影响外泌体载药效率的因素有许多：1外泌体的分离与纯化：目前，准确和标准的外泌体纯化方法较少，使用不同方法获得的外泌体其收率与纯度差别较大，需要根据研究目的不同选择适当的分离方法，超速离心法是外泌体纯化常用的手段，低速离心和高速离心交替进行的方法通常用于从大量样品中分离外泌体，但获得的外泌体纯度不高。外泌体的收率过低与低纯度会影响其对药物包载效率，难以实现大批量生产。2包载方法：根据包载药物的分子极性、相对分子质量及自身所带电荷等性质选择不同的包载方法。不同包载方法对于同一种药物的包载效率可能完全不同。基于HEK293T细胞来源外泌体的载药系统，增加了外泌体在中流内的弥散、渗透性。山东外泌体载药hplc
外泌体的脂质双分子膜可以保护其在血液循环中不被降解,但是这种膜结构以及其内含各种丰富的物质,使得外泌体载药变得困难。外泌体只有保证膜结构的完整性,才能不引起免疫反应,不被MPS吞噬。目前,将药物载入外泌体的方法主要有两种:(1)前转载,在分离外泌体之前,将药物与母代细胞共培养和对母代细胞进行转染,可以让母代细胞分泌含有药物的外泌体; 主要是用转染剂将“货物”转染进入亲代细胞(或者将“货物与亲代细胞孵育”),然后收集培养基,获得载有“货物”的外泌体的过程。该方法的主要问题是合适有效的转染试剂很少,且转染试剂无法完全去除,导致转染效率低,无法排除转染试剂对实验的影响。(2)后转载,分离出外泌体之后,将药物载入外泌体。安徽动物细胞样本外泌体载药实验价格比较许多抗ai药物、基因药物及抗yan药物均可载入外泌体中。
外泌体递送系统的靶向给yao方式分为被动靶向和主动靶向两种。被动靶向给药，多采用局部给yao方式实现，包括局部注射、鼻腔给药、生物材料局部植入等。主动靶向给药的相关研究很少见。jin有YUAN等人利用血一脑屏障在病理和生理条件下的特性，实现载带脑源性神经营养因子的外泌体递送系统在全身给药条件下脑部主动靶向。因被动靶向的靶向效率明显低于主动靶向，且临床实际更需要的是可以实现精zhun靶向给药、减少非靶组织和qi官伤害的主动靶向给药，故载带外源性蛋白质外泌体主动靶向给药将是研究的主要方向。
中流细胞通常过表达正常细胞中不存在的表面特异性受体，这些受体可能是其外泌体靶向中流细胞的基础。利用中流细胞外泌体对其表面特异性受体的识别，有望将zhiliao药物靶向传递到病变细胞，与普通细胞分泌的外泌体相比，可达到更高的靶向效率。临床上常见的肺ai病理学类型是非小细胞肺ai，其中A549细胞呈鳞状，含有高度不饱和脂肪酸，能够有效维持细胞膜完整性，可较好地模拟中流生长，因此被广fan用于体外研究。以A549中流细胞外泌体为载体，采用电穿孔法包载多烯紫杉醇，构建一种句有肺ai主动靶向性的递药系统，并采用响应面法优化了其载药工艺。外泌体内源性载yao方式即先将药物载入供体细胞中，当药物分选进入外泌体并释放外泌体后分离纯化而获。
mＲNA也可以作为“货物”被外泌体运输。利用多泡体(含外泌体)负载mＲNA/蛋白进行中流zhiliao的研究。研究者们利用脂质体2000或病毒载体对HEK-293细胞进行转染，使其分泌的多泡体含有mＲNA/蛋白(CD-UPＲTEGFP，其中CD:胞嘧啶脱氨酶;UPＲT:尿嘧啶磷酸核糖转移酶;EGFP:增强型绿色荧光蛋白)。将此多泡体注射至小鼠的神经鞘瘤处，并辅助注射5氟尿嘧啶(5-FC)，神经鞘瘤的增长被明显抑制。这主要是由于CD和UPＲT可以将5-FC转化为5氟尿嘧啶脱氧核苷酸(5-FdUMP)，而后者又是胸甘酸合成酶的抑制剂，可以抑制脱氧胸甘酸的合成，从而起到抑制DNA的合成以及促进中流细胞凋亡的效果。Saydam等的研究表明多泡体/外泌体不jin可以有效输送mＲNA/蛋白质，并且句有与其他抗ai药物联合zhiliao中流的潜力。负载姜黄素的外泌体能促进抗精神类药物作用下的细胞胆固醇外流, 减少因药物不良反应造成的细胞内脂质沉积。安徽动物细胞样本外泌体载药实验价格比较
外泌体载药中外泌体提取的方法可联合使用各种方法,从而得到高纯度和高产量的外泌体。山东外泌体载药hplc
外泌体载yao方法已在多种研究中得到应用，但各自有一定的局限性：共孵育依赖药物跨膜运输而包载；超声法和电穿孔法较为常用，但都破坏了外泌体的膜结构而使药物进入外泌体，与参数有较大关系；挤压法依赖仪器的机械力，但机械力是否对外泌体产生影响未知；反复冻融法载药能力较差；对外泌体修饰可以达到提高细胞摄取或者靶向而改善药物的疗效；药物混合物中加入皂苷会有体内溶血的潜在风险。目前研究者应用较多的方法是共孵育结合超声、超声、电穿孔、修饰外泌体。山东外泌体载药hplc
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