酵母单杂交筛选技术:关于HIV想必大家都不陌生，***HIV病毒后潜伏周期长，且目前没有完全的***方法。为了彻底***HIV，不让其发病就要从2方面入手：要么消除潜伏***的细胞，要么防止潜伏原病毒的细胞被***。也就是需要抑制HIV病毒的转录。但是关于HIV在人细胞中的复制、转录和潜伏期调控的分子网络仍不完全确定，所以目前HIV仍不能被**。为了帮助解决这个问题，波士顿大学的研究者，使用酵母单杂交筛选技术，以HIV-1,HIV-2的LTR（启动子和增强子）为诱饵，筛选了人的转录因子文库（包含1086个人的转录因子），**终绘制了调节HIV-1和HIV-2的转录网络图谱，结果发表在2021年的PNAS杂志上。酵母文库质粒使用指南酵母菌的介绍 。黑龙江运用酵母文库
酵母文库:细菌鞭毛蛋白是一种重要的细菌毒力因子，可刺激动植物细胞中的分子免疫信号转导。脊椎动物识别鞭毛蛋白和建立有效免疫反应的详细机制已经被揭示；然而，无脊椎动物是否能够识别鞭毛蛋白仍未可知。2022年1月24日，山东大学王显伟团队在PLOSPATHOGENS（IF：6.823）上发表了题为“Shoc2regnizesbacterialflagellinandmediatesantibacterialErk/Statsignalinginaninvertebrate”的研究论文，揭示了MjShoc2可以与鞭毛蛋白FlaA互作，引发一系列炎症反应，促使对虾抵抗细菌***，为无脊椎动物对鞭毛蛋白的感知机制提供了见解。该项目中所用的对虾酵母文库由欧易生物构建。黑龙江运用酵母文库酵母文库酵母双杂交筛库个性化定制研究方案。
通过传统的酵母双杂交系统，以PtDAL1为诱饵，筛选样本来源于不同年龄段的油松cDNA文库。将获得的阳性克隆，10个一组，挑选到1个96孔板的PCR板孔中，获得10*96个阳性克隆的96孔板。以其中阳性克隆mix为模板，进行PCR扩增，并将所有的PCR产物进行纯化。使用纯化后的PCR产物，进行打断后构建二代测序文库，通过NGS测序，获得6G的阳性克隆数据。通过分析二代测序数据，获得阳性克隆基因信息（去冗余后获得135个互作子，包含21个TFs，2个TRs及酶类、热激蛋白、RNA结合等蛋白，部分见表1）。挑选重要的候选基因进行一对一验证（图2）。与拟南芥中同源基因AGL6的蛋白互作网络进行比对分析。对DAL1互作蛋白（DIPs）的基因表达谱、启动子中的顺势作用元件功能进行分析，并对DIPs进行GO注释（图3）。综合生信分析结果，构建针叶树老化途径的调控模型（图4）。
通过酵母双杂筛选实验，进一步研究AaWRKY9蛋白功能，结果筛选到了与AaWRKY9互作的AaJAZ9蛋白，并通过Y2H、BiFC、CoIP等进行了验证确认。JAZs是JA介导的植物相应中的负向调控因子，在毛状体和老叶中高表达，在芽尖和嫩叶中表达量低。为确认AaJAZ9是否抑制了AaWRKY9在促进青蒿素积累过程中的转录***功能，通过双荧光素酶报告基因检测实验发现，当AaWRKY9与AaJAZ9共表达时，其转录活性被抑制，而使用MeJA处理后，这种抑制作用被抵消，且AaWRKY9转录活性增强，反向验证实验结果一致。说明JA可以通过降解JAZ9，提高AaWRKY9转录活性，促进青蒿素生物合成。酵母文库文库构建筛选欧易生物。
酵母单杂交结果显示，磷酸盐饥饿响应因子OsPHR1/2/3可以***51个目标启动子中的25个，包括OsRAM1、OsRAD1、OsWRI5A等。OsRAM1、OsRAD1、OsWRI5A自身又可以调控许多菌根共生相关基因的表达（图A）。对丛枝菌根共生响应基因启动子序列预测分析显示，有78个转录因子被富集，87%的菌根共生响应基因受到OsPHR1/2/3的调控，其中42%受到OsPHR1/2/3的直接调控。因此推测OsPHR1/2/3可能是菌根共生调控网络中的一个关键调控枢纽（图A-B）。EMSA和荧光素酶报告实验证实，OsPHR12可以直接结合并***OsRAM1、OsWRI5A、OsPT11、OsAMT3启动子序列（图C-F），并且这种结合依赖于启动子中的P1BS元件（图G）。酵母三杂交系统原理酵母双杂交文库构建。湖南运用酵母文库报价
初筛+复筛提高目标阳性克隆质粒精确度。一对一筛库验证服务，客户无需再次验证。黑龙江运用酵母文库
酵母文库筛选：为了系统地揭示调控丛枝菌根共生的转录因子，研究者以51个水稻基因的启动子为诱饵，利用包含1570个水稻全长转录因子的文库进行了酵母单杂交筛选。这51个基因主要是已报道的参与或调节菌根共生的基因。文库筛选发现了一个由266个转录因子和47个启动子高度连接的网络，称之为"丛枝菌根共生酵母单杂交网络（YAM）"。平均每个启动子可以和4个转录因子互作。266个转录因子分属至少11个转录因子家族。72%（192个）的YAM转录因子在根中存在表达（FPKM>1）。与非定殖根相比，19个YAM转录因子在丛枝菌根***定殖的根中表达上调。黑龙江运用酵母文库
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