酵母双杂交技术,自创建以来被广泛应用于蛋白互作研究领域,在生命科学的基础探秘研究中起着重要作用。然而该技术设计初衷,*是斯坦利先生为了完成申请学校经费的目的。该技术设计巧妙,它的许多优点在设计之初并未显现,反而在这么多年的高频使用和进一步开发利用过程中越发明显。(引用自MarcVidal&StanleyFields的“Theyeasttwo-hybridassay:stillfindingconnectionsafter25years”):(1)尽管酵母杂交技术揭示了蛋白质结合位点的详细信息,但操作简单。只需2个质粒+1个菌株即可完成,且有不同体系方便选择。(2)该技术利用比较好的DNA结合位点,有效的***结构域和友好的报告基因系统,可以放大弱互作的信号。(3)该技术可用于各种物种的蛋白互作检测,具有物种普适性,尤其是人类蛋白。(4)衍生技术具有更***的应用,可扩展到检测蛋白质与DNA、蛋白质与RNA、蛋白质与小分子以及其他组合之间的相互作用,甚至可实现将生理相互作用与表型数据直接关联。当然,做过酵母杂交实验的小伙伴应该都了解,互作结果的判断,往往要等酵母生长好几天才能看出来(当然,小欧认为这在伟大的科研事业过程中算不上啥),互作强弱也是主观判断性较强,存在假阳性。推出两套酵母双杂交文库构建体系MART体系。青海酵母文库做什么
利用酵母双杂交技术进行筛选,结果显示SP8可以与水稻OsMYC3蛋白相互作用,并且二者互作关系通过酵母一对一互作、BiFC、Co-IP、LCI实验得以验证(图A-C)。利用截短的SP8进行酵母一对一互作和Co-IP检测表明,与OsMYC3的结合依赖于SP8的NTP结构域(图D-E);同样,OsMYC3的TAD结构域也是二者互作所必不可少的(图F)。酵母双杂交、BiFC实验表明,OsMYC3可以与OsJAZ相互作用。经茉莉酸处理,野生对照株根的长度明显被抑制、一系列JA生物合成和信号传导相关基因表达量上升,但Osmyc3突变体中抑制程度减轻、JA相关基因表达量上升减少。青海酵母文库做什么酵母单杂筛库酵母文库筛选酵母双杂交筛库步骤。
酵母文库实验:本研究发现了一个硝酸盐响应的 BTB/TAZ 蛋白 MdBT2,它参与调节硝酸盐介导的苹果植株生长。利用酵母双杂交、蛋白质 pull-down、BiFC 实验证实,MdBT2 可以与一个 DELLA 蛋白 MdRGL3a 互作,这种互作是 MdRGL3a 蛋白经由 26S 蛋白酶体途径的泛素化及降解所必需的。此外,异源表达 MdBT2 部分回复了 MdRGL3a 过表达所导致的拟南芥生长抑制。综上表明,MdBT2 可以通过降低 DELLA 蛋白 MdRGL3a 的丰度促进硝酸盐介导的植物生长。实验室培养显示,培养 45 天,苹果幼苗的高度和生物量随硝酸盐浓度的增加而增加(图 A-C)。
酵母文库:近日,上海市农业科学院作物育种栽培研究所储黄伟副研究员、曹黎明研究员为共同通讯作者,在Plant,Cell&Environment杂志(IF:7.228)在线发表了题为“Aconservedclathrin-coatedvesiclecomponent,OsSCYL2,regulatesplantinnateimmunityinrice”的研究论文,报道了水稻中一个被网格蛋白包被囊泡的一个重要组分OsSCYL2调控稻水先天免疫的分子机制。上海市农业科学院作物所硕士研究生姚瑶和周继华助理研究员为该论文的共同***作者。文章中酵母双杂交实验由欧易生物完成。传统酵母杂交技术应用已经30多年,技术已经成熟稳定。
酵母双杂交实验表明,PtMADS11 与 PtDAL1 之间存在直接的相互作用(图 C),并通过 BiFC、GST pull-down 得以证实(图 D-E)。为进一步研究在年龄信号调控中的作用机制,分别构建了过表达PtDAL1和PtMADS11的拟南芥。与对照相比,过表达PtDAL1***提前了拟南芥的营养-生殖时相转换(图A),证实PtDAL1在生殖起始和控制花***建立起到了关键作用。过表达PtMADS11植株在短日照下表现出早开花和花序结构过早终止,表明PtMADS11在开花调节和花序内分生组织命运起到调控作用。在拟南芥中利用年龄调控通路不同节点关键基因突变体进行功能互补实验,结果显示过表达PtDAL1可以恢复由于过表达miR156导致的开花延迟,但ft缺失会导致PtDAL1失活,PtDAL1过表达也不能恢复soc1-1-2突变体的表型,表明PtDAL1依赖或处于FT/SOC1的上游。而过表达PtMADS11可以恢复由过表达miR156或ft缺失导致的开花延迟,表明PtMADS11对开花的调控不依赖于miR156或FT。酵母文库"酵母"和"文库"有什么不同。云南宣传酵母文库
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水稻转录因子文库筛选服务:近几年,中国科学院分子植物科学***创新中心王二涛课题组在植物根瘤共生和菌根共生领域取得三项可以写入教科书级的研究成果。尤其是近两年,已经连续发表了Cell、Nature、MP和PNAS等高水平文章。此外,王二涛研究员也是第二届"科学探索奖"的获得者,肯定他在植物-微生物共生营养交换和菌根共生信号受体发现方面的贡献。2021年10月12日,分子植物***中心王二涛研究团队在Cell上发表题为“磷信号中枢网络调控菌根共生)”的封面论文。***绘制了水稻-丛枝菌根共生的转录调控网络,发现植物直接磷营养吸收途径(根途径)和共生磷营养吸收途径(共生途径)均是受到植物的磷信号网络统一调控,回答了菌根共生领域"自我调节"这一困扰领域的重要科学问题。欧易生物CEO肖云平先生也参与了此项研究。文中水稻转录因子文库筛选服务由欧易生物提供。青海酵母文库做什么
上海欧易生物医学科技有限公司成立于2009-03-10,同时启动了以欧易生物为主的科研服务,科研检测,学术研究,技术咨询产业布局。旗下欧易生物在医药健康行业拥有一定的地位,品牌价值持续增长,有望成为行业中的佼佼者。随着我们的业务不断扩展,从科研服务,科研检测,学术研究,技术咨询等到众多其他领域,已经逐步成长为一个独特,且具有活力与创新的企业。上海欧易生物医学科技有限公司业务范围涉及检验检测服务。(依法须经批准的项目,经相关部门批准后方可开展经营活动,具体经营项目以相关部门批准文件或许可证件为准)一般项目:生物医药产品、生化产品的研发,医药中间体、化工原料及产品(除危险品化学品、监控化学品、易制毒化学品)的研发、销售,仪器仪表的销售,并提供相关技术咨询、技术服务,会务服务,企业管理咨询。等多个环节,在国内医药健康行业拥有综合优势。在科研服务,科研检测,学术研究,技术咨询等领域完成了众多可靠项目。