细胞信号通路

炎症相关的生物标志物包括:（1）肠道微生物因子：肠道菌群可能受到饮食，益生菌，益生元，外源酶，粪便菌群移植和其他环境因素的影响（2）免疫相关：肠道菌群驱动炎症的扩大，细胞浸润固有层，包括T细胞、B细胞、巨噬细胞、树突状细胞(DCs)和中性粒细胞;活化的固有层细胞产生高水平局部组织促炎细胞因子，包括TNF，IL-1β，IFN-γ和IL-23/Th17细胞途径。（3）炎症介质：如自由基、白三烯,趋化因子和促炎细胞因子（如IL-12,IL-23,IL-17,IL-18和TGF-β）等。LabEx提供高通量蛋白组学（Olink）服务！细胞信号通路

基于MSD平台的电化学发光超敏多因子检测技术MSD（MesoScaleDiscovery)原理：MSD电化学发光技术主要基于超敏多因子电化学发光分析仪MESOSector600或QuickplexSQ120。通过点阵技术，在96孔石墨电极板里可实现10个指标每孔的检测。也可在24孔板里定制实现100指标/孔的筛选检测。特点:1、更高灵敏度与更宽的线性范围：灵敏度可达0.05pg/ml，有效线性范围达6log。2、节省样本用量，可实现多重检测：上样量≤25ul，为珍稀样本的研究提供了更多的数据。3、均一性、重复性高：板内CV<6-8%,板间<10%,批间<15%。同时MSD试剂盒有效期长达30个月，为长时间研究项目，提供了使用同一批号试剂的可能性。4、样本兼容度高，基质效应小5、实验流程简便、快速、多元化6、信号稳定且不受显色顺序影响7、开放性平台，高载量的石墨电极，多样化实验方案，更节省的包被用量。蛋白芯片糖类抗原163LabEx 免疫组化平台：包埋，切片，染色，多重荧光组化，以及病理分析（HALO）。

问：因子检测技术有哪些？答:Array抗体芯片、CBA、luminex、MSD。问：多因子实验适用的样本类型有哪些？答:Serum（血清）、 sma（血浆）、Cell/Tissuelysate（细胞/组织裂解液）、CerebrospinalFluid（脑脊液）、BronchoalveolarLavageFluid（支气管肺泡灌洗液）、NasalLavage（鼻腔灌洗液）Fluid、PeritonealFluid（腹腔液）等等。问：如何计算96孔板可做多少样本？答:标曲16孔，预实验8孔，剩余72孔，单孔可做72样本，复孔可做36样本；问：多因子实验的正式实验，是否可以分批次检测？答:可以，但是有如下要注意：（1）CBA：试剂盒须在一个月内用完，否则标准曲线要重做，重做就要用到试剂，那样本就样减少。（2）Luminex：每次都必须要做标准曲线，会浪费试剂和孔板，同时试剂也要在一个月内用完，防止试剂过期。（3）MSD：每次都必须要做标准曲线，会浪费试剂和孔板，同时试剂在一个月内用完，防止试剂过期，每次送样+标准曲线的数量，比较好是4的倍数，否则会造成浪费。

MSD经典10因子推荐：中检院《CAR-T细胞医治产品质量控制检测研究及非临床研究考虑要点》中提到，使用MSD技术检测CAR-T细胞医治后样本中细胞因子表达来评估药物的安全性和有效性。MSD技术－电化学发光和点阵技术MESOSCALEDISCOVERY公司的ECL(基于石墨微孔板的电化学发光免疫分析）技术是基于ELISA基本原理的升级，在板底通电从而激发标记物SULFO-TAG发光并由CCDCamera进行信号采集；MSDECL技术提高免疫分析的灵敏度，延伸了线性范围。MSD通过点阵技术，在96孔石墨电极板里可实现10个指标每孔的检测，同时实现多个指标定量。MSD技术独具一格的“六合一”特点：亚fg/ml灵敏度，低背景，多靶点检测，6个数量级线性范围，适用于不同样本基质（血清／血浆，细胞培养上清，脑脊液，尿液，组织匀浆，细胞裂解液）（人／猴子／小鼠／大鼠）,5-25ul微量样本检测。LabEx提供V-PLEX人、小鼠、大鼠：炎症反应、免疫调节、TH1/TH2通路重要指标多因子组合检测限。试剂我们提供；检测我们来做，助您的时间更有价值！LabEx年多因子检测样本量达20w+！

Luminex：应用微球和流式细胞仪的原理，微球内部含有三种免疫荧光，通过荧光不同的比例可以区分500种不同的微球。每种微球可以用来检测一种不同的蛋白或基因。因此，利用微球技术，可以同时检测高达500个蛋白或基因。Luminex技术的测量结果在准确度、精确度、灵敏度方面与ELISA均可达到相似的水平。Luminex应用的荧光编码微球带有针对不同目标分子的特异性抗体，不同的微球在一定程度上可以自由组合，这样在一次实验中可以同时完成多个目标分子的分析。多目标分子的同时测定可以**减少生物样品的消耗量，节省成本和测定时间，并且使多种目标分子之间相关性的分析更加准确。目前，Luminex试剂盒已经可以检测500多种蛋白质分子，包括细胞因子、***、自身抗体、**标志物等。本panel可检测以下因子：GM-CSF,IFN-γ,IL-10,IL-12(p70),IL-13,IL-2,IL-4,IL-5,TNF-α 种属：Human。磁珠分选 buffer

本panel可检测以下因子：IFN-γ,IL-1β,IL-2,IL-4,IL-5,IL-6,IL-10,IL-17A,TNF-α 种属：Non-human Primate。细胞信号通路

本panel可检测以下因子：BAFF,BAFF-R/TNFRSF13C,BCMA/TNFRSF17,BDNF,CD20,CD27,CD28,CD40L(soluble),CD276/B7-H3,C-Peptide,CTACK,CTLA-4,ENA-78,Eotaxin,Eotaxin-2,Eotaxin-3,EPO,FGF(basic),FGF-23,FLT3L,Fractalkine,FSH,G-CSF,Ghrelin(active),Ghrelin(total),GIP(active),GIP(inactive),GIP(total),GITR/TNFRSF18,GITRL/TNFSF18,GLP-1(active),GLP-1(inactive),GM-CSF,gp130(soluble),GranzymeA,GranzymeB,GRO-α,HAVCR2/TIM-3,I-309,IFN-α2a,IFN-β,IFN-γ,IL-1α,IL-1β,IL-1RA,IL-2,IL-2Rα,IL-3,IL-4,IL-5,IL-6,IL-7,IL-8,IL-9,IL-10,IL-12/IL-23p40,IL-12p70,IL-13,IL-15,IL-16,IL-17A,IL-17A/F,IL-17C,IL-17D,IL-17E/IL-25,IL-17F,IL-18,IL-21,IL-22,IL-23,IL-27,IL-29/IFN-λ1,IL-31,IL-33,Insulin,IP-10,I-TAC,LAG3,Leptin,LuteinizingHormone(LH),MCP-1,MCP-2,MCP-4,M-CSF,MDC,MIF,MIP-1α,MIP-1β,MIP-5,OX40/TNFRSF4,PD1(epitope1),PD1(epitope2),PD-L1(epitope1),PD-L2,PlGF,PP,Proinsulin,PYY(total),RANKL/TNFSF11,SDF-1α,Tie-2,TIGIT,TLR1,TNF-α,TNF-β,TPO,TRAIL,TSLP,VEGF-A,VEGF-D,YKL-40种属：Human细胞信号通路

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