如何使用糖原染色试剂盒产品介绍

糖原染色在使用过程中需要注意以下几个方面：PAS染色时需于暗处加盖反应，染色时间10～20min（染色时间长短取决于试剂的质量和环境温度，SO浓度高，染色时间适当缩短；环境温度高，染色时间也应适当缩短，反之则需适当延长反应时间）。染色过程中不能接触伊红，以免造成颜色误差[4]。作糖原染色时，较好作消化对照，即取两张连续切片，其中一张脱蜡至水后，用1％淀粉酶于37℃消化30min，水洗后与不经消化处理的切片一起置0.5％高碘酸液氧化，如经消化处理的切片染色阴性，不经消化处理的切片染色阳性，即肯定为糖原[6]。偏重亚硫酸钠（钾）溶液配置后，不能保存，因此，必须现配现用，用过一次即应废弃。各种试剂必须是化学纯或者分析纯。器皿、染色缸必须洁净而干燥。帮助鉴别白血病细胞和腺骨髓转移的腺细胞，腺细胞呈阳性反应。如何使用糖原染色试剂盒产品介绍

糖原及粘液染色法：操作方法：（1）石蜡切片脱蜡至水。（2）0.5%过碘酸水溶液5分钟。或1%过碘酸95%酒精溶液（过碘酸再结晶应重新配制使用）。（3）蒸馏水洗，70%酒精洗。（4）Schiff氏液15-30分钟。（Schiff氏液从冰箱取出升至室温使用）（5）流水冲洗10分钟。（6）苏木素浸染细胞核2-3分钟。（7）脱水、透明、封盖。结果：糖原呈红色，细胞核呈蓝色。试剂配制：（1）0.5%过碘酸（HIO4）水溶液或70%酒精溶液。（2）Schiff氏试剂。碱性品红1g蒸馏水200ml1N盐酸（98.3ml比重1.16盐酸，加入蒸馏水成1000ml）20ml偏重亚硫酸钠或钾1g碱性品红1g加入200ml蒸馏水，搅拌加热沸腾，待冷却至50℃过滤，加入当量盐酸至25℃时加入偏重亚硫酸钠。置于暗处，两天后溶液变桔黄色或草黄色，然后加入少量活性碳并震荡、过滤，此时溶液应为无色。保存冰箱备用。溶液如显浅红色或草黄色，染色效果较差~江苏品牌糖原染色试剂盒无水酒精渗透较慢，而且容易产生极化。

染色的一般原则：因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用凋亡诱导处理的细胞做单阳对照，进行荧光补偿的调节。标记抗体常用荧光素FITC，EGFP激发光：488nm发射光：525nm;使用面较广，价格便宜。PE激发光488nm发射光575nm，此荧光的激发效率较佳，故此荧光得到的信号较强；检测某些弱表达的抗原，推荐使用此荧光素。价格较FITC昂贵。APC激发光633nm，发射光660nm，在配有双激光的流式细胞仪上，此荧光染料可与7-AAD或PI共同使用来避开自带绿色荧光的样本。流式细胞仪相关试剂盒。

糖原染色：1、概况PAS染色法（PeriodicAcid-Schiffstain）在组织学上，主要用来检测组织中的糖类。过碘酸把糖类相邻两个碳上的羟基氧化成醛基，再用Schiff试剂和醛基反应使呈现紫红色。2、原理PAS染色又称过碘酸雪夫染色，糖原染色。一般用来显示糖元和其它多糖物质。过碘酸能使细胞内的多糖乙二醇基氧化成二醛，再与Schiff氏液的无色品红结合，红色，定位于胞浆上。3、应用随着医学实验技术的发展，糖原染色应用的范围更加普遍，如用以证明与鉴别细胞内空泡状的性质，心肌病变及其他心血管疾病的诊断，糖原累积病诊断和研究，糖尿病的诊断和研究，用于某些的诊断等~糖尿病性肾小球硬化症或血管病的诊断。

注意事项：染色时：①染色时必须严格按照染色操作说明书进行染色。②在染色过程中，前一个染液浸染完成后，在进行下一个染液的步骤之前，必须彻底充分水洗，使前一个染液冲洗干净后再进行下一步骤。③每次滴加染液前，务必吸干组织上多余的水分，避免多余的水把染液稀释了，造成染色不佳。④在滴加染液时，务必使染液完全覆盖组织，但不能溢出圈外，避免浪费试剂。在染色时，用有色铅笔在组织周围划一个圈，这样在滴加染液时就不会使染液溢出过碘酸溶液和苏木素溶液浓度更低，不宜过染。北京口碑好的糖原染色试剂盒进货价

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糖原D-PAS染色液注意事项：1、切片脱蜡应尽量干冷，否则影响染色效果。需使用一张阳性对照片验证酶的活性。2、过碘酸氧化时间不宜过久，氧化时温度以18～22℃较佳。3、试剂(A)、试剂(B)、试剂(C)、应置于4℃密闭保存，使用时避免接触过多的阳光和空气，使用前较好提前取出恢复到在室温后，避光暗处使用。4、酸性乙醇分化液应经常更换新液，其分化时间应该依据切片厚薄、组织的类别和酸性乙醇分化液的新旧而定，另外分化后自来水冲洗时间应该足够。5、在过碘酸溶液和SchiffReagent中作用时间非常重要，该依据切片厚薄、组织类别等决定。6、况冶切片染色时间尽量要短。如何使用糖原染色试剂盒产品介绍