以保持其有效性。溴甲酚紫琼脂培养皿通过进一步的生化测试,如氧化/发酵葡萄糖测试、花青素鉴定等,来进一步确认分离的菌株是否为目标肠道菌。
胆盐硫乳琼脂培养基(DHL)是一种用于选择性分离培养肠道致病菌,特别是沙门氏菌和志贺氏菌的培养基。以下是DHL培养基的一些主要特点:1.**用途**:主要用于肠道致病菌的选择性分离培养,特别是沙门氏菌和志贺氏菌。2.**成分**:包含蛋白胨、牛肉浸粉、乳糖、蔗糖、去氧胆酸钠、硫代硫酸钠、柠檬酸钠、柠檬酸铁铵、中性红和琼脂,pH值控制在7.2±0.1(25℃)。3.**检验原理**:去氧胆酸钠和柠檬酸钠抑制革兰氏阳性菌及大多数大肠菌群和变形杆菌,但不影响沙门氏菌的生长;硫代硫酸钠和柠檬酸铁铵用于检测硫化氢产生,使菌落中心呈黑色;中性红作为pH指示剂,发酵糖产酸的菌落呈红色,不发酵糖的菌落为无色。4.**用法**:称取65.2g培养基,加热溶解在1000ml蒸馏水中,待冷至60℃时倾入无菌平皿,无需高压灭菌。5.**质量控制**:使用质控菌株进行微生物灵敏度试验,例如鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028和福氏志贺氏菌CMCC(B)51572,观察其生长率和特异性反应。6.**储存条件**:贮存于避光、干燥处,用后立即旋紧瓶盖,保质期通常为三年。
EEM培养基(Eagle'sMinimumEssentialMedium)是一种用于细胞培养的培养基,由HarryEagle研发。它是一种营养丰富的细胞培养基,广泛应用于各种细胞的培养,包括贴壁细胞和悬浮细胞。EEM培养基的特点是含有较低的碳酸氢钠含量,适用于5%CO2条件下的细胞培养。如果培养条件中CO2浓度高于5%,则需要增加碳酸氢钠的含量。**成分**:EEM培养基包含Earle'ssalts、L-谷氨酰胺、丙酸钠和碳酸氢钠等。它还含有12种必需氨基酸、谷氨酰胺和8种维生素,以及其他必要的营养成分。**用途**:EEM培养基适用于多种细胞系的培养,包括HeLa细胞、各种成纤维细胞、内皮细胞、人肿瘤细胞等。它也可用于选择转染DHFR的阴性细胞。**保存条件**:建议在2-8°C避光条件下保存。**产品外观**:通常为红色透明液体,无沉淀。**培养基保质期**:在正确的保存条件下,培养基的保质期通常为12个月。**质量控制**:培养基的质量控制包括观察培养基是否有变色、结块或成粒、不溶等现象,以及液体培养基是否有pH变化、沉淀物出现、溶液变浑浊或变色等情况。配制方法:通常,EEM培养基会以无菌即用的形式提供,但如果需要自行配制,应按照制造商提供的配方和方法进行。
玫瑰红钠琼脂培养基是一种专门用于霉菌和酵母菌计数、分离和培养的培养基,具有以下特点:1.**选择性抑制**:玫瑰红钠作为选择性抑菌剂,可以抑制细菌的生长,并减缓某些霉菌因生长过快而导致菌落漫延生长。2.**营养成分**:蛋白胨提供碳源和氮源,葡萄糖提供能源,磷酸二氢钾作为缓冲剂,硫酸镁提供必需的微量元素。3.**pH值**:培养基的pH值控制在6.0±0.2(25℃),为霉菌和酵母菌提供适宜的生长环境。4.**制备方法**:称取31.5g培养基粉末,加热溶解于1000ml蒸馏水中,然后在121℃高压下灭菌15分钟备用。5.**用途**:根据《中华人民共和国药典》2010年版,供药品和生物制品中霉菌和酵母菌的计数、分离和培养用。6.**微生物质控**:使用质控菌株进行微生物灵敏度试验,例如白色念珠菌、黑曲霉和酵母菌,观察其生长情况和特征。7.**产品性能**:培养基应为粉红色均匀混悬液,无肉眼可见杂质。8.**注意事项**:倾注培养基的温度不宜过高,一般要求在45℃左右,以免损伤或烫死样品中的微生物而影响计数。
将纯培养的菌株涂布在TSA板上,培养至单一菌落后,将培养皿密封保存在4℃或-80℃的环境中。TTC营养琼脂培养皿
强化梭菌培养基(ReinforcedClostridiumMedium,RCM)是一种专为梭菌属(Clostridium)细菌设计的培养基,具有以下特点:1.**营养成分**:RCM培养基富含蛋白胨、牛肉浸粉、酵母粉、葡萄糖、可溶性淀粉、氯化钠、醋酸钠和L-半胱氨酸盐酸盐,这些成分提供碳源、氮源、维生素和生长因子,适合梭菌的生长需求。2.**pH值**:RCM培养基的pH值一般控制在6.8±0.1(25℃),为梭菌提供适宜的生长环境。3.**用途**:主要用于梭菌的增菌培养和计数,特别适用于厌氧条件下梭菌的培养。4.**抑制作用**:醋酸钠成分有助于抑制革兰氏阴性菌的生长,使得RCM培养基更适合梭菌属细菌的选择性培养。5.**稳定性**:微量琼脂(0.5g/L)的添加增加了培养基还原环境的稳定性,有助于厌氧环境的形成,防止二氧化碳、氧气和还原产物的扩散。6.**生长表现**:无动力的细菌在RCM培养基中通常呈颗粒状或条状生长,便于计数;而有动力的细菌则可能呈现浑浊生长,一般不适合计数。7.**制备方法**:将RCM培养基粉末溶解于蒸馏水中,加热至完全溶解后分装,通过高压灭菌以备使用。8.**质控结果**:RCM培养基适用于生孢梭菌和产气荚膜梭菌等梭菌的生长,这些菌株在培养基中的生长情况良好。TTC营养琼脂培养皿