芯弃疾JX-8B数字ELISA
产品每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测
单分子酶检测到的比较低酶分子数假设蛋白质检测分析的更终灵敏度为背景信号可能由非特异性相互作用产生。为了评估内在敏感性,我们通过将400,000个带有生物素的珠子与不同浓度的酶缀合物链霉亲和素-阝-半乳糖苷酶(S阝G)混合,创建了具有明确酶与珠子比例的珠子群体。为了方便起见,生物素化珠子是通过将生物素化DNA与功能化的珠子杂交提供的。互补DNA。[我们注意到,该实验不应被视为敏感的DNA检测;该检测的敏感性受到非特异性相互作用的限制,如补充图2所示,这些相互作用发生在酶缀合物和表面结合的DNA之间。 7)数字化高敏ELISA芯片,低成本、便捷、快速进行微量样本的检测;芯弃疾产品数字ELISA制造商
芯弃疾JX-8B数字ELISA产品
每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测
动力学上,对于200,000个微球分散在100μL中,珠子之间的平均距离约为80μm。大小为TNF-α和PSA(分别为17.3和30kDa)的蛋白质将在不到1min的时间内扩散80μm。表明,在2小时的孵育过程中,蛋白质分子的捕获不会受到限制动力学上。其次,必须有足够的珠子被加载到阵列上以限制泊松噪声。200,000个珠子加载到50,000孔阵列中,通常会导致20,000–30,000个微球被困在1mL孔中。对于典型的背景信号为1%活性微球(见下文),这种装载导致背景信号为200-300个活性微球检测到,对应于泊松噪声的可接受变异系数(CV)为6-7%。第三,过高的微球浓度可能导致:a)非特异性结合增加,降低信噪比;以及b)分析物与微球的比例过低,导致活性微球的比例过低,从而导致泊松噪声引起的高CV。这些因素的平衡NatBiotechnol.作者手稿;可在PMC2010年12月1日获得。Rissin等人第5页因素意味着每100μLoftest样品含有20万到100万颗珠子是比较好的数字ELISA。同时,为了获得可接受的背景信号(1%)和泊松噪声)。 生医实验室数字ELISA微量样本芯弃疾JX-8B单分子普惠化ELISA检测产品,微量检测,使用微量样本就能测试;
抗体配对筛选的成本与效率优化,抗体筛选芯片通过高密度检测区设计与微量样本技术,大幅降低抗体开发的时间与物料成本。传统方法中,49种抗体配对需多次实验,耗时数天且消耗数百微升样本;而芯片技术*需1小时、5μl样本即可完成初步筛选,成本降低70%以上。其单通道多指标并行检测能力,支持不同反应条件(如pH、温度)的同步测试,快速筛选出比较好配对组合。在**标志物抗体开发中,该芯片可同时评估亲和力、特异性与交叉反应性,加速诊断试剂盒的研发进程,尤其适合初创企业与科研机构的高效筛选需求,推动抗体工程从试错性实验向精细化筛选转型。
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人类形式的蛋白质被加入到25%牛血清中以代替临床测试样本;通常使用四倍稀释因子以减少免疫测定中的基质效应4。使用数字ELISA检测25%血清中的PSA,从该实验中确定了LOD为~50aM(1.5fg/mL),相当于整个血清中的LOD为~200aM(6fg/mL)。检测到的比较低浓度为250aM,相当于25%血清中的1fMin全血清。由于LOD是通过外推背景浓度来确定的加上背景的三个标准差,不同运行的LOD取决于背景的CV。在具有典型背景方差的几个实验中,全血清PSA的亚飞摩尔LOD得以保持。相比之下,一种前列的商业PSA检测方法(ADVIACentaur,西门子)报告在人血清中的LOD为3pM(0.1ng/mL),并且已经报道了LOD在10-30fM17,26。 单分子 POCT 芯片检测 IL-6 自动版低至 0.5pg/ml,手动版 1pg/ml,线性趋势良好。
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数字ELISA测量蛋白质浓度远低于传统ELISA的能力源于两种效应:
1)SiMoA对酶标记的高度敏感性;以及2)通过数字化蛋白质检测可以实现的低背景信号。任何免疫测定的灵敏度由其灵敏度决定。检测技术到标签,抗体亲和力,试验背景,以及背景测量值的变异(%CV)27.SiMoA对酶非常敏感标签
2)为在数字ELISA中检测亚飞摩尔浓度的标记蛋白提供了基础。也就是说,对于给定亲和力的抗体,其灵敏度为免疫测定将由测定背景决定,SiMoA的高标记灵敏度有助于降低这种背景。对照实验表明,数字ELISA的背景来自于检测抗体和酶的非特异性结合(NSB)与捕获珠表面结合(补充表2)。AsSiMoA相比传统检测方法具有更高的标记灵敏度,明显减少了检测抗体(~1nM)和酶标记物(1–50pM)的需要,以检测结合事件,与传统方法相比(标记试剂浓度~10nM)。降低的标记物浓度减少了NSB到捕获表面,从而导致背景信号明显降低。 全自动加样与图像分析系统实现检测流程自动化,荧光信号识别,结果可靠。亚皮克级数字ELISA多重检测
芯弃疾JX-8B数字ELISA,超敏检测,常规试剂可轻松达到0.2pg!芯弃疾产品数字ELISA制造商
POCT芯片的即时诊断革新:芯弃疾POCT芯片采用卡片式设计(尺寸8×5cm),集成8个检测通道,搭配全自动加样仪(加样精度±0.1μL)与便携式荧光扫描仪(分辨率5μm),实现“样本进-结果出”的15分钟极速检测。其**性能媲美化学发光,如超敏肌钙蛋白T(hs-cTnT)检测限达10pg/mL(线性范围0-1000pg/mL),可在急诊科快速鉴别心肌梗死(阈值>14pg/mL)。在脓毒症管理中,PCT与IL-6联合检测灵敏度达95%,较单一指标提升20%。芯片操作全程自动化,医护人员*需加载样本即可完成检测,无需复杂培训。在基层医疗场景中,该技术已应用于核酸快检(灵敏度98%)、流感分型(A/B型同步检测)及糖尿病酮症酸中毒(β-羟丁酸检测)等场景,检测时间从2小时缩短至15分钟,误诊率降低至5%以下。芯弃疾产品数字ELISA制造商