外泌体直接载yao方式包括皂苷处理法、孵育法、冻融循环法、超声法和挤出法等。皂苷处理法指共培养外泌体、药物和皂苷溶液,然后通过透析膜、色谱柱纯化得到载药外泌体的方法。孵育法指药物和外泌体在适宜的条件下共培养。冻融循环法是经过冷冻、融化过程使外泌体包裹药物。超声法利用超声波使药物进入外泌体中,挤出法利用挤出机实现外泌体载带药物。其中皂苷辅助药物装载方法是直接载yao方式中常用的一种载yao方式。上述方法也存在一些缺点:孵育法操作简单,但载药量低;冻融循环法、超声法和挤出法对仪器的要求高,且可能会破坏外泌体的质膜结构造成药物泄露,终造成载药量不理想。利用成纤维细胞样干细胞来源的外泌体装载靶向KRAS的siRNA,可以抑制胰腺ai的生长。江西组织外泌体载药参考价格
选用来源于生物的天然药物载体细胞外泌体作为DATS的递送载体,具有多种优势:首先,外泌体可以来源于患者自身的细胞,在药物传递过程中减少了免疫原性;其次,外泌体作为一种膜结构载体,与脂质体结构类似,能够通过其表面的膜蛋白与靶细胞膜融合, 将其负载的药物直接运送到受体细胞中,避免了细胞吞噬-溶酶体途径带来的药物降解及细胞毒性等问题;此外,不同来源的外泌体因其供体细胞的差异性而呈现出不同的特性。在使用外泌体装载DATS来研究抗中流转移作用中选用外泌体的供体细胞为肺转移中流细胞B16BL6,研究表明,中流细胞外泌体的产生和释放比正常细胞明显升高,并带有宿主细胞独特的性质。湖南动物组织样本外泌体载药参考价格外泌体有良好的生物相容性、高生物渗透性、低免疫原性、低毒性,可作为药物载体。
Xin等人研究了装载miR-17-92团簇的间充质干细胞外泌体(MSC-Exo)对中风大鼠神经学功能的恢复作用。与脂质体处理组相比,MSC-Exo处理组的神经功能得到明显改善;与MSC-Exo对照组相比,富含miR-17-92团簇的MSC-Exo处理对缺血边界区中神经功能的改善和少突胶质细胞的发生,神经元树突可塑性的增强具有更优的作用。研究表明,MSC-Exo本身具有改善中风大鼠神经损伤的作用,而包载miR-17-92团簇之后该功能得到增强。另有研究发现,在中风大鼠模型中,载有丰富miR-133b的MSC-Exo除具有上述作用外,还能促进星形胶质细胞释放外泌体。在氧和葡萄糖剥夺条件下,富含miR-133b的MSC-Exo预处理星形胶质细胞能够产生外泌体,并且该外泌体有助于脑中风的神经修复。
外泌体载药系统一直是众多研究者关注的焦点。外泌体作为细胞-细胞间交流的“运载工句”,外泌体在正常及疾病下都发挥着不可忽视的功能。梓醇是地黄中主要的环烯醚萜类化合物, 句有抗氧化、抗凋亡和促神经营养因子生成等作用, 并句有保护神经细胞的功能。将负载梓醇的外泌体 (C-Exos) 与人神经母细胞瘤 (SH-SY5Y) 细胞共培养24 h, 与模型组及空白外泌体组相比, SH-SY5Y神经细胞存活率上升了17%, 由此证明梓醇能通过外泌体途径将有效的成分运送至神经细胞当中, 并起到神经保护的作用。MHS来源外泌体装载连翘苷(phil)对外泌体的特异蛋白(CD63,Alix)的表达无影响。
外泌体的提取方法在外泌体载药系统中应用——聚合物沉淀法。用于分离病毒和其他的生物大分子,已有50多年历史,近几年,将其作为一种新的方法来分离外泌体。目前,市场已经有应用聚乙二醇(polyeth yleneglycol,PEG)溶液提取外泌体的试剂盒,常见的是SystemBiosciences公司的ExoQuick®和ExoQuick-TC®kits,该试剂盒操作简单不需要特殊的仪器,但是价格昂贵。提取外泌体的试剂盒主要成分是PEG8000(30%~50%),将试剂盒与体液或细胞培养液4℃孵育过夜,之后再低速离心。即可进行外泌体的提取,此方法实行起来较为简单。树突细胞分泌的外泌体表面会表达出CD9,有利于加强外泌体与靶细胞的融合,提高外泌体对药物运输的效率。辽宁组织外泌体载药大概费用
在小鼠模型中利用外泌体装载姜黄素和过氧化氢酶可证明其在神经保护方面的作用。江西组织外泌体载药参考价格
有实验将an-timiR-9载入到间充质干细胞中,使其分泌的外泌体包载有an-timiR-9。通过体外细胞传递实验发现,间充质干细胞可以通过外泌体递送an-timiR-9到耐药性多形性胶质细胞瘤(GBM)中,致使耐药性细胞株中的MDRI基因下调,P-糖蛋白表达量减少,从而增加耐药性细胞株对替莫唑胺的化学敏感性,有效地抑制耐药性多形性胶质细胞瘤的增殖。研究人员采用外泌体对GBM进行zhiliao不只停留在细胞实验上,相关的体内研究也已有报道。研究者将高表达miR-146b间充质干细胞源性的外泌体用于zhiliaoGBM的移植瘤模型中,结果表明载有miR-146b的外泌体能有效地抑制中流的生长。江西组织外泌体载药参考价格
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