欧易酵母文库助力小麦根长抑制分子机制研究,近日,中国农业科学院作物科学研究所景蕊莲研究员、河南农业大学王翔副教授为共同通讯作者,在 Journal of Experimental Botany 杂志(IF: 6.992)在线发表了题为“小麦短根长度 1文章中酵母双杂交文库由欧易生物完成。本研究从小麦中克隆了一个新的 ERF 转录因子基因 TaSRL1 (SHORT ROOT LENGTH 1),该基因主要在根中表达。综上,本研究证明了 TaSRL1 在生长素依赖途径中作为 taPIN2 的直接调控因子,并通过与 TaTIFY9 相互作用,整合生长素和 JA 信号,抑制根的生长。TaSRL1-4A 标记对小麦根系、株形和产量的改良具有重要意义。酵母双杂交技术服务酵母双杂交文库构建。天津生物技术酵母文库
酵母文库实验:本研究发现了一个硝酸盐响应的 BTB/TAZ 蛋白 MdBT2,它参与调节硝酸盐介导的苹果植株生长。利用酵母双杂交、蛋白质 pull-down、BiFC 实验证实,MdBT2 可以与一个 DELLA 蛋白 MdRGL3a 互作,这种互作是 MdRGL3a 蛋白经由 26S 蛋白酶体途径的泛素化及降解所必需的。此外,异源表达 MdBT2 部分回复了 MdRGL3a 过表达所导致的拟南芥生长抑制。综上表明,MdBT2 可以通过降低 DELLA 蛋白 MdRGL3a 的丰度促进硝酸盐介导的植物生长。实验室培养显示,培养 45 天,苹果幼苗的高度和生物量随硝酸盐浓度的增加而增加(图 A-C)。黑龙江技术酵母文库专业化的筛库流程,多重质检保证质量。初筛+复筛提高目标阳性克隆质粒精确度。
酵母文库:首先我们需要了解什么是"酵母双杂交技术"?酵母双杂交是一种研究真核细胞体内蛋白质之间相互作用的有效分子生物学技术,在功能基因组学和蛋白质组学研究中发挥重要作用。酵母文库产品线由7个**实验室组成,分别有RNA抽提室,RNA质检室、酵母建库室、大肠杆菌转化室,酵母菌转化室、筛库室等。使用原装试剂盒、培养基,保证实验质量。实验流程细致谨慎,实验团队经验丰富。实验中使用RIN值7以上的RNA,一次建库服务,多次质检实验,确保实验数据高效准确。
利用酵母双杂交技术进行筛选,结果显示SP8可以与水稻OsMYC3蛋白相互作用,并且二者互作关系通过酵母一对一互作、BiFC、Co-IP、LCI实验得以验证(图A-C)。利用截短的SP8进行酵母一对一互作和Co-IP检测表明,与OsMYC3的结合依赖于SP8的NTP结构域(图D-E);同样,OsMYC3的TAD结构域也是二者互作所必不可少的(图F)。酵母双杂交、BiFC实验表明,OsMYC3可以与OsJAZ相互作用。经茉莉酸处理,野生对照株根的长度明显被抑制、一系列JA生物合成和信号传导相关基因表达量上升,但Osmyc3突变体中抑制程度减轻、JA相关基因表达量上升减少。液态酵母单双杂高通量筛库方法及其应用。
酵母双杂交表明拟南芥AtBT2蛋白可以与AtRGA互作。与对照相比,拟南芥bt1/2双突变体幼苗高度降低,而硝酸盐处理可以进一步抑制其生长,外源施加GA可以回复其生长缺陷。在拟南芥中异源表达MdBT2可以明显提高植株高度,而PAC处理则会抑制这种生长的促进作用。在拟南芥中异源表达MdRGL3a可以明显抑制植株生长,而硝酸盐处理和MdBT2过表达则会缓解这种生长抑制作用。外源GA处理可以逆转以上对植株生长的影响(图A-D)。以上结果表明,BT蛋白通过DELLA蛋白调控植株生长,这一机制在不同的植物中具有保守性。欧易生物是国内较早提供酵母杂交技术服务的生物公司,较早掌握Gateway和Smart两种建库方法。河北建库酵母文库
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酵母文库:2021年11月,山东农业大学园艺科学与工程学院张振鲁团队在MolecularPlantPathology(IF:5.663)发表了题为“Nitrate-inducibleMdBT2actsasarestrictionfactortolimitapplenecroticmosaicvirusgenomereplicationinMalusdomestica”的研究论文,报道了MdBT2蛋白在抑制病毒ApNMV基因组RNA复制中的作用。文章中所用酵母文库为欧易生物构建。ApNMV与ApMV相似,含有3种正义单链基因组RNAs:RNA1(编码1a蛋白,后面你会经常看到它,对病毒复制至关重要),RNA2(编码RNA聚合酶)和RNA3(编码MP),以及在3种RNA中排名第4的RNA4(编码CP)。当然苹果如何抵抗ApNMV的研究机制就更少了。天津生物技术酵母文库
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