于是,每个反应会产生许多不同长度的DN**段,并在模版的任一核苷酸位置上由其中一种双脱氧核糖核苷酸终止链的延伸。反应混合物可以通过手动灌胶或自动灌胶到用毛细管进入测序机器,再根据DNA分子大小不同用电泳分离DNA。当DNA流过凝胶后,DNA序列可以通过双脱氧核糖核苷酸上发出的荧光来进行分析。当今的Sanger测序仪使用的是毛细管自动上样的凝胶电泳,一般可以同时分析8-96个系列反应。二代测序系统在十年前就是因其可同时进行大量平行测序反应而广为人知。这些系统可以同时分析百万甚至上亿个序列反应。虽然不同的机器生产时会在技术细节上有许多不同,但他们都有以下几个共同点:1,文库建立:所有二代测序的平台都需要一个基因文库,这个基因文库包含通过引申或者连接自定义的接头序列。2,测序仪器:每个文库片段在共阶吸附的DNA连接因子的作用下,以文库适配序列为模版,在固体表面上进行扩增。这步扩增会产生许多DNA蔟,每个来源于一个文库片段,每个基因蔟都会像**的测序反应一样起作用。3,数据输出:每个仪器都会在测序结束后给出原始数据。这个原始数据时每个基因蔟中形成的DNA序列的**。 MLH1抗体试剂 苏苏械备20180519号.天津专业迈杰转化医学NGS平台经验丰富
于是,每个反应会产生许多不同长度的DN**段,并在模版的任一核苷酸位置上由其中一种双脱氧核糖核苷酸终止链的延伸。反应混合物可以通过手动灌胶或自动灌胶到用毛细管进入测序机器,再根据DNA分子大小不同用电泳分离DNA。当DNA流过凝胶后,DNA序列可以通过双脱氧核糖核苷酸上发出的荧光来进行分析。当今的Sanger测序仪使用的是毛细管自动上样的凝胶电泳,一般可以同时分析8-96个系列反应。二代测序系统在十年前就是因其可同时进行大量平行测序反应而广为人知。这些系统可以同时分析百万甚至上亿个序列反应。虽然不同的机器生产时会在技术细节上有许多不同,但他们都有以下几个共同点:1,文库建立:所有二代测序的平台都需要一个基因文库,这个基因文库包含通过引申或者连接自定义的接头序列。2,测序仪器:每个文库片段在共阶吸附的DNA连接因子的作用下,以文库适配序列为模版,在固体表面上进行扩增。这步扩增会产生许多DNA蔟,每个来源于一个文库片段,每个基因蔟都会像**的测序反应一样起作用。3,数据输出:每个仪器都会在测序结束后给出原始数据。这个原始数据时每个基因蔟中形成的DNA序列的**。作者:丽舍咨询链接:源:知乎著作权归作者所有。 天津专业迈杰转化医学NGS平台经验丰富迈杰转化医学围绕生物标志物研究、伴随诊断开发,建立了完善的核酸组学、蛋白组学、细胞组学技术平台。
二代测序是一个强大的功能平台,它可以同时给数以万计的DNA分子进行测序。由于这种可以多个样本同时测序的能力,在个性化医疗、遗传疾病和临床诊断等方面,二代测序也就是高通量测序开创了**性的领域。早在1900年代就发明的Sanger测序法,成为了DNA测序的黄金法则,即便到了***它仍被***用来进行常规测序和NGS数据的验证。它利用高保真DNA聚合酶生成与单链DNA模版互补的拷贝。在每个反应中,一个可以特异性识别模版的单链引物,可以从3端开始启动DNA合成,根据碱基互补配对原则,脱氧核糖核苷酸或简单的核苷酸是一个接一个的与模版配对。NGS平台自身的软件大多是做分析及报告的,样本管理或者实验管理一般需要单独上信息化,对整体业务效率还是有明显提高的。
本发明属于法医学技术领域,具体涉及基于二代测序技术检测68个基因座的试剂盒及其使用的引物组合,尤其涉及基于二代测序技术检测67个y-str基因座和amelogenin基因座的试剂盒及其使用的引物组合。背景技术:短串联重复(shorttandemrepeat,str)是由2~6bp重复单位串联组成且***存在于人类基因组中的一类具有长度多态性的dna序列,是目前法医个体识别和亲子鉴定应用*****的遗传标记。人类y染色体短串联重复(y-chromosomeshorttandemrepeats,y-str)具有父系遗传、缺乏重组、分型简单、信息量大、多态性高等特点,是研究人类的起源进化、民族差异、种族差异、群体及地区分布等的有力工具。因此,y染色体str基因座多态性研究可为法医学个体识别和亲权鉴定提供重要手段,在诸如父系家族的亲权鉴定、混合斑男性成分的检测、不同男性个体混合物的分析、追溯父系迁移历史及重构同一父系家族等方向都具有独特的应用价值。目前,荧光标记多重扩增结合毛细管电泳(fluorescentlabeledmultiplexpcr-capillaryelectrophoresis,pcr-ce)是str分型的主流技术;常用的商业化y-str分型试剂盒有y23(promega)、y(promega)、yfiler(thermofisherscientific)和yfilerplus。迈杰转化医学致力于解决创新药物的研发痛点及患者的用药痛点,助力精z准医疗!
二代测序是一个强大的功能平台,它可以同时给数以万计的DNA分子进行测序。由于这种可以多个样本同时测序的能力,在个性化医疗、遗传疾病和临床诊断等方面,二代测序也就是高通量测序开创了**性的领域。早在1900年代就发明的Sanger测序法,成为了DNA测序的黄金法则,即便到了***它仍被***用来进行常规测序和NGS数据的验证。它利用高保真DNA聚合酶生成与单链DNA模版互补的拷贝。在每个反应中,一个可以特异性识别模版的单链引物,可以从3端开始启动DNA合成,根据碱基互补配对原则,脱氧核糖核苷酸或简单的核苷酸是一个接一个的与模版配对。每个反应还包含四种双脱氧核糖核苷酸的混合物,每一种对应一个DNA碱基。这些双脱氧核糖核苷酸与DNA单体十分类似,因此可以参与DNA链的增长,但是他们和天然的脱氧核糖核苷酸有两点不同:(1)他们缺少一个会影响DNA链进一步衍生的3’羟基。在DNA延伸过程中,这个3’羟基一旦加入DNA分子中就会导致链的终止;(2)每个双脱氧核糖核苷酸都有独特的荧光染料吸附,使得DNA测序的自动检测得以进行。 迈杰转化医学--伴随诊断整体解决方案提供者,检测技术平台全涵盖.天津专业迈杰转化医学NGS平台经验丰富
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上述任一所述复合扩增体系还可包括进行pcr扩增反应所需的试剂。所述“进行pcr扩增反应所需的试剂”不包括pcr扩增反应所需的引物。上述任一所述复合扩增体系可为20μl,由10μl2×mastermix、上述任一所述引物组合和模板组成。2×mastermix具体可为德国qiagen公司的产品。所述模板具体可为浓度为1ng/μl的标准品2800m的水溶液或样品的基因组dna。所述样品可为人口腔拭子。所述标准品2800m具体可为promega公司的产品,产品目录号为dd7251。含有上述任一所述引物组合的试剂盒也属于本发明的保护范围;所述试剂盒的用途可为(h1)-(h5)中的至少一种:(h1)str分型;(h2)y-str分型;(h3)个体识别;(h4)亲权鉴定;(h5)种族推断。本发明还保护上述任一所述复合扩增体系或上述任一所述试剂盒的制备方法;该制备方法包括将上述任一所述引物组合中的各条引物单独包装的步骤。本发明还保护上述任一所述引物组合或上述任一所述复合扩增体系在制备试剂盒中的应用;所述试剂盒的用途可为(h1)-(h5)中的至少一种:。天津专业迈杰转化医学NGS平台经验丰富