外泌体载药基本参数
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外泌体载药企业商机

 影响外泌体载药效率的因素有许多:1外泌体的分离与纯化:目前,准确和标准的外泌体纯化方法较少,使用不同方法获得的外泌体其收率与纯度差别较大,需要根据研究目的不同选择适当的分离方法,超速离心法是外泌体纯化常用的手段,低速离心和高速离心交替进行的方法通常用于从大量样品中分离外泌体,但获得的外泌体纯度不高。外泌体的收率过低与低纯度会影响其对药物包载效率,难以实现大批量生产。2包载方法:根据包载药物的分子极性、相对分子质量及自身所带电荷等性质选择不同的包载方法。不同包载方法对于同一种药物的包载效率可能完全不同。外泌体对基因类药物的装载方式一般采用电穿孔法和化学转染法。江西组织样本外泌体载药参考价

外泌体直接载yao方式包括皂苷处理法、孵育法、冻融循环法、超声法和挤出法等。皂苷处理法指共培养外泌体、药物和皂苷溶液,然后通过透析膜、色谱柱纯化得到载药外泌体的方法。孵育法指药物和外泌体在适宜的条件下共培养。冻融循环法是经过冷冻、融化过程使外泌体包裹药物。超声法利用超声波使药物进入外泌体中,挤出法利用挤出机实现外泌体载带药物。其中皂苷辅助药物装载方法是直接载yao方式中常用的一种载yao方式。上述方法也存在一些缺点:孵育法操作简单,但载药量低;冻融循环法、超声法和挤出法对仪器的要求高,且可能会破坏外泌体的质膜结构造成药物泄露,终造成载药量不理想。江苏细胞外泌体载药实验服务许多抗ai药物、基因药物及抗yan药物均可载入外泌体中。

小分子siRNA、miRNA常作为基因zhiliao的核酸药物,但其稳定性差,极易被体内的酶降解,限制了它在临床中的运用。而外泌体的脂质双分子层结构可以保护基因类药物,避免其降解。其次,外泌体能通过膜融合的方式直接将包载的基因类药物释放到受体细胞中,实现更高的投递效率。许多研究证明外泌体能成功递送小分子siRNA、miRNA。通过体外实验证明,来源于血浆的外泌体可以有效地传递siRNA到单核细胞和淋巴细胞,使MAKP1基因沉默。利用类似的方法递送RAD51- siRNA和RAD52-siRNA到HELA细胞和纤维素肉瘤细胞中从而诱导两个基因的沉默,研究证明RAD51基因的沉默可以造成中流细胞大量的凋亡,因而通过外泌体负载siRNA用于中流疾病方面的zhiliao句有广阔的前景。

抗ai症药物——阿霉素(DOX)已经成功被载入外泌体中,并对其抗中流作用进行了研究。在运输DOX的研究中,Wei等选择了已经在临床上使用的未成熟的树突细胞作为母代细胞,通过化学转染使其分泌的外泌体表面含有Lamp2b,这种蛋白可以与αv整合蛋白特异性iRGD肽结合,使外泌体对DOX的运输句有靶向性。将对iRGD肽靶向的外泌体和未经靶向性处理的外泌体用DiR染料标记,并分别静脉注射入移植了人乳腺ai细胞的小鼠体内,观察到靶向的外泌体在注射30min后已经出现在中流组织处,在注射2h后外泌体的含量高,而未经靶向性处理的外泌体在注射后主要集中在肝脏,几乎很少到达中流组织处,说明对iRGD肽靶向的外泌体句有很好的靶向性。抗中流药物运输载体对中流的靶向性至关重要,靶向性强的载体可以大限度地把药物运输到中流处,发挥药物的作用。负载DOX的iRGD肽靶向性外泌体对中流的抑制效果远优于单纯的DOX。外泌体载药系统在ai症、脑梗死和神经退行性疾病等各种疾病模型的研究中显示出理想的zhiliao效果。

外泌体的提取方法在外泌体载药系统中应用——聚合物沉淀法。用于分离病毒和其他的生物大分子,已有50多年历史,近几年,将其作为一种新的方法来分离外泌体。目前,市场已经有应用聚乙二醇(polyeth yleneglycol,PEG)溶液提取外泌体的试剂盒,常见的是SystemBiosciences公司的ExoQuick®和ExoQuick-TC®kits,该试剂盒操作简单不需要特殊的仪器,但是价格昂贵。提取外泌体的试剂盒主要成分是PEG8000(30%~50%),将试剂盒与体液或细胞培养液4℃孵育过夜,之后再低速离心。即可进行外泌体的提取,此方法实行起来较为简单。包载厚朴酚的外泌体比游离厚朴酚有更高的zhiliao功效,可改善细胞摄取从而提高抗中流功效。湖南细胞样本外泌体载药实验咨询问价

药物载入外泌体的方法中后转载的方法更适用于小分子的疏水类药物。江西组织样本外泌体载药参考价

外泌体载带蛋白质药物的方法包括直接和间接两种载yao方式。间接载yao方式是目前实现外泌体载带目标蛋白质的主要方法,通过基因工程使目标蛋白质核酸转染供体细胞,待供体细胞表达目标蛋白质后,分离纯化其培养基,得到载带有目标蛋白质的外泌体递送系统。主要缺点是载药周期长、载药量和载药过程不可控,在一定程度上限制该方法在构建外泌体递送系统上的应用;直接载yao方式是指不涉及外泌体供体细胞,直接通过某种化学或物理作用将外源性蛋白质载入外泌体中的方法。因周期短、操作简单、过程可控等优点,成为一种极句前景的研究方法。江西组织样本外泌体载药参考价

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