酵母文库实验:MAPK级联***是植物防御病原体入侵信号传导过程中的关键事件,MAPKs靶向并磷酸化调节下游基因转录的转录因子,**终响应病原菌的侵入。WRKYs转录因子是MAPK级联的重要目标,在植物对各种病原体的抗性中起着关键作用。苹果如何响应炭疽菌入侵,将信号传导到细胞内,以及哪个转录因子负责协调促进GLS耐受均尚不清楚。本研究在苹果炭疽叶枯病易感品种“嘎拉”中发现了一个由苹果炭疽菌******诱导的转录因子MdWRKY17。在6个易感苹果种质中,MdWRKY17表达水平***高于6个耐受苹果种质,同时对应的水杨酸含量降低,证实了MdWRKY17介导的水杨酸降解在GLS耐受中的关键作用。酵母文库酵母单杂交筛库科技研究双文库高校外包平台。技术酵母文库领域
酵母双杂交文库:植物从营养生长到生殖生长时相的不可逆转变,是植物生命周期中的一个关键阶段,是植物生存和繁殖至为关键的重要事件。在开始繁殖之前,许多多年生木本植物经历了一个相当漫长的幼年时期。与模式植物(如拟南芥)相比,针叶树通常具有非常长的生命周期。尽管在模式植物开花时间控制研究上取得相当大的进展,但对多年生树木,特别是针叶树年龄信号的调控机制仍知之甚少。因此,深入研究林木年龄信号对生殖发育过程的影响具有重要的理论和实践意义。山西应用酵母文库关于酵母杂交文库构建及筛选你需要知道这些。
酵母双杂交、pulldown和BiFC实验均显示,MdTRB1可以通过其C末端与JAZ1蛋白互作。在苹果叶片和愈伤组织中过表达MdJAZ1,花青素和原花青素的累积受到明显抑制。在苹果叶片和愈伤组织***表达MdJAZ1/MdJAZ1,结果显示过表达MdJAZ1抑制了MdTRB1对花青素和原花青素累积的促进作用。Pull down 实验和荧光素酶互补成像实验结果表明,在 MdJAZ1 存在下,MdTRB1 与 MdMYB9 的结合减弱(图 a-c);外源施加 JA 可以部分恢复 MdTRB1 与 MdMYB9 的结合。对于 MdTRB1 在 JA 介导的花青素和原花青素积累中的作用机制,本研究建立了一个新的模型:MdTRB1 通过与 MdMYB9 互作,增强了 MdMYB9 对下游基因的转录***活性,进而正向调节了 JA 介导的花青素和原花青素累积。在 JA 缺乏的条件下,MdJAZ1 与 MdTRB1 互作,干扰了 MdTRB1 与 MdMYB9 之间的结合;在 JA 存在的条件下,MdJAZ1 被降解,MdTRB1 被释放出来以参与后续过程。
通过酵母双杂交进行筛选,结果显示 SWC6 可以在蓝光下与 CRY1 相互作用(图 A-C)。同样,酵母双杂交实验显示 CRY2 也可以在蓝光下与 SWC6 相互作用(图 D)。并通过 pull-down、split-LUC、semi-in vivo pull-down、Co-IP 实验(图 E-L)证实 CRY1、CRY2 与 SWC6 的结合是蓝光依赖性的。SWC6 是真核生物中已报道的 SWR1 复合物亚基,负责催化 H2A.Z 在染色质上的替换。已报道 SWR1 复合物中 SWC6 可以与 ARP6 亚基结合。Pull-down、split-LUC、semi-in vivo pull-down、Co-IP 实验(图 A-H)显示,CRY1、CRY2 可以蓝光依赖性与 ARP6 结合。酵母生长速度快且容易操作的特点酵母文库。
单杂交筛选为了挖掘影响ALA诱导苹果黄酮醇积累的关键性调控因子,作者以Y1HGold[proMdFLS1-AbAi] 为诱饵,通过酵母单杂交筛选了ALA处理后的苹果愈伤组织cDNA文库。结果显示筛选出的蛋白质主要参与光合作用调控、碳糖代谢、氧化/渗透胁迫响应、***信号转导、木质素生物合成、果实成熟发育等过程,以及一些功能未知的蛋白质。其中, MdSCL8转录因子,由于其在草莓中的同源基因已被报导与黄酮的合成有关,引起了研究者的注意。进一步通过Y1H assay验证确认了MdSCL8可以与MdFLS1启动子互作(图2A)。通过双荧光素酶实验和GUS检测,发现MdSCL8可以负向调控MdFLS1启动子活性(图2B-D)。博士期间长期从事酵母单/双杂交文库构建及筛选的工作。陕西酵母文库是什么
什么是酵母文库的构建? 只需构建自己需要研究蛋白的BD载体,就能和本司**储备的酵母文库进行筛库实验。技术酵母文库领域
欧易生物酵母文库技术发表的又一篇高水平研究论文。植物***茉莉酸(JA)参与植物许多发育过程的调控。JAZ蛋白是茉莉酸信号反应的阻遏物,通过抑制JA转录调节剂来负向调节JA信号。花青素和原花青素是种子、叶、花和果实中重要的植物次生代谢产物,可充当抗氧化剂,帮助***活性氧和对**老,对人类健康具有重要价值。已有研究表明,花青素和原花青素的生物合成基因的转录受MYB、basichelix-loop-helix(bHLH)及WD40蛋白的调控。其中,苹果MYB转录因子MdMYB9参与调控JA介导的花青素和原花青素的生物合成,但其分子机制仍有待深入研究。技术酵母文库领域
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