自噬基本参数
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自噬企业商机

选择性自噬是真核生物体内清理蛋白、受损细胞器和外源微生物的基础生理过程。而蛋白的翻译后修饰,特别是泛素化修饰能够作为选择性自噬中的底物识别的重要信号。崔隽教授课题组发现选择性自噬参与调控非经典NF-kB信号通路的重要过程。选择性自噬中的货物受体p62通过识别p52/p100的N端上的K63泛素化链进而促使p52/p100发生自噬降解,阻止非经典NF-kB信号通路。有趣的是,已有报道认为p100C端的K48泛素化链是蛋白酶体降解信号。K63泛素化链修饰并非大家所熟知的蛋白降解信号,但却能被自噬货物受体p62识别并介导蛋白降解,进而调控底物功能,影响生理与疾病进程。相同的细胞在不同的外部因素作用时,自噬的作用可能不同。山柰酚和雷公藤红素可通过诱导自噬途径保护鱼藤酮诱导的SH-SY5Y神经细胞。大连双荧光自噬

在用GFP-LC3B慢病毒ganran细胞后,在非自噬的情况下,荧光显微镜下GFP-LC3B以弥散的形式存在于细胞质中;而在自噬的情况下,荧光显微镜下GFP-LC3B则聚集在自噬体膜上,以斑点的形式表现出来(LC3B dots or punctae)。RFP-GFP-LC3B是研载生物研发的重组慢病毒,ganran后能够在靶细胞中有效表达红色荧光蛋白(RFP)、绿色荧光蛋白(GFP)和LC3B的融合蛋白,呈现明亮的红色和绿色荧光,可以用于细胞自噬的检测。自噬小体在与溶酶体融合过程中,溶酶体内的酸性环境会导致GFP荧光淬灭,这为追踪GFP-LC3B的细胞定位增加了难度。浙江电镜观察自噬自噬在肝病发生中的作用及机制复杂,受到诸多因素调控,但其重要性毋庸置疑,仍需更多的研究探索其机制。

人参皂苷Rb1代谢产物K通过产生ROS,激huoJNK,诱导HCT-116细胞自噬和凋亡。另外,白藜芦醇通过诱导ROS激huo的自噬途径诱导HT-29细胞凋亡,其亦可诱导HCT116细胞凋亡,通过增加LC3-II蛋白的量诱导自噬,但联合自噬抑制剂可增强白藜芦醇诱导的HCT116细胞凋亡。前列腺ai是男性很常见的恶性中流之一。中药水鬼焦的化学成分之一水鬼焦碱可诱导DU145和LNCaP细胞凋亡,同时诱导雄ji素非依赖的前列腺aiDU145细胞发生自噬性死亡,而LNCaP细胞中没有观察到自噬相关指标,提示水鬼碱诱导的DU145细胞自噬可能具有雄ji素依赖性。另外,胡椒中主要的活性成分之一胡椒碱给药24 h后通过增加LC3B-II蛋白的量和阳性荧光点,诱导LNCaP和PC-3细胞自噬,抑制细胞增殖,使细胞阻滞在G0/G1期。

自噬体形成依赖于一系列ATG蛋白在蛋白泛素化过程中的共价结合。ATG5和ATG12被誉为自噬的“中心”,为自噬体形成所必需,它们被发现还参与了细胞凋亡的调控。ATG5可以被Caplains剪切,造成ATG5N端片段以一种未知的机制转位到线粒体,与抗凋亡蛋白Bcl-xL结合,促发线粒体细胞色素C释放,诱导凋亡。研究发现在一系列不同凋亡刺激下,ATG12不但是caspase唤醒所必需的,它还可通过结合方式中和Bcl-2、Mcl-1的抗凋亡能力。进一步实验则发现,ATG12是因为具备和Bcl-2、Mcl-1结合的BH3样结构域而具有促凋亡功能。自噬参与了PD的发病过程,过量的α-syn可抑制自噬。

β-榄香烯是从香茅草中提取的有效抗ai成分,属于倍半萜烯类成分。研究发现β-榄香烯可通过抑制PI3K/Akt/mTOR/p70S6K1信号通路,增加LC3-II和Atg5-Atg12蛋白的量,诱导人非小细胞性肺aiNSCLCA549细胞发生自噬,并且可诱导细胞凋亡。研究发现,姜黄素抑制肺腺aiA549细胞增殖,增加LC3的免疫荧光点,上调LC3-II/I的比值,增加自噬相关蛋白SQSTM1的量,自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)可抑制姜黄素诱导A549细胞增殖的作用;应用AMPK抑制剂和干扰AMPKα1后,姜黄素对蛋白LC3-II/I和SQSTM1的作用被削弱,提示姜黄素诱导肺腺aiA549细胞自噬,可能与激huoAMPK通路相关。明确自噬的具体机制可有益于新疫苗的研发,可为肝病预防提供潜在的靶点。浙江电镜观察自噬

自噬在细胞新陈代谢、结构重建、生长发育中起着重要作用。大连双荧光自噬

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