酵母文库实验：本研究发现了一个硝酸盐响应的 BTB/TAZ 蛋白 MdBT2，它参与调节硝酸盐介导的苹果植株生长。利用酵母双杂交、蛋白质 pull-down、BiFC 实验证实，MdBT2 可以与一个 DELLA 蛋白 MdRGL3a 互作，这种互作是 MdRGL3a 蛋白经由 26S 蛋白酶体途径的泛素化及降解所必需的。此外，异源表达 MdBT2 部分回复了 MdRGL3a 过表达所导致的拟南芥生长抑制。综上表明，MdBT2 可以通过降低 DELLA 蛋白 MdRGL3a 的丰度促进硝酸盐介导的植物生长。实验室培养显示，培养 45 天，苹果幼苗的高度和生物量随硝酸盐浓度的增加而增加（图 A-C）。酵母杂交技术兼具通量高、结果直观、操作简易，重复性好的优势。江西技术酵母文库做什么
根系是植物从土壤中吸收水分、养分和感知环境刺激的独特***。根系结构的优化有助于提高植株的抗逆性和产量。ERF（ETHYLENERESPONSIVEFACTOR）是植物特有的转录因子家族之一，与植物的多种发育过程和抗逆性有关。ERFs在拟南芥和水稻根系发育中的作用已经多有报道，但小麦ERFs在根系发育中的作用尚待研究。报道了小麦 TaSRL1 转录因子调控根长的分子机制。文章中酵母双杂交文库由欧易生物完成。从小麦基因组中克隆了 TaSRL1 基因，RT-PCR 显示 TaSRL1 主要在小麦苗期的根中表达。对 TaSRL1 启动子序列进行预测分析。江西技术酵母文库做什么欧易生物酵母文库拥有GAL4系统、泛素系统，单杂、双杂等多种酵母杂交筛选方法。
进行了酵母双杂交筛选实验，结果显示 MdMPK3 可以与 MdWRKY17 相互作用（图 C），并且通过 BiFC、Co-IP 得以证实（图 D-E）。MdMPK3 的激酶活性水平在炭疽菌***后也***上升（图 B）。进一步的 BiFC 和 Co-IP 表明，MdMEK4 可以与 MdMPK3 相互作用（图 F-G）。体外激酶试验表明，MdWRKY17 能够被MdMEK4- MdMPK3 级联磷酸化（图 H）。综上，MdMEK4-MdMPK3 级联磷酸化 MdWRKY17。与对照相比，MdWRKY17过表达植株中水杨酸含量降低，而RNAiMdWRKY17植株中水杨酸含量升高（图A）。
酵母双杂交（Y2H）：植物转录因子（Plant transcripter factors， TFs）是调控植物生长发育和环境适应性的关键分子。虽然在一些数据库中，如RiceSRTFDB （Priya and Jain， 2013）， Ricettissuetfdb （Chen et al.，PlnTFDB （Pérez-Rodríguez et al.， 2009）和PlantTFDB （Jin et al.， 2017），可以预测水稻转录因子功能。但通过具体实验研究，来直接证实转录因子对植物的调控作用仍然是必不可少的。酵母双杂交（Y2H）和酵母单杂交（Y1H）是被用于研究蛋白-蛋白以及蛋白-DNA互作的**常用技术。为了方便和促进水稻育种研究，陈凡老师与欧易生物达成合作，整合双方优势资源，历经春秋与冬夏，成功构建了基于粳稻（日本晴）基因组的水稻转录因子文库。该项成果以“一种高效的筛选系统来鉴定大米转录因子的蛋白质-蛋白质或蛋白质-DNA相互作用伙伴”为题，发表于杂志JGG上。酵母单杂交实验步骤酵母文库构建原理。
利用酵母文库进行双杂交筛选，结果显示 MdBT2 可以与 MdRGL3a 结合。MdRGL3a 编码 GA 信号阻遏物 DELLA 蛋白，主要分布于细胞核中。MdRGL3a 对于 GA 处理非常敏感，可以引起其发生降解，PAC 处理可以提高其稳定性。进一步的酵母一对一杂交验证实验表明，两者的结合依赖于 MdBT2 的 BTB 和 BACK 结构域、MdRGL3a 的 LHRI 和 SAW motif（图 A-B）。并通过 GST pull-down、BiFC 实验也证实了 MdBT2与 MdRGL3a 的结合（图 C-D）。细胞外降解实验显示，与对照相比，MdRGL3a 与过表达 MdBT2 的愈伤组织的总蛋白共同孵育，会导致 MdRGL3a 的降解加快；而与抑制 MdBT2 表达的愈伤组织的总蛋白共同孵育，会导致 MdRGL3a 的降解减缓（图 A）。并且蛋白酶体抑制剂 MG132 可以***抑制 MdRGL3a 的降解（图 B）。改变 MdRGL3a 表达量并不影响 MdBT2 的降解。以上结果表明，MdRGL3a 可能通过 26S 蛋白酶体途径发生降解，而 MdBT2 可以抑制 MdRGL3a 的降解。酵母杂交案例专业的硕博团队。江西技术酵母文库做什么
酵母单杂筛库酵母文库筛选酵母双杂交筛库步骤。江西技术酵母文库做什么
通过酵母双杂筛选实验，进一步研究AaWRKY9蛋白功能，结果筛选到了与AaWRKY9互作的AaJAZ9蛋白，并通过Y2H、BiFC、CoIP等进行了验证确认。JAZs是JA介导的植物相应中的负向调控因子，在毛状体和老叶中高表达，在芽尖和嫩叶中表达量低。为确认AaJAZ9是否抑制了AaWRKY9在促进青蒿素积累过程中的转录***功能，通过双荧光素酶报告基因检测实验发现，当AaWRKY9与AaJAZ9共表达时，其转录活性被抑制，而使用MeJA处理后，这种抑制作用被抵消，且AaWRKY9转录活性增强，反向验证实验结果一致。说明JA可以通过降解JAZ9，提高AaWRKY9转录活性，促进青蒿素生物合成。江西技术酵母文库做什么
上海欧易生物医学科技有限公司是一家服务型类企业，积极探索行业发展，努力实现产品创新。是一家私营合伙企业企业，随着市场的发展和生产的需求，与多家企业合作研究，在原有产品的基础上经过不断改进，追求新型，在强化内部管理，完善结构调整的同时，良好的质量、合理的价格、完善的服务，在业界受到宽泛好评。以满足顾客要求为己任；以顾客永远满意为标准；以保持行业优先为目标，提供***的科研服务，科研检测，学术研究，技术咨询。欧易生物以创造***产品及服务的理念，打造高指标的服务，引导行业的发展。
