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紫蓝色结节、瘘孔等,分泌物量、性质、颜色、气味等,阴道有无横隔、纵隔、斜隔、狭窄、闭锁、双阴道等畸形,宫颈大小、形状、色泽,有无糜烂、旧裂、赘生物、紫蓝色结节及接触性出血等,宫颈管分泌物性状,宫颈阴道段长度及双宫颈畸形等。盆腔检查检查前先排便,排便困难者可先导尿及服用缓泻剂,有阴道出血者需先消毒外阴并戴无菌手套;月经期一般不做盆腔及阴道检查;未婚者一般*作肛门指诊检查。
(1)双合诊:即阴道腹部双合诊。检查者戴无菌手套,以示指、中指蘸润滑液后顺阴道后壁轻轻插入,检查阴道有无肿块、狭窄、瘢痕、弹性等,子宫颈高度、大小、质地、硬度,有无举痛,后穹窿是否饱满,软硬度,有无弹性,结节、肿块、浸润、触痛。然后将另1手置于下腹壁与阴道内手指配合检查盆腔生殖器先作宫体触诊,注意子宫体大小、位置、形状、硬度、活动度及有无压痛。将内诊指放在一侧穹窿,双手检查附件与宫旁组织有无增厚、压痛、包块,如有肿块需查清大小、活动度、质地、形状,有无触痛以及与子宫有无粘连,有无向周围组织脏器浸润等,先查不痛的一侧,然后再查对侧。
(2)三合诊:又称阴道直肠腹部三合诊。用示指插入阴道、中指插入肛门内触诊。 贵州口腔口腔拭子源头厂家这款口腔拭子主要用于提取采集人体口腔黏膜DNA用的,采集和释放都比较好。
本发明的特征在于:应用本发明的血液基因组DNA提取方法在10分钟内提取血液基因组可用于荧光PCR扩增检测,主要步骤如下。(1)将**管颠倒混匀后,吸取100μL血液或者吸取100μL口腔拭子样本保存液至,加入200μL的核酸释放剂,涡旋混匀,然后5000g离心30s,弃上清,获得细胞沉淀。(2)将步骤(1)中得到的血液细胞沉淀中再加入200μL核酸释放剂,涡旋振荡1min,至沉淀完全散开,然后5000g离心30s,弃上清。(口腔拭子样本则无需进行此步骤)。(3)向步骤(2)所获得的沉淀中加入50μL核酸释放剂,涡旋振荡1~2min;室温放置5min,12000g离心30s,取上清液即为提取的基因组DNA;所述的核酸释放剂组成为20mM~80mM的氢氧化钠溶液、~、~、~、~***钠、~3%甲酰胺;所述荧光PCR反应液组成为ROX、TaqMan探针、引物、dNTP、dUTP、UDG、BSA、聚合酶及缓冲液。附图说明图1为实例1检测的8份血液样本平行实验的荧光扩增曲线图。图2~图5为实施例1提供的四份血液样本的三次平行实验的荧光扩增曲线图。图6为实施例2对比实例1提供的对8份血液样本平行实验的荧光扩增曲线图。具体实施方式为了使本领域技术领域人员更好地理解本申请中的技术方案。
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口腔拭子(口腔脱落细胞)取样是简单、无痛、无创的DNA标本采集方法。贵州口腔口腔拭子源头厂家
加入20μteinaseK溶液,混匀。加入200μL缓冲液GB,充分颠倒混匀,在56℃放置14min(期间颠倒混合样品数次),溶液应变清亮,若未完全变清亮,延长裂解时间至完全变清亮。加人200μL无水乙醇,充分振荡混匀10s,此时可能会出现絮状沉淀。将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个吸附柱CB3中(吸附柱放入收集管中),12,000rpm离心30s,倒掉废液,将吸附柱CB3放回收集管中。向吸附柱中加入500μLGD(已加入无水乙醇),12,000rpm离心30s,弃废液,将吸附柱CB3放回收集管中。向吸附柱中加入600μLPW(已加入无水乙醇),12,000rpm离心30s,弃废液,将吸附柱CB3放回收集管中。12,000rpm(~13,400×g)离心2min。将吸附柱放置新的,以彻底晾干吸附柱中残余的漂洗液。向吸附柱中悬空滴加50~200μL洗脱缓冲液,室温放置2~5分钟,12,000rpm(~13,400×g)离心2min,将溶液收集到离心管中,测定浓度及纯度后,取3μL,加入到配制好的荧光PCR反应液,于ABI7500荧光PCR仪中进行扩增。用本发明和对照产品对8份样本同时进行荧光PCR扩增。结果如图6,本发明所有反应孔背景信号好、Ct值都在21~25之间,荧光扩增曲线呈典型的S型。贵州口腔口腔拭子源头厂家
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