单杂交筛选为了挖掘影响ALA诱导苹果黄酮醇积累的关键性调控因子,作者以Y1HGold[proMdFLS1-AbAi] 为诱饵,通过酵母单杂交筛选了ALA处理后的苹果愈伤组织cDNA文库。结果显示筛选出的蛋白质主要参与光合作用调控、碳糖代谢、氧化/渗透胁迫响应、***信号转导、木质素生物合成、果实成熟发育等过程,以及一些功能未知的蛋白质。其中, MdSCL8转录因子,由于其在草莓中的同源基因已被报导与黄酮的合成有关,引起了研究者的注意。进一步通过Y1H assay验证确认了MdSCL8可以与MdFLS1启动子互作(图2A)。通过双荧光素酶实验和GUS检测,发现MdSCL8可以负向调控MdFLS1启动子活性(图2B-D)。主要用于扩繁酵母备筛选文库,同时比较大限度保持初始酵母文库多样性。上海酵母文库质量
酵母杂交试验:随着分子生物学研究进入以蛋白质组学为标志的后基因组时代,蛋白质-蛋白质相互作用、蛋白质-DNA相互作用已成为互作组学研究的热门主题。人类基因粗略约编码2万种蛋白,只算一对一的相互作用种类也有12万到100万种。而加上动态变化,每个物种、个体、细胞中都存在着一张张不同的互作网络图,这一张张图谱中,蕴藏着各种生命的奥秘。有两种通用的相互作用组图谱绘制方式:第一种酵母杂交试验,通过偶联基因表达体现细胞内发生直接相互作用的蛋白对。第二种是通过抗体/标签分离纯化复合体,然后用质谱鉴定复合体内部组分,识别直接相互作用或间接相互作用的蛋白质。两种高通量方法彼此互补,相互验证。广东酵母文库有什么用酵母单杂交技术是在酵母双杂基础上发展而来的一种研究核酸。
苹果酵母文库:黄酮醇是一类重要的次生代谢产物,在防治人类**、*******、****血脂、抗氧化、抗病毒、抗过敏等方面发挥着重要作用。苹果除了含有多种维生素之外,还富含黄酮醇,这是"一日一苹果,医生远离我"的重要原因。了解黄酮醇的生物合成调控对改善苹果果实品质、提高苹果营养价值和提高苹果环境适应性具有重要意义。2022年2月,南京农业大学汪良驹团队在国际期刊分子科学上发表了题为“MdSCL8asaNegativeRegulatorParticipatesinALA-InducedFLS1toPromoteFlavonolAccumulationinApples”的研究论文,该研究发现MdSCL8作为MdFLS1的新调节因子,在ALA诱导苹果黄酮醇积累的过程中发挥负调控作用。该项目中所用的苹果酵母文库由欧易生物构建。
利用酵母文库进行双杂交筛选,结果显示 MdBT2 可以与 MdRGL3a 结合。MdRGL3a 编码 GA 信号阻遏物 DELLA 蛋白,主要分布于细胞核中。MdRGL3a 对于 GA 处理非常敏感,可以引起其发生降解,PAC 处理可以提高其稳定性。进一步的酵母一对一杂交验证实验表明,两者的结合依赖于 MdBT2 的 BTB 和 BACK 结构域、MdRGL3a 的 LHRI 和 SAW motif(图 A-B)。并通过 GST pull-down、BiFC 实验也证实了 MdBT2与 MdRGL3a 的结合(图 C-D)。细胞外降解实验显示,与对照相比,MdRGL3a 与过表达 MdBT2 的愈伤组织的总蛋白共同孵育,会导致 MdRGL3a 的降解加快;而与抑制 MdBT2 表达的愈伤组织的总蛋白共同孵育,会导致 MdRGL3a 的降解减缓(图 A)。并且蛋白酶体抑制剂 MG132 可以***抑制 MdRGL3a 的降解(图 B)。改变 MdRGL3a 表达量并不影响 MdBT2 的降解。以上结果表明,MdRGL3a 可能通过 26S 蛋白酶体途径发生降解,而 MdBT2 可以抑制 MdRGL3a 的降解。21天定制自己的酵母文库,花一份钱拥有“四个库”。
水稻转录因子文库筛选服务:2021 年 10 月 12 日,中国科学院分子植物科学***创新中心王二涛研究员为通讯作者,在 Cell 上发表了题为“A phosphate starvation response-centered network regulates mycorrhizal symbiosis”的封面论文。文章***报道了水稻-丛枝菌根共生转录调控网络,发现植物直接营养吸收途径与通过丛枝菌根共生的间接营养吸收途径均受到磷信号网络的统一调控,回答了菌根共生领域“自我调节”这一困扰领域的重要科学问题。分子植物科学***创新中心博士后石进彩为***作者,欧易生物肖云平也参与了此项研究。文章中水稻转录因子文库筛选服务由欧易生物提供。欧易生物是国内较早提供酵母杂交技术服务的生物公司,较早掌握Gateway和Smart两种建库方法。贵州酵母文库使用
酵母膜系统文库构建与筛选技术。上海酵母文库质量
通过酵母双杂筛选实验,进一步研究AaWRKY9蛋白功能,结果筛选到了与AaWRKY9互作的AaJAZ9蛋白,并通过Y2H、BiFC、CoIP等进行了验证确认。JAZs是JA介导的植物相应中的负向调控因子,在毛状体和老叶中高表达,在芽尖和嫩叶中表达量低。为确认AaJAZ9是否抑制了AaWRKY9在促进青蒿素积累过程中的转录***功能,通过双荧光素酶报告基因检测实验发现,当AaWRKY9与AaJAZ9共表达时,其转录活性被抑制,而使用MeJA处理后,这种抑制作用被抵消,且AaWRKY9转录活性增强,反向验证实验结果一致。说明JA可以通过降解JAZ9,提高AaWRKY9转录活性,促进青蒿素生物合成。上海酵母文库质量
上海欧易生物医学科技有限公司致力于医药健康,是一家服务型公司。欧易生物致力于为客户提供良好的科研服务,科研检测,学术研究,技术咨询,一切以用户需求为中心,深受广大客户的欢迎。公司从事医药健康多年,有着创新的设计、强大的技术,还有一批专业化的队伍,确保为客户提供良好的产品及服务。欧易生物秉承“客户为尊、服务为荣、创意为先、技术为实”的经营理念,全力打造公司的重点竞争力。