通过传统的酵母双杂交系统，以PtDAL1为诱饵，筛选样本来源于不同年龄段的油松cDNA文库。将获得的阳性克隆，10个一组，挑选到1个96孔板的PCR板孔中，获得10*96个阳性克隆的96孔板。以其中阳性克隆mix为模板，进行PCR扩增，并将所有的PCR产物进行纯化。使用纯化后的PCR产物，进行打断后构建二代测序文库，通过NGS测序，获得6G的阳性克隆数据。通过分析二代测序数据，获得阳性克隆基因信息（去冗余后获得135个互作子，包含21个TFs，2个TRs及酶类、热激蛋白、RNA结合等蛋白，部分见表1）。挑选重要的候选基因进行一对一验证（图2）。与拟南芥中同源基因AGL6的蛋白互作网络进行比对分析。对DAL1互作蛋白（DIPs）的基因表达谱、启动子中的顺势作用元件功能进行分析，并对DIPs进行GO注释（图3）。综合生信分析结果，构建针叶树老化途径的调控模型（图4）。酵母文库双杂交技术及应用。青海什么是酵母文库做什么
利用酵母文库进行双杂交筛选，结果显示 MdBT2 可以与 MdRGL3a 结合。MdRGL3a 编码 GA 信号阻遏物 DELLA 蛋白，主要分布于细胞核中。MdRGL3a 对于 GA 处理非常敏感，可以引起其发生降解，PAC 处理可以提高其稳定性。进一步的酵母一对一杂交验证实验表明，两者的结合依赖于 MdBT2 的 BTB 和 BACK 结构域、MdRGL3a 的 LHRI 和 SAW motif（图 A-B）。并通过 GST pull-down、BiFC 实验也证实了 MdBT2与 MdRGL3a 的结合（图 C-D）。细胞外降解实验显示，与对照相比，MdRGL3a 与过表达 MdBT2 的愈伤组织的总蛋白共同孵育，会导致 MdRGL3a 的降解加快；而与抑制 MdBT2 表达的愈伤组织的总蛋白共同孵育，会导致 MdRGL3a 的降解减缓（图 A）。并且蛋白酶体抑制剂 MG132 可以***抑制 MdRGL3a 的降解（图 B）。改变 MdRGL3a 表达量并不影响 MdBT2 的降解。以上结果表明，MdRGL3a 可能通过 26S 蛋白酶体途径发生降解，而 MdBT2 可以抑制 MdRGL3a 的降解。青海什么是酵母文库做什么酵母文库酵母单杂交筛库科技研究双文库高校外包平台。
酵母双杂交（Y2H）：植物转录因子（Plant transcripter factors， TFs）是调控植物生长发育和环境适应性的关键分子。虽然在一些数据库中，如RiceSRTFDB （Priya and Jain， 2013）， Ricettissuetfdb （Chen et al.，PlnTFDB （Pérez-Rodríguez et al.， 2009）和PlantTFDB （Jin et al.， 2017），可以预测水稻转录因子功能。但通过具体实验研究，来直接证实转录因子对植物的调控作用仍然是必不可少的。酵母双杂交（Y2H）和酵母单杂交（Y1H）是被用于研究蛋白-蛋白以及蛋白-DNA互作的**常用技术。为了方便和促进水稻育种研究，陈凡老师与欧易生物达成合作，整合双方优势资源，历经春秋与冬夏，成功构建了基于粳稻（日本晴）基因组的水稻转录因子文库。该项成果以“一种高效的筛选系统来鉴定大米转录因子的蛋白质-蛋白质或蛋白质-DNA相互作用伙伴”为题，发表于杂志JGG上。
欧易酵母文库助力苹果花青素合成调控机制研究。近日，山东农业大学郝玉金、由春香教授为共同通讯作者，在ThePlantJournal(IF:6.141)期刊发表了题为“JasmonateinducesanthocyaninandproanthocyanidinbiosynthesisinapplebymediatingtheJAZ1-TRB1-MYB9complex”的研究论文，报道了茉莉酸通过介导JAZ1-TRB1-MYB9复合物诱导苹果中花青素和原花青素的生物合成。山东农业大学安建平博士为***作者，文章中酵母文库实验由欧易生物协助完成。欧易生物持续为众多植物学方向的研究学者提供持久可靠的科研助力。
酵母文库研究：棉花是世界上天然纤维的主要来源。近年来，气候变化给植物带来的干旱、高盐等渗透胁迫，使棉花产量稳步下降。为适应变化莫测的气候，植物不断进化出复杂而有组织的应对非生物胁迫的反应机制，其中数千个抗性相关基因间的相互作用，在提高植物的抗旱性和耐盐性中发挥着重要作用。功能基因组学研究表明，植物胚胎发育晚期丰富蛋白（LEA）就是这样一种基因，它在植物发育过程中，面对多种环境胁迫时均有表达，对提高植物的抗旱性和耐盐性具有重要作用。2022年3月，中国农业科学院棉花研究所在国际期刊上发表了BiologicalMacromolecules上发表了题为“LateembryogenesisabundantgeneLEA3（Gh_A08G0694）enhancesdroughtandsaltstresstoleranceincotton”的研究论文，该研究发现LEA3能够增强棉花的抗旱性和耐盐性。该项目中所用的棉花酵母文库由欧易生物构建。文库筛选经验 与上千所高校及科研院所合作 完成年均400多个物种的文库构建及筛选 。青海什么是酵母文库做什么
酵母杂交案例专业的硕博团队。青海什么是酵母文库做什么
酵母单杂交筛选技术:关于HIV想必大家都不陌生，***HIV病毒后潜伏周期长，且目前没有完全的***方法。为了彻底***HIV，不让其发病就要从2方面入手：要么消除潜伏***的细胞，要么防止潜伏原病毒的细胞被***。也就是需要抑制HIV病毒的转录。但是关于HIV在人细胞中的复制、转录和潜伏期调控的分子网络仍不完全确定，所以目前HIV仍不能被**。为了帮助解决这个问题，波士顿大学的研究者，使用酵母单杂交筛选技术，以HIV-1,HIV-2的LTR（启动子和增强子）为诱饵，筛选了人的转录因子文库（包含1086个人的转录因子），**终绘制了调节HIV-1和HIV-2的转录网络图谱，结果发表在2021年的PNAS杂志上。青海什么是酵母文库做什么
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