脂质体纳米药物主动载药、药前设计和固定化酶等策略的启发,团队开发了一个新的工程化小细胞外囊泡平台,名为“酯酶响应型主动载药”(EAL),可用于高效、稳定的加载活性yao物分子。选择广泛应用的阿魏酸酯类衍生物作为前药,建立连续的跨膜离子梯度,实现阿魏酸活性分子在小细胞外囊泡中的高载药量。结果表明,载药量和包封率分别比被动负载高约6倍和5倍。此外,团队自创的超速离心结合多种膜过滤方法可以实现大规模、高质量的小细胞外囊泡的生产。细胞外和细胞内评估实验进一步证实由EAL所制备的载阿魏酸小细胞外囊泡制剂在缓释和低毒方面的优越性能。综上所述,这些发现将为基于小细胞外囊泡的递药系统开发提供具有指导意义的见解。CD4+T细胞产生的外泌体具有免疫调节的作用。上海外泌体摄取
细胞外囊泡(Extracellular vesicles,EVs)是几乎所有类型细胞都能分泌的具有膜结构的一类微小囊泡,通过携带携带蛋白质、脂类、核酸等生物活性分子,在细胞间通讯中发挥多功能调节作用。非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)可以通过调节表观遗传、转录和转录后水平的基因表达来影响CA进展。有研究表明EV来源的非编码RNA具有高度的组织特异性和稳定性,因此可以成为有前途的诊断生物标志物。tumour转移是CA治疗失败和患者死亡的主要原因。越来越多的证据表明肿瘤细胞来源的EV通过传递非编码RNA影响“organ特异性转移”,驱使tumour扩散并定植到特定的靶organ,主要包括骨、肝、肺、脑和淋巴结等。辽宁腹水外泌体western blot蛋白质分子在外泌体信号传递过程中起到了非常重要的作用。
内皮细胞损伤在缺血性急性肾损伤(AKI)中起关键作用,并参与AKI的进展。靶向肾内皮细胞诊治可能会改善血管损伤并进一步改善缺血性AKI的预后。在此,鉴定了P-选择素作为内皮细胞缺血性AKI的生物标志物,并开发了具有成像和诊治功能的P-选择素结合肽(PBP)工程化细胞外囊泡(PBP-EV)。结果表明,PBP-EV表现出对受损肾脏的选择性靶向倾向,同时通过分子成像量化肾脏中P-选择素的表达,为AKI的早期诊断提供时空信息。同时,PBP-EVs通过减轻炎症浸润、改善修复性血管生成和改善肾实质的适应不良修复,在促进肾脏修复和抑制纤维化方面显示出优越的肾脏保护功能。总之,PBP-EVs作为本研究中设计的缺血性AKI诊治诊断系统,在AKI的早期阶段提供时空诊断,以帮助指导个性化诊治并表现出卓yue的肾保护作用,为设计提供概念验证数据基于EV的诊治诊断策略可促进肾脏恢复并进一步改善AKI后的长期结果。
外泌体也可能通过影响受体细胞中的基因表达和信号通路来调节免疫反应,主要是通过miRNA的转移。外泌体miRNA可以在树突状细胞之间交换并抑制基因表达,这种外泌体介导的细胞间通讯可能影响树突状细胞成熟。tumour来源的外泌体如miR-212-3p会下调树突状细胞中的MHC-II转录因子RFXAP(调节因子X相关蛋白),可能促进ai细胞的免疫逃避。tumour来源的外泌体mir222-3p会下调单核细胞中的SOCS3(细胞因子信号传导抑制因子3),从而促进STAT3介导的M2极化的巨噬细胞,可能产生免疫抑制微环境。循环外泌体lncRNA-GC1有作为早期检测胃ai进展的诊断价值。
Vlassov等人发表的一篇外泌体的提取方法及组成的专利文献中介绍,通过终浓度为8%的PEG6000与生物体液共孵育14h后,10000xg离心1h,可将直径在30-150nm之间,且包含丰富RNA的外泌体沉淀下来。因此采用终浓度为8%的PEG6000沉淀血清中的外泌体,为了进一步纯化胎盘相关外泌体,将获得的包含外泌体的沉淀用PBS重新悬浮后,加入非线性蔗糖密度梯度层,10000xg超速离心5h,将分层液采用PEG6000进行2次沉淀。经过多次实验反复验证,确定同时表达外泌体标志蛋白分子及胎盘特异性蛋白分子的胎盘来源外泌体所在密度层。所有真核细胞类型包括造血细胞、上皮细胞、干细胞、脂肪细胞均可在培养条件下分泌外泌体。辽宁腹水外泌体提取
外泌体复杂的内容物被认为是疾病诊断的无创或微创生物标志物。上海外泌体摄取
三阴性乳腺ai(TNBC)标准护理诊治临床指南推荐将免疫检查点抑制剂(ICI)与蒽环类药物联合使用的策略。尽管如此,一些基本的临床原则仍有待阐明以实现良好的诊治效果,包括CA归巢传递效率和顺序间隔制度。tumour来源的细胞外囊泡(TDEV)作为tumour内细胞间通讯的载体,可以包裹诊治剂和tumour。然而,TDEVs中的PD-L1过表达导致体内循环过程中的全身免疫抑制,醉终抑制瘤内T活性。在本研究中,CRISPR/Cas9编辑的Pd-l1KOTDEV-融合蒽环类多柔比星(DOX)脂质体具有高药物包封率(97%),可将DOX同源递送至乳腺ai细胞以****原性反应并诱导PD-L1在tumour中过度表达。通过设置使tumour对ICIs敏感的阶段,用二硫键连接的PD1交叉锚定的TDEVs纳米凝胶以一tian的间隔连续诊治可以在tumour中持续释放PD1,引发高比例的效应T细胞介导的原位和在携带4T1的TNBC小鼠模型中没有脱靶副作用的转移性tumour。这种TDEV串联增强化学免疫诊治策略具有高效的CA归巢传递能力和优化的顺序间隔机制,为在临床水平上开发用于TNBC诊治的化学免疫诊治制剂奠定了坚实的基础。 上海外泌体摄取
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