外泌体基本参数
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  • 研载生物
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  • YZ001
外泌体企业商机

外泌体(exosome)是多种活细胞经过“内吞–融合–外排”等一系列过程主动向胞外分泌的直径为30~150 nm的双层膜结构细胞外囊泡(extracellular vesicles, EVs), 广fan存在于血液、尿液和唾液等生物体液中, 并通常作为细胞间胞质蛋白、核酸和脂质的转移载体发挥运输调控作用, 被认为是细胞间通讯的核xin部分。外泌体于1983年在HARDING等和PAN等研究羊网织红细胞分化的过程中被发现, 并于1996年由RAPOSO等证实能够作为一种细胞间通讯结构在免疫系统中发挥作用后得到了广fan关注。近年来, 随着外泌体在中流、心血管和感ran性疾病等多种疾病形成中的生物学作用和功能被逐渐揭示, 尤其是2015年MELO等发现, 外泌体Glypican-1蛋白可有效区分慢性胰腺炎与胰腺ai以来, 外泌体作为疾病诊断、预后预测标志物以及药物靶向zhiliao载体的转化医学应用也得到了迅速的推进。前列腺ai患者的血浆和尿液中的外泌体含有更多的前列腺特异抗原(PSA)。辽宁植物组织外泌体NTA

外泌体介导中流耐药性:中流细胞来源的外泌体中某些miRNAs和non-codingRNAs(lncRNA)的变化在中流化疗抗药性的发生中起重要作用。Qu等研究发现lncRNA可以通过竞争性结合miR-34/miR-449,促进晚期肾细胞ai细胞中的跨膜受体酪氨酸激酶anexelekto(AXL)和tyrosine[1]proteinkinaseMet(c-MET)表达,引发舒尼替尼耐药。而外泌体能够将这一lncRNA运输至舒尼替尼敏感的ai细胞,从而传播舒尼替尼的抗性。外泌体中的miR21能够抑制卵巢ai细胞凋亡,并通过结合肌动蛋白丝相关蛋白凋亡酶激huo因子(apoptoticproteaseactivatingfactor1,APAF1)使得卵巢ai细胞产生对紫杉醇的抗药性。江苏水果外泌体外泌体参与胚胎与子宫内膜间的信息传递,可能对胚胎发育有促进作用。

Vlassov等人发表的一篇外泌体的提取方法及组成的专利文献中介绍,通过终浓度为8%的PEG6000与生物体液共孵育14h后,10000xg离心1h,可将直径在30-150nm之间,且包含丰富RNA的外泌体沉淀下来。因此采用终浓度为8%的PEG6000沉淀血清中的外泌体,为了进一步纯化胎盘相关外泌体,将获得的包含外泌体的沉淀用PBS重新悬浮后,加入非线性蔗糖密度梯度层,10000xg超速离心5h,将分层液采用PEG6000进行2次沉淀。经过多次实验反复验证,确定同时表达外泌体标志蛋白分子及胎盘特异性蛋白分子的胎盘来源外泌体所在密度层。

通过对28例前列腺ai症患者和19例正常人尿液外泌体中的miRNA进行深度测序分析,发现两种miRNA(miR-196a-5p和miR-501-3p)在前列腺ai患者组明显下调,表明尿液外泌体中的特异性miRNA可能作为前列腺ai的新型生物标志物。Khurana等[100]将研究对象由miRNAs扩大至多种类型RNA,通过对慢性肾病患者尿液外泌体中各类RNA进行系统研究,在慢性肾病患者组中识别出30种明显差异的lncRNAs,表明尿液外泌体中的lncRNAs具有作为慢性肾病早期诊断标志物的潜力。Skotland等的研究则表明尿液外泌体中的脂质能够作为前列腺ai的新型标志物,3种脂质标志物结合使用能够有效提高对前列腺ai的诊断灵敏度(93%)和特异性(100%)。透射电子显微镜分辨率可达0.1-0.2 nm,可将被观察物放大数百万倍,是外泌体双层囊膜结构观测的经典方法。

Pascucci等将包含有紫杉醇的间充质细胞来源外泌体与胰腺ai细胞共培养,发现装载紫杉醇的间充质细胞外泌体具有很强的抗中流增殖效果。Tian等为降低免疫原性与毒性,采用小鼠未成熟树突状细胞所产生外泌体作为药物载体。同时为实现外泌体运输的靶向性,使细胞表达能够识别乳腺ai细胞的外泌体膜蛋白Lamp2b(lysosomeasso[1]ciatedmembraneglycoprotein2b,溶酶体相关膜蛋白2)。并采用电穿孔的方法,在纯化所得的小鼠未成熟树突状细胞外泌体中载入阿霉素。结果表明该外泌体能够特异性的将阿霉素传递给中流组织,抑制中流生长且无明显毒性。示踪病毒使用CD81作为生物标记,通过将CD81与荧光蛋白偶联,带荧光的膜蛋白会在表达至外泌体膜上。江西植物根组织外泌体鉴定

外泌体在化疗药物的促转移过程中具有重要的作用。辽宁植物组织外泌体NTA

姜黄素的临床应用也存在着问题,比如其水溶性差,在体内代谢快速以及易被快速清chu。利用鼠淋巴瘤细胞系(EL-4)的外泌体作为姜黄素的载体,可以提高姜黄素的溶解性、稳定性以及生物利用度,将姜黄素和载有姜黄素的外泌体腹膜内注射到脂多糖(LPS)诱发的败血性休克的小鼠模型中,结果显示经外泌体运载的姜黄素可促进小鼠肺部抑制免疫反应的CD11b+Gr-1+细胞的凋亡而表现出抗yan症的效果,而单纯姜黄素的注射不能起到促进CD11b+Gr-1+细胞的凋亡效果(与注射PBS的对照组类似)。研究者还进行了目前常用的脂质体负载姜黄素,与外泌体负载姜黄素对比。脂质体和外泌体均具备作为姜黄素的载体的能力,但外泌体由于其更易被Gr-1+细胞吞噬,从而可以起到更好的zhiliao效果。辽宁植物组织外泌体NTA

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