仪器操作设置放置样品板:将密封好的 96 孔板平稳放入 qPCR 仪的样品槽,确保孔位对齐,盖紧仪器舱门。程序设置(通过仪器软件):预变性:通常 95℃,30 秒 - 5 分钟(热启动酶,使模板完全变性)。循环阶段(变性→退火→延伸,同时采集荧光):变性:95℃,5-15 秒(使 DNA 解链)。退火 / 延伸:根据引物 Tm 值设置温度(一般 55-65℃),20-30 秒(引物结合并延伸,荧光染料 / 探针在此阶段发光)。循环次数:通常 35-40 次(根据模板浓度调整)。溶解曲线(可选):用于验证扩增产物特异性,程序为 95℃ 15 秒→60℃ 1 分钟→缓慢升温至 95℃,同时连续采集荧光(观察是否有单一峰,排除非特异性扩增或引物二聚体)。荧光通道选择:根据使用的荧光染料 / 探针类型选择(如 SYBR GreenⅠ 对应 FAM 通道,TaqMan 探针根据标记荧光选择)。样本信息录入:在软件中标记样品类型(如标准品、未知样本、阴性对照、空白对照)及孔位对应关系。扩增效果优异的柏恒RePure系列PCR仪在PCR实验中能够准确地放大目标DNA片段,提供可靠的实验结果。无锡单槽基因扩增仪PCR仪询问报价
食品与食品安全:从源头到餐桌的监控:1. 微生物污染检测场景:生鲜食品中沙门氏菌(invA 基因)、李斯特菌(hlyA 基因)的快速检测,确保冷链食品安全。技术价值:相比传统培养法(需 48-72 小时),PCR 可在 4-6 小时内完成检测,适用于批量样本应急筛查(如食物中毒事件溯源)。2. 成分溯源与防伪场景:肉类制品中物种成分鉴定(如扩增细胞色素 b 基因区分猪、牛、羊肉)、蜂蜜中植物源 DNA 检测(区分槐花蜜与其他蜜种)。技术价值:防止掺假(如马肉冒充牛肉),维护品牌信誉(如地理标志产品的 DNA 指纹认证)。南京普通基因扩增仪PCR仪电话RePure-(D)B具有快速升温和降温的功能,缩短PCR反应的时间。
温度与反应体系控制温度准确性:定期校准仪器(由专业人员进行),确保变性、退火温度精细(偏差超过 ±0.5℃会影响结果)。体系一致性:加样时确保各孔反应体积一致(误差≤1μL),避免因体积差异导致 Ct 值偏差。避免气泡:加样后若有气泡,需轻轻敲击板壁或离心去除,否则气泡会干扰荧光信号采集。3. 试剂与样本处理酶的保存:qPCR Mix 需 - 20℃冷冻保存,使用时冰上融化,轻轻混匀(勿震荡,防止酶变性)。模板质量:避免模板中含 EDTA、SDS 等抑制剂,若样本浓度过低,可适当增加模板量(但需注意体积占比,避免影响反应体系)。
应用领域医学诊断:用于检测病原体(如病毒、细菌、***等)的核酸,实现疾病的早期诊断,如核酸检测;还可用于遗传性疾病的基因诊断、**的分子诊断等。生物学研究:在基因表达分析、基因克隆、基因分型、DNA测序等基础研究中发挥着重要作用,有助于深入了解基因的结构和功能。法医鉴定:通过对犯罪现场遗留的生物样本(如血液、毛发、唾液等)进行基因扩增和分析,实现个体识别、亲子鉴定等目的。农业领域:可用于农作物品种鉴定、转基因作物检测、植物病害检测等,保障农业生产安全和农产品质量。RePure-(D)B双槽PCR是一款专业、高效的PCR仪器,具有双槽设计,可同时进行两组PCR反应,提高实验效率。
放入 PCR 仪:将配置好的反应管放入基因扩增仪 PCR 仪中,按照设定的程序进行扩增反应。设置扩增程序:一般包括预变性、变性、退火、延伸和终延伸等步骤。预变性步骤通常在 94℃-95℃下进行 5-10 分钟,使 DNA 双链充分解开;变性温度一般为 94℃-95℃,时间为 30-60 秒,使模板 DNA 双链解链;退火温度根据引物的 Tm 值确定,一般在 50℃-65℃之间,时间为 30-60 秒,使引物与模板 DNA 特异性结合;延伸温度通常为 72℃,时间根据扩增片段长度而定,一般为 1-2 分钟 /kb;终延伸步骤在 72℃下进行 5-10 分钟,确保所有扩增产物延伸完整。循环次数一般为 30-40 次。柏恒RePure系列PCR仪在扩增效果方面表现优异,具有高灵敏度和稳定性,能够实现快速、高效的DNA扩增。96孔基因扩增仪PCR仪微量检测
RePure-(D)B通过梯度功能优化PCR反应条件,可以将实验过程简化,缩短实验时间,提高实验效率。无锡单槽基因扩增仪PCR仪询问报价
转基因作物检测应用:扩增转基因作物中的外源基因(如抗虫基因Bt、抗除草剂基因EPSPS),用于安全性评估和监管筛查。案例:欧盟法规要求对食品中的转基因成分进行 PCR 定性检测。2. 作物育种与品种鉴定应用:利用 SSR(简单序列重复)、AFLP(扩增片段长度多态性)等分子标记技术,辅助选育抗病、抗逆品种,或鉴定种子纯度。案例:通过 PCR 扩增特定品种的特征性 DN**段,区分杂交种与常规种。3. 畜禽疫病检测应用:检测动物病原体(如非洲猪瘟病毒、禽流感病毒)的核酸,用于疫病防控和检疫。无锡单槽基因扩增仪PCR仪询问报价