Genvis测试去除唾液酸以揭示电荷变体:唾液酸是带负电荷的糖残基,存在于 N- 和 O-连接的聚糖上。唾液酸的固有电荷可能会使分析工作流程复杂化,从而掩盖其他重要的修饰。Microspin 色谱柱可用于 2 x 0.5 mg、5 x 0.5 mg 或 10 x 0.5 mg 糖蛋白的去唾液酸化。1. 易于使用的离心柱;2. 提高酶与底物的比例,提高消化效率;3. 样品中不含酶。因此,唾液酸的去除有助于研究蛋白质中的潜在变体。该应用展示了一种快速简便的样品制备方法,可在电荷异构体分析之前去除所有唾液酸。使用OpeRATOR对胞生成素(EPO)进行O-糖位点特异性消化:确定中级水平的 O-糖基化位点。天津冻干粉形式PNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis
与PNGase F类似,Genvois的OmniGLYZOR 含有固定化酶的混合物,可快速有效地去除抗体、融合蛋白和其他糖基化蛋白上的 N 和简单的粘蛋白型 O-聚糖。聚糖的去除被用于减少异质性,以促进蛋白质的分析,例如质谱法。去糖基化也可用于研究聚糖的功能作用。N-和粘蛋白型O-连接聚糖的快速高效去糖基化;即用型离心柱形式 - 无酶干扰分析;与LC-MS兼容。与PNGase F类似,Genvois的与PNGase F类似,Genvois的OmniGLYZOR 含有去除 N-糖和最常见的粘蛋白型 O-糖所需的酶,即单唾液酸和二唾液酸he心 1 和 Tn 抗原 (α-GalNAc)。OmniGLYZOR Microspin 小柱中包含以下组分:PNGase F;O-糖苷酶。PNGaseF去糖基化酶瑞典GenovisSialEXO在天然条件下水解糖蛋白,在pH值范围为6.5至9时显示出活性。
Genvois的SialEXO产品是唾液酸酶,用于N-和O-糖基化蛋白的有效去唾液酸化。SialEXO冻干由两种唾液酸酶组成,每种唾液酸酶都具有独特的活性,并且它们同时起作用。一种酶对α2-3、α2-6和α2-8连接的唾液酸具有很好的活性,另一种酶(SialEXO 2-3)通过α2-3-键快速水解唾液酸。SialEXO冻干可在2小时内去除天然蛋白质上的所有唾液酸。SialEXO在天然条件下水解糖蛋白,在pH值范围为6.5至9时显示出活性。这些酶来源于Akkermansia muciniphila,并在大肠杆菌中表达。两种酶都含有 His 标签,酶的分子量为 43 kDa 和 66 kDa。
用于糖蛋白去唾液酸化的冻干酶混合物。Genovis的SialEXO 冻干剂以冻干粉的形式提供,装在 2000 个单位的小瓶中,用于 2 mg 糖蛋白的去唾液酸化。1. 用于方法开发的灵活格式;2. 可以结合酶以提高效率;3. 适用于自动化工作流程;4. 即用型 - 只需加水即可。用于水解ɑ2-3-连接唾液酸的冻干酶。 Genovis的SialEXO 2-3冻干剂以冻干粉末的形式提供,装在500个单位的小瓶中,用于0.5mg糖蛋白的去唾液酸化。 与唾液酸酶混合物 SialEXO 相比,SialEXO 2-3 是一种 α2-3 特异性唾液酸酶,允许对 α2-3 连接的唾液酸进行靶向分析。O-和N-糖基化蛋白的高效α2-3去唾液酸化可以在1小时内实现。因此,其水解需要底物蛋白以与酶活性相容的方式变性。
为了研究 OglyZOR 对天然糖蛋白的活性,将该酶与依那西普、TNFR 和阿巴西普在 37°C 下有或没有 SialEXO 孵育 1 小时。当唾液酸被去除时,OglyZOR酶有效地水解了所有三种底物中的O-聚糖。Genovis的OglyZOR 酶可有效水解天然糖蛋白中的he心 1 二糖 (Gal-β1,3-GalNAc)。这使得这些酶适合在LC-MS分析之前制备样品,以鉴定其他PTM或确认氨基酸序列O-糖基化生物制药的全去糖基化:O-糖基化生物制药(如依那西普)很难表征。为了能够通过质谱法测定完整质量数,我们进行了酶促总去糖基化。N-聚糖被Genovis的PNGase F裂解,而O-聚糖可以与OglyZOR和SialEXO一起去除。。FucoseEXO固定在离心柱中,可快速方便地处理高达0.5mg的糖蛋白,然后在离心步骤中轻松收集消化的糖蛋白。安徽固定化小柱形式PNGaseF去糖基化酶疾病机理研究
ImpaRATOR处理的依那西普显示出与相应的去唾液酸化OpeRATOR处理样品略有不同的消化模式。天津冻干粉形式PNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis
Genovis 是一家瑞典生物技术公司,自2010年起,为生物制药公司提供SmartEnzymes 工具酶。Genovis提供一系列独特、快速且易于使用的酶学工具,主要用于生物制药行业和学术界。 我们在全球范围内提供创新的智能酶SmartEnzymes™,用于单克隆抗体、ADC、生物仿制药和双特异性生物药物的开发、生产和质量控制。您可以在我们的网站上“Application页面”获得更多应用信息,如果您有兴趣,可以和我们一起做一个“SmartStories”,也可以联系我们。 天津冻干粉形式PNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis
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