邳州哺乳动物悬浮和贴壁细胞的培养基

血清和血浆均来自全血，通过离心去除包括红细胞在内的成分。血浆和血清之间的区别在于，凝血蛋白存在于血浆中，但已从血清中去除。血浆一般是通过在离心前向血液中加入抗凝剂来制备的，但不会去除凝血蛋白。通过在离心前使血液凝固或通过普遍/渐进离心来制备血清。因此，与凝血相关的纤维蛋白原和蛋白质不存在于血清中。在人类中，以下22种蛋白质占血清和血浆总蛋白质含量的99%：白蛋白、总IgG、转铁蛋白、纤维蛋白原、总IgA、α-2-巨球蛋白、总IgM、α-1-抗胰蛋白酶、C3补体、结合球蛋白、α-1-酸性糖蛋白、载脂蛋白-B、载脂蛋白-A1、脂蛋白(a)、因子H、铜蓝蛋白、C4补体、补体因子B、前白蛋白、C9补体、C1q补体和C8补体。剩下的1%包括数百种蛋白质。更丰富的血清蛋白白蛋白，浓度为50mg/ml，约占总蛋白质量的一半。胎牛血清是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。邳州哺乳动物悬浮和贴壁细胞的培养基

胎牛血清给细胞提供的益处主要体现在6个方面：1、提供细胞生长所需的天然元素或天然的生长因子。2、提供天然的结合蛋白，能识别氨基酸、脂质、金属离子和元素等，能结合并调节它们的活性。已知清蛋白(albumin）即具有上述功能，并对细胞代谢、生物合成、增殖和存活具有潜在的影响。又如胎牛血清中富含胎球蛋白（Fetuin），具有多个钙离子结合位点，因而能调节和维持血清中的钙离子浓度。3、天然含有粘附蛋白等细胞外基质成分，促进细胞的附着、铺展。4、提供消毒功能。这主要通过血清中的某些蛋白与有毒的金属离子结合来完成的。如金属硫蛋白，对多种重金属有高度亲和性，并可清理细胞生长环境中的氧自由基（·O），具有很强的抗氧化活性，可防止细胞衰老。5、提供酸碱度缓冲的作用，以及维持渗透压。6、提供蛋白酶抑制剂，使细胞免受蛋白酶的损伤。因此在细胞消化时，常用含血清的培养液终止胰酶对细胞的作用。无锡哺乳动物悬浮和贴壁细胞的培养基虽然胎牛血清与新生牛血清的成分并不存在很大的差别，可是诸如促细胞生长因子和促贴附因子等组份并不相同。

胎牛血清都有哪些重要的指标：总蛋白含量，胎牛血清的总蛋白含量一般范围是30-40mg/ml，数值偏高，说明采集血液的牛龄偏大，不是胎牛；数值偏低，表明血清可能掺水了。pH值，根据药典，胎牛血清的pH值在7.0-8.0之间，并没有什么具体依据把进口血清和国产血清用7.5这个分界线界定。渗透压，胎牛血清渗透压的检测一般采用冰点法，渗透压摩尔浓度（mOsmol/kg）：280-360之间。微生物，包括细菌、霉菌、支原体、噬菌体等。随着各个品牌血清生产条件的改善提高，细菌、霉菌等“大型”微生物几乎能100%控制。支原体通过0.1um3次无菌过滤去除。关于噬菌体主要是生产环境过程中带入，又无法过滤，很难彻底清理，但对血清质量影响不大，不过对于工业生产的客户来说，往往会采用γ照射的胎牛血清来避免噬菌体。

胎牛血清特点：采集方法：通过密闭系统收集法保证血清质量，保证低内有害元素、低血红蛋白过滤方法：通常采用3个连续的100nm孔径的过滤器过滤检测体系：每批产品均经过严格的细菌、支原体、病毒、内有害元素、血红蛋白等检测。胎牛血清功能及作用：牛血清是细胞培养中用量更大的天然培养基，含有丰富的细胞生长必需的营养成分，常用于动物细胞的体外培养，具有极为重要的功能。1.提供对维持细胞指数生长的元素，基础培养基中没有或量很少的营养物，以及主要的低分子营养物。2.提供结合蛋白，能识别维生素、脂类、金属和其他元素等，能结合或调变它们所结合的物质活力。3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合，起到消毒作用。胎牛血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物。

胎牛血清都有哪些重要的指标：一、内有害元素，内有害元素是革兰氏阴性菌的细胞壁外壁层上的特有成分。当细菌死亡自溶或粘附在其它细胞时，才表现其毒性。内有害元素直接参与细胞凋亡，血清中内有害元素含量越低，对细胞毒性越小，越利于细胞的生长和传代；内有害元素含量过高，会直接导致细胞提前老化。国际上规定，胎牛血清的级别，应以内有害元素水平的高低来确定，其中，特级胎牛血清的内有害元素应。二、血红蛋白含量，胎牛血清的颜色会根据血红蛋白含量的不同表现出黄色、淡黄色、橘红色、微红色等。细胞培养用血清的标准是血红蛋白含量不高于20mg/dl，颜色越红，数值越高；反之，数值越低。实际上，血红蛋白含量的高低对血清并无直接影响。这个指标的意义在于能体现出采集血液过程的严谨规范程度，良好的操作能降低血清的溶血。胎牛血清是细胞培养中用量更大的天然培养基，含有丰富的细胞生长必须的营养成分。高邮DMEM(高糖）培养基（含双抗）

胎牛血里的生长因子适合牛体内各种细胞生长，通常在8个月胎龄后慢慢消失。邳州哺乳动物悬浮和贴壁细胞的培养基

胎牛血清使用中的常见问题：如何储存和解冻血清才不会使产品质量受损?将血清从冷冻箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室温下使之全融。但必须注意的是，融解过程中必须规则地摇晃均匀。长时间储存在2-8℃时，血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。因此，推荐在-20℃以下储存血清，并避免反复冻融。我们建议血清应保存在-2O℃。若存放于4℃时，请勿超过一个月。若一次无法用完一瓶，建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内，再放回冷冻。邳州哺乳动物悬浮和贴壁细胞的培养基

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