酵母文库:首先我们需要了解什么是"酵母双杂交技术"?酵母双杂交是一种研究真核细胞体内蛋白质之间相互作用的有效分子生物学技术,在功能基因组学和蛋白质组学研究中发挥重要作用。酵母文库产品线由7个**实验室组成,分别有RNA抽提室,RNA质检室、酵母建库室、大肠杆菌转化室,酵母菌转化室、筛库室等。使用原装试剂盒、培养基,保证实验质量。实验流程细致谨慎,实验团队经验丰富。实验中使用RIN值7以上的RNA,一次建库服务,多次质检实验,确保实验数据高效准确。不懂就问,酵母文库实验室究竟长啥样?拥有十余年丰富的文库构建。安徽什么是酵母文库
酵母文库实验由欧易生物协助完成。2021年3月,上海师范大学杨洪全教授为通讯作者,在ThePlantCell(IF:9.618)杂志发表了题为“ArabidopsisCryptochrome1ControlsPhotomorphogenesisthroughRegulationofH2A.ZDeposition”的研究论文,报道了拟南芥光形态建成调控的分子机制。上海师范大学茅志磊博士为***作者,文章中酵母文库实验由欧易生物协助完成。太阳光不仅为植物的光合作用提供能量来源,也是调节许多植物发育过程的关键环境信号。植物可以通过多种光受体监测和响应不同波长、方向和强度的光,其中**早发现的是蓝光受体隐花素 CRYs。拟南芥中 CRYs 有 2 个,其中 CRY1 主要参与调控光形态建成,CRY2 主要参与光周期开花调控。甘肃实力酵母文库酵母文库质量检测酵母基因功能鉴定。
酵母双杂交筛选实验:为进一步了解LEA3蛋白在干旱胁迫下调控植物生长和增强抗旱性的分子机制,本研究以干旱胁迫条件下的棉花根茎叶为材料,构建了棉花干旱胁迫酵母文库。并以GhLEA3为诱饵,采用酵母双杂交筛选实验,从棉花酵母文库中筛选获得了GhLEA3互作蛋白,并对互作蛋白进行了GO和KEGG分析,发现其中的互作蛋白GhVDAC1主要参与钙信号通路和cGMP-PKG信号通路,互作蛋白Gh***A参与多种生物途径,如糖原生成和代谢途径。此外,GhVDAC1和Gh***A受干旱胁迫诱导表达***,且在GhLEA3敲除的棉株中表达量低于野生型棉株
通过酵母双杂筛选实验,进一步研究AaWRKY9蛋白功能,结果筛选到了与AaWRKY9互作的AaJAZ9蛋白,并通过Y2H、BiFC、CoIP等进行了验证确认。JAZs是JA介导的植物相应中的负向调控因子,在毛状体和老叶中高表达,在芽尖和嫩叶中表达量低。为确认AaJAZ9是否抑制了AaWRKY9在促进青蒿素积累过程中的转录***功能,通过双荧光素酶报告基因检测实验发现,当AaWRKY9与AaJAZ9共表达时,其转录活性被抑制,而使用MeJA处理后,这种抑制作用被抵消,且AaWRKY9转录活性增强,反向验证实验结果一致。说明JA可以通过降解JAZ9,提高AaWRKY9转录活性,促进青蒿素生物合成。专业化的筛库流程,多重质检保证质量。初筛+复筛提高目标阳性克隆质粒精确度。
进行了酵母双杂交文库的筛选,结果显示钙依赖的种子特异性蛋白激酶SPK可以与OsNF-YB9相互作用,分段截取互作验证显示OsNF-YB9的N端是互作所必须的(图a-b),并通过双荧光分子互补实验、BiFC、体外GST-pulldown实验得以证实(图c-e)。亚细胞定位显示SPK主要在细胞质中表达,OsNF-YB9在细胞质和细胞核中都有表达,共表达SPK和OsNF-YB9***促进了OsNF-YB9的入核(图f),表明SPK和OsNF-YB9的相互作用可能促进了OsNF-YB9从细胞质向细胞核的运输。RT-PCR显示SPK在发育中的种子中高表达,在5DAF开始***,并在10-30DAF维持高表达水平(图a-b)。spk敲除突变体种子中垩白率的增加(图c-e),但粒形和粒重与野生型没有***差别。博士期间长期从事酵母单/双杂交文库构建及筛选的工作。贵州运用酵母文库
酵母文库技术服务欧易生物对每一个结果负责。安徽什么是酵母文库
酵母双杂交还可以这么用?Y2H-seq 揭示不老松年龄。***小欧又给大家带来了一篇酵母双杂交结合高通量测序技术的应用文章。北京林业大学钮世辉老师团队,在传统的酵母双杂交技术流程基础上,巧妙的结合了NGS技术,优化建立了Y2H-seq技术,**缩短了常规的筛库后测序验证周期,节约了实验成本。文章中应用Y2H-seq技术,对不老松年龄密码进行了有趣的研究,其中所用酵母双杂交文库由欧易生物协助完成。众所周知,酵母双杂交技术是研究蛋白相互作用的利器。目前已知的蛋白质相互作用至少有一半是通过酵母双杂交技术发现的。但是做过酵母杂交实验的小伙伴也都知道蛋白筛选较容易,但是筛选后,想知道获得的阳性克隆都对应的是啥基因,所花费的人力物力相当不小。有困难解决困难,勇敢牛牛不怕困难。安徽什么是酵母文库
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