南京RNA提取试剂哪家便宜

拭子RNA提取试剂的选择？1、产品价格。价格也是选购产品的重要考量因素。对于绝大多数实验如Northern杂交、RT-PCR、RealTimeRT-PCR、cDNA文库构建等，国产试剂盒都能满足质量要求。与国外有名品牌相比，国产试剂盒的价格较为便宜，价格还不到国外品牌价格的30%，性价比较高。因而，对于以上实验建议选用国产试剂盒。一些经费不是很多的课题研究或样本量较大的临床检测项目，特别适合选用国产试剂盒。2、与国外有名品牌相比，国产试剂盒在拭子RNA提取纯度上略有不足，但不影响大多数实验，特别是下游需要PCR扩增的实验和分子杂交类实验。在提取得率上，国内试剂盒与国外品牌差别不大，而在价格方面，国产试剂盒具有比较明显的优势。如果经费充足，RNA纯度要求特别高，可考虑选择Q等国外有名品牌。如果经费不多或下游主要做PCR或分子杂交等实验，可考虑选择性价比较高的国产品牌。研钵150度烘烤4小时，离心管、吸头用DEPC处理。南京RNA提取试剂哪家便宜

提取RNA的详细步骤：首先，将研钵晾干够，倒入1/3体积的液氮，加入0.2g均质的植物材料，充分研磨后转入一个含有300微升GMT的1.5ml的离心管中，摇匀。然后，加入30微升2mol/lNaAc进行摇匀，加入300微升酸酚摇匀，加入100微升的氯仿摇匀。然后，在四摄氏度12000r/min下离心二十分钟，吸取上清液的3/4，加入等体积的异丙醇，于冰上放置十五分钟。然后，在四摄氏度12000r/min下离心十分钟，将沉淀悬浮于含100微升的4mol/lLiCl小试管中，于-20摄氏度下放置过夜。然后，在4摄氏度13000r/min下离心10-15min，将沉淀溶于0.4mlDEPC处理水中，加入1/2体积氯仿和1/2体积酸酚，摇匀，进行抽提，在4摄氏度13000r/min下离心五分钟。将上清液中加入等体积的氯仿摇匀，进行抽提，在四摄氏度13000r/min下离心五分钟，上清液中加入1/10体积3mol/lNaAc和两倍体积的午睡乙醇与-20摄氏度放置一小时。广州正规RNA提取试剂许多样品中含有高水平的 RNase，这种酶也会加速 RNA 的降解。

动物组织总RNA提取：1、尽量选取新鲜的组织，如果不是新鲜的（较好在三个月之内-80℃冰箱或者在液氮中冻存的。在剪取组织时，不要拿到室温直接剪取，一定要放到冰盒上，尽量避免反复冻融。2、用干净的剪刀镊子剪取一小块组织，剪取样本时尽量剪组织中心的部位，或者先将大块的组织先从中间切开，然后再在新鲜切口的位置剪取样本。取下的组织要充分的剪碎，将剪碎的组织放到无RNA酶的EP管中，加入裂解液，剪碎的组织要充分接触裂解液，准备匀浆。3、正常组织选取绿豆粒大小（30~60mg）的组织进行匀浆，如果组织中含有大量的蛋白、脂肪或者是紧密的纤维组织比如肝脏等，适当增减剪取组织的量（可选10~20mg）。4、如果提取的是鱼肌肉，虾肉，海蜇等含水分较多的组织时则应当适当提高样本量用量（推荐100~200mg）。5、条件允许的情况下，动物组织使用高通道组织匀浆机匀浆后即可直接进行提取步骤，如没有该设备。6、较后提取后得到的RNA一定要立即放到冰盒上，以减少RNA的降解。

RNA提取：主要试剂Trizol是一种新型总RNA抽提试剂，内含异硫氰酸胍等物质，能迅速破碎细胞，压制细胞释放出的核酸酶。1.Trizol试剂含有苯酚，具有毒性和刺激性，注重操作。2.RNase污染的主要来源是操作过程中手和空气中的浮沉，注重配带手套，样品尽可能盖严。3.细胞裂解必需充分且操作迅速。裂解不完全会降低较后得率，因为一部分RNA会残留在未裂解的细胞中。细胞裂解之后要看不见颗粒状物质（结缔组织和骨除外）。在清洗和裂解细胞时较好在低温下操作，防止在操作过程中释放的内源RNase降解了RNA。4.酵母和一些细菌由于细胞壁的特别结构，可以加入Trizol试剂同时加入无RNase的玻璃珠并剧烈振荡，使细胞裂解充分。2-8℃避光保存一年。普通的提取实验用国产的试剂盒就足以，价格不高，基本上各地均有现货。

DNA和RNA的鉴别染色：利用吖啶橙的变色特性可鉴别DNA和RNA。吖啶橙作为一种荧光染料已被用于染色固定，非固定细胞核酸，或作溶酶体的一种标记。观察死亡细胞荧光变色性变化以及区别分裂细胞和静止细胞群体。虽然测定DNA和RNA含量时较难获得好的重复性结果，但该方法已被许多实验室普遍采用。RNA是核糖核酸，DNA是脱氧核酸。区别：溶解性：都溶于水而不溶于乙醇，因此，常用乙醇来沉淀溶液中的DNA和RNA。DNA溶于苯酚而RNA不溶，故可用苯酚来沉淀RNA。一个核糖核苷酸分子由磷酸，核糖和碱基构成。金华正规RNA提取试剂

RNA定量方法与DNA定量相似。南京RNA提取试剂哪家便宜

昆虫RNA柱式提取试剂盒使用方法：将50～300mg昆虫组织放入10～15mL塑料离心管中，加入1mL溶液A，然后用匀浆器匀浆5～20秒。匀浆时会产生泡沫，但不影响提取效果。也可以使用液氮砚磨法破碎昆虫组织，砚磨完后加入1mL溶液A。注意：溶解溶液A沉淀。溶液A在4℃放置后可能会产生沉淀，使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。将匀浆物或砚磨物转移至干净的1.5mL塑料离心管中(可以不必转移非液体的细胞碎片)。在离心管中加入0.3mL的溶液B和0.2mL自备氯仿，在振荡器上振荡30秒混匀，此时溶液呈均匀的乳浊状。振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。室温12000rmp离心3～5分钟，两相间将有约5-10毫米厚的细胞破碎物。将上清液(约0.6mL)转移到另一干净的1.5mL塑料离心管中，下层有机相和中间层含有DNA、蛋白质和其他杂质，避免触及或吸取。较好留下100μL上清液不取。加入等体积的溶液C，充分颠倒混匀。南京RNA提取试剂哪家便宜