世界卫生组织(WHO)《人类精液及精子—宫颈粘液相互作用实验室检验手册》于1980年***出版，以满足临床与科研对人类精液标准化检测程序日益增长的需求。该手册是人类精液实验室检查和处理程序及方法的标准操作指南，旨在提高精液分析的质量和提高不同实验室结果的可比性。在过去40年里，该手册进行了4次修订与补充(1987年、1992年、1999年和2010年)，内容涉及精液检查的标准化操作程序、精子功能、精浆生化、精液处理与冷冻以及质量保证等，已成为国际公认的标准，被世界各地临床和实验室***使用。中国卫生部已在2003年将其纳入人类辅助生殖技术规范。WHO《人类精液检查与处理实验室手册(第5版)》精液参考值的数据是来自全球3大洲8个国家的前瞻性、多中心临床研究的结果，通过循证医学研究获得的精液参数参考值具有里程碑式意义。自2010年出版以来成为WHO很受欢迎的出版物之一，即使在**近几年其下载量也在稳步增长。它是男科实验室及全球范围内开展精液分析操作的其他实验室、医院和研究机构使用的标准操作手册。该手册在国际大会、科学会议、以及WHO合作中心、专业学会和其他学术机构的培训项目中进行了***传播。截止到2021年，已被3000余篇同行评议论文和评论引用。选择合适的CASA检测原理和设备，确保帧率要求，避免因设备问题影响检测结果。广州濒危物种精子分析W.H.O 6
检查具备条件受检者，经历一段经常排精过程后，禁房事5－7天（上次排精到取标本间隔时间至少不得少于100小时）；[1]备大口有盖清洁干燥容器一个，以**方式获取精液，一次全部射入容器，盖上盖，记录标本离体时间；贴身保温，30分钟内送到化验室，并向检验员提供标本取出时间。精液常规观察：精液总容量（毫升），精子活动情况，精子密度（个/毫升），精液液化时间（标本取出到精液液化的时间），不动精子（个/高倍视野）等。见不动精子，须染色方可区分：不活动的精子、死精子、未成熟精子等。找不到精子必须离心后检验，仍然找不到精子；方可报告无精。经三次取样化验，结果仍然找不到精子方可确认无精子症。香港计算机辅助精子分析VCL精子分析，平均角位移（MAD）：精子头沿其曲线轨迹瞬时转折角度的时均J对值。
二、生化及免疫学检验：5、精浆肉碱测定【正常参考值】浓度为239.56±l05.59umol/L。【临床意义】精浆肉碱测定精浆中的肉碱主要由附睾分泌，其次是精囊。精浆中肉碱分为游离肉碱和乙酰肉碱二种，附睾中含高浓度的肉碱，主要与精子在附睾成熟时所需的能量来源有关。现认为精浆肉碱含量和果糖含量的变化，常反映附睾、精囊的功能。精浆肉碱及果糖含量正常，表明附睾、精囊功能正常。当肉碱含量高于正常的50%，而果糖含量降低，则提示精囊功能障碍，附睾功能正常；精浆肉碱约为正常含量的50%左右，果糖含量正常，说明附睾功能障碍，精囊功能正常；而肉碱急剧下降，果糖含量亦减少，表示精囊、附睾功能均发生障碍。6、抗精子抗体(AsAb)测定【正常参考值】阴性。【临床意义】AsAb检测对不育原因检查有重要临床意义。存在于血清或生殖道分泌液中的AsAb，可抑制精子的活动，干扰精子的运行，阻碍精子穿透及精卵结合，使受精发生障碍。即使已经受精，也可能影响发育中的胚胎，造成免疫性流产。不育夫妇AsAb阳性者占25%-30%，当精子输出管道受阻、睾丸损伤、炎症、附睾等生殖系***时，系精子外逸而产生的自身抗体。
九、精液酸碱度(pH)检查[正常参考值]7.2-8.0。[临床意义]1．精液pH值＜7.0，多见于少精或无精症，常反映输精管道阻塞、先天性精囊缺如或附睾病变等。2．精液pH值＞8.0，常见于急性***，如精囊炎、前列腺炎等。十、男性生育力指数测定[计算公式]I=M(N×V)/（A×106）式中I为男性生育力指数；M为活动精子百分率；N为每毫升的精子数；V为精子运动的速度；A为畸形精子的百分率。[正常参考值]正常人生育力指数＞l。[临床意义]1．生育指数为0，表明完全无生育能力。2．生育指数为0-1之间，表明有不同程度的生育障碍。CASA系统操作简便，检测速度快，且重复性优于人工检测。
精子检测是通过一系列检测方法来评估男性生育能力的指标之一。而检测方法的选择直接影响到检测的准确性和结果的可靠性。目前，常用的检测方法有手动计数法、显微镜计数法、电子显微镜计数法、精子运动轨迹分析法等。手动计数法是通过显微镜手动计算精液中精子数量的方法，该方法简单易行，但因操作者技能不同，容易出现误差。显微镜计数法是通过显微镜观察精液中精子数量的方法，该方法比手动计数法更加准确，但需要专业的技能和经验。电子显微镜计数法是通过电子显微镜观察精液中精子数量的方法，该方法非常准确，但需要昂贵的设备。精子运动轨迹分析法是通过计算机分析精子运动轨迹来判断精子活力和数量的方法，该方法不仅准确性，而且可以直观地显示精子的运动状态，但需要较为复杂的技术。除了以上常见的检测方法，还有一些新兴的检测方法，如流式细胞术、全自动分析系统等。这些检测方法虽然在检测精子数量、活力等方面具有一定优势，但由于技术上的限制和设备的昂贵，目前还没有得到广泛应用。在选择检测方法时，需要考虑检测的目的、检测的准确性和结果的可靠性等因素。同时，需要选择正规的医疗机构进行检测，避免因设备不足或技术不过关等因素导致检测结果出现误差。Hamilton Thorne自动精子分析仪具有高精度、高效率和自动化的优点。广州濒危物种精子分析W.H.O 6
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人类精子冷冻保存和储存：增加了冷冻样本的安全性、精液冷冻保存方案、快速液氮熏蒸冷冻、冷冻精液的解冻、玻璃化冷冻等内容，更具可操作性。本手册对人类精子的冷冻保存提出了具体建议：将样本分管分罐分开储存；对使用的材料和留存标本建立定期核验程序；所有储罐都应有液位监控报警系统，以监测温度和液氮液位，传感器应连接警报器，可通过实验室人员的终端进行提醒。新证据表明，玻璃化冷冻是冷冻保存精液的一种有价值的方法。该方法的原理是将小体积样本与无污染液氮直接接触并快速冷冻，可以防止冰晶的形成，并减少精子的渗透性损伤。在麦管玻璃化冷冻(无菌玻璃化冷冻)中，也可以使用封闭系统，不需要无菌的液氮。广州濒危物种精子分析W.H.O 6
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