酵母文库研究:棉花是世界上天然纤维的主要来源。近年来,气候变化给植物带来的干旱、高盐等渗透胁迫,使棉花产量稳步下降。为适应变化莫测的气候,植物不断进化出复杂而有组织的应对非生物胁迫的反应机制,其中数千个抗性相关基因间的相互作用,在提高植物的抗旱性和耐盐性中发挥着重要作用。功能基因组学研究表明,植物胚胎发育晚期丰富蛋白(LEA)就是这样一种基因,它在植物发育过程中,面对多种环境胁迫时均有表达,对提高植物的抗旱性和耐盐性具有重要作用。2022年3月,中国农业科学院棉花研究所在国际期刊上发表了BiologicalMacromolecules上发表了题为“LateembryogenesisabundantgeneLEA3(Gh_A08G0694)enhancesdroughtandsaltstresstoleranceincotton”的研究论文,该研究发现LEA3能够增强棉花的抗旱性和耐盐性。该项目中所用的棉花酵母文库由欧易生物构建。文库质粒与酵母文库载体重组。贵州酵母文库质量
酵母双杂交筛选实验:为进一步了解LEA3蛋白在干旱胁迫下调控植物生长和增强抗旱性的分子机制,本研究以干旱胁迫条件下的棉花根茎叶为材料,构建了棉花干旱胁迫酵母文库。并以GhLEA3为诱饵,采用酵母双杂交筛选实验,从棉花酵母文库中筛选获得了GhLEA3互作蛋白,并对互作蛋白进行了GO和KEGG分析,发现其中的互作蛋白GhVDAC1主要参与钙信号通路和cGMP-PKG信号通路,互作蛋白Gh***A参与多种生物途径,如糖原生成和代谢途径。此外,GhVDAC1和Gh***A受干旱胁迫诱导表达***,且在GhLEA3敲除的棉株中表达量低于野生型棉株贵州酵母文库质量欧易生物一直助力于各酵母文库实验室更好的使用该项技术,探索生命科学奥秘。
酵母双杂交表明拟南芥AtBT2蛋白可以与AtRGA互作。与对照相比,拟南芥bt1/2双突变体幼苗高度降低,而硝酸盐处理可以进一步抑制其生长,外源施加GA可以回复其生长缺陷。在拟南芥中异源表达MdBT2可以明显提高植株高度,而PAC处理则会抑制这种生长的促进作用。在拟南芥中异源表达MdRGL3a可以明显抑制植株生长,而硝酸盐处理和MdBT2过表达则会缓解这种生长抑制作用。外源GA处理可以逆转以上对植株生长的影响(图A-D)。以上结果表明,BT蛋白通过DELLA蛋白调控植株生长,这一机制在不同的植物中具有保守性。
酵母单杂交筛选技术:关于HIV想必大家都不陌生,***HIV病毒后潜伏周期长,且目前没有完全的***方法。为了彻底***HIV,不让其发病就要从2方面入手:要么消除潜伏***的细胞,要么防止潜伏原病毒的细胞被***。也就是需要抑制HIV病毒的转录。但是关于HIV在人细胞中的复制、转录和潜伏期调控的分子网络仍不完全确定,所以目前HIV仍不能被**。为了帮助解决这个问题,波士顿大学的研究者,使用酵母单杂交筛选技术,以HIV-1,HIV-2的LTR(启动子和增强子)为诱饵,筛选了人的转录因子文库(包含1086个人的转录因子),**终绘制了调节HIV-1和HIV-2的转录网络图谱,结果发表在2021年的PNAS杂志上。酵母单杂交文库筛选选欧易生物技术可靠服务高效。
酵母单杂交结果显示,磷酸盐饥饿响应因子OsPHR1/2/3可以***51个目标启动子中的25个,包括OsRAM1、OsRAD1、OsWRI5A等。OsRAM1、OsRAD1、OsWRI5A自身又可以调控许多菌根共生相关基因的表达(图A)。对丛枝菌根共生响应基因启动子序列预测分析显示,有78个转录因子被富集,87%的菌根共生响应基因受到OsPHR1/2/3的调控,其中42%受到OsPHR1/2/3的直接调控。因此推测OsPHR1/2/3可能是菌根共生调控网络中的一个关键调控枢纽(图A-B)。EMSA和荧光素酶报告实验证实,OsPHR12可以直接结合并***OsRAM1、OsWRI5A、OsPT11、OsAMT3启动子序列(图C-F),并且这种结合依赖于启动子中的P1BS元件(图G)。酵母文库筛库 在酵母双杂交系统中 。贵州酵母文库质量
酵母双杂交原理 酵母双杂...。贵州酵母文库质量
进行了酵母双杂交文库的筛选,结果显示钙依赖的种子特异性蛋白激酶SPK可以与OsNF-YB9相互作用,分段截取互作验证显示OsNF-YB9的N端是互作所必须的(图a-b),并通过双荧光分子互补实验、BiFC、体外GST-pulldown实验得以证实(图c-e)。亚细胞定位显示SPK主要在细胞质中表达,OsNF-YB9在细胞质和细胞核中都有表达,共表达SPK和OsNF-YB9***促进了OsNF-YB9的入核(图f),表明SPK和OsNF-YB9的相互作用可能促进了OsNF-YB9从细胞质向细胞核的运输。RT-PCR显示SPK在发育中的种子中高表达,在5DAF开始***,并在10-30DAF维持高表达水平(图a-b)。spk敲除突变体种子中垩白率的增加(图c-e),但粒形和粒重与野生型没有***差别。贵州酵母文库质量
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