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酵母文库基本参数
  • 品牌
  • 欧易生物
  • 公司名称
  • 上海欧易生物医学科技有限公司
  • 行业类型
  • 生物测序服务
  • 安全质量检测类型
  • 基因测序
  • 服务内容
  • 酵母文库
  • 所在地
  • 北京,上海,广州,深圳,成都,杭州,天津,南京,武汉
  • 检测类型
  • 基因测序
酵母文库企业商机

欧易酵母文库助力小麦根研究,本研究克隆了小麦的 ERFs 转录因子家族 1 个成员 TaSRL1,它可以调控生长素生物合成、转运和信号转到相关基因的表达,并与生长素转运基因 TaPIN2 启动子序列结合促进其表达,进而抑制根的生长。此外,TaSRL1 可以与 JAZ 蛋白 TaTIFY9 相互作用,破坏 TaSRL1 对 TaPIN2 表达的促进作用。因此 TaSRL1 可整合根生长过程中生长素和 JA 信号,负调控根的伸长。TaSRL1-4A 标记对小麦育种过程中根系、株形和产量的改良具有重要研究意义。为客户提供专业的技术服务专业医学课题标书论文一站式酵母双杂交。青海酵母文库应用

利用酵母文库进行双杂交筛选,结果显示 MdBT2 可以与 MdRGL3a 结合。MdRGL3a 编码 GA 信号阻遏物 DELLA 蛋白,主要分布于细胞核中。MdRGL3a 对于 GA 处理非常敏感,可以引起其发生降解,PAC 处理可以提高其稳定性。进一步的酵母一对一杂交验证实验表明,两者的结合依赖于 MdBT2 的 BTB 和 BACK 结构域、MdRGL3a 的 LHRI 和 SAW motif(图 A-B)。并通过 GST pull-down、BiFC 实验也证实了 MdBT2与 MdRGL3a 的结合(图 C-D)。细胞外降解实验显示,与对照相比,MdRGL3a 与过表达 MdBT2 的愈伤组织的总蛋白共同孵育,会导致 MdRGL3a 的降解加快;而与抑制 MdBT2 表达的愈伤组织的总蛋白共同孵育,会导致 MdRGL3a 的降解减缓(图 A)。并且蛋白酶体抑制剂 MG132 可以***抑制 MdRGL3a 的降解(图 B)。改变 MdRGL3a 表达量并不影响 MdBT2 的降解。以上结果表明,MdRGL3a 可能通过 26S 蛋白酶体途径发生降解,而 MdBT2 可以抑制 MdRGL3a 的降解。青海酵母文库应用酵母及其应用ppt课件 酵母及其应用 。

酵母双杂交技术,自创建以来被广泛应用于蛋白互作研究领域,在生命科学的基础探秘研究中起着重要作用。然而该技术设计初衷,*是斯坦利先生为了完成申请学校经费的目的。该技术设计巧妙,它的许多优点在设计之初并未显现,反而在这么多年的高频使用和进一步开发利用过程中越发明显。(引用自MarcVidal&StanleyFields的“Theyeasttwo-hybridassay:stillfindingconnectionsafter25years”):(1)尽管酵母杂交技术揭示了蛋白质结合位点的详细信息,但操作简单。只需2个质粒+1个菌株即可完成,且有不同体系方便选择。(2)该技术利用比较好的DNA结合位点,有效的***结构域和友好的报告基因系统,可以放大弱互作的信号。(3)该技术可用于各种物种的蛋白互作检测,具有物种普适性,尤其是人类蛋白。(4)衍生技术具有更***的应用,可扩展到检测蛋白质与DNA、蛋白质与RNA、蛋白质与小分子以及其他组合之间的相互作用,甚至可实现将生理相互作用与表型数据直接关联。当然,做过酵母杂交实验的小伙伴应该都了解,互作结果的判断,往往要等酵母生长好几天才能看出来(当然,小欧认为这在伟大的科研事业过程中算不上啥),互作强弱也是主观判断性较强,存在假阳性。

进行了酵母双杂交文库的筛选,结果显示钙依赖的种子特异性蛋白激酶SPK可以与OsNF-YB9相互作用,分段截取互作验证显示OsNF-YB9的N端是互作所必须的(图a-b),并通过双荧光分子互补实验、BiFC、体外GST-pulldown实验得以证实(图c-e)。亚细胞定位显示SPK主要在细胞质中表达,OsNF-YB9在细胞质和细胞核中都有表达,共表达SPK和OsNF-YB9***促进了OsNF-YB9的入核(图f),表明SPK和OsNF-YB9的相互作用可能促进了OsNF-YB9从细胞质向细胞核的运输。RT-PCR显示SPK在发育中的种子中高表达,在5DAF开始***,并在10-30DAF维持高表达水平(图a-b)。spk敲除突变体种子中垩白率的增加(图c-e),但粒形和粒重与野生型没有***差别。文库质粒与酵母文库载体重组。

酵母双杂交文库:植物从营养生长到生殖生长时相的不可逆转变,是植物生命周期中的一个关键阶段,是植物生存和繁殖至为关键的重要事件。在开始繁殖之前,许多多年生木本植物经历了一个相当漫长的幼年时期。与模式植物(如拟南芥)相比,针叶树通常具有非常长的生命周期。尽管在模式植物开花时间控制研究上取得相当大的进展,但对多年生树木,特别是针叶树年龄信号的调控机制仍知之甚少。因此,深入研究林木年龄信号对生殖发育过程的影响具有重要的理论和实践意义。进口试剂高服务质量市场份额大酵母文库。青海酵母文库应用

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通过酵母双杂交进行筛选,结果显示 SWC6 可以在蓝光下与 CRY1 相互作用(图 A-C)。同样,酵母双杂交实验显示 CRY2 也可以在蓝光下与 SWC6 相互作用(图 D)。并通过 pull-down、split-LUC、semi-in vivo pull-down、Co-IP 实验(图 E-L)证实 CRY1、CRY2 与 SWC6 的结合是蓝光依赖性的。SWC6 是真核生物中已报道的 SWR1 复合物亚基,负责催化 H2A.Z 在染色质上的替换。已报道 SWR1 复合物中 SWC6 可以与 ARP6 亚基结合。Pull-down、split-LUC、semi-in vivo pull-down、Co-IP 实验(图 A-H)显示,CRY1、CRY2 可以蓝光依赖性与 ARP6 结合。青海酵母文库应用

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