天然培养基是指来自动物体液或利用组织分离提取的一类培养基,如血浆、血清、、鸡胚浸出液等。组织培养技术建立早期,体外培养细胞都是利用天然培养基。但是由于天然培养基制作过程复杂、批间差异大,因此逐渐为合成培养基所替代。普遍使用的天然培养基是血清,另外各种组织提取液、促进细胞贴壁的胶原类物质在培养某些特殊细胞也是必不可少。血清质量高低取决于两方面因素:一是取材对象,二是取材过程。用于取材的动物应健康无病并且在指定的出生天数之内,取材过程应严格按照操作规程执行,制备出的血清要经过严格的质量鉴定。酵母培养基通常包含酵母营养素、碳水化合物和氮源。ER培养基添加剂
按培养基的营养成分是否完全区分:1.基本培养基,亦称“较低限度培养基”。只能满足微生物野生型菌株生长需要的培养基,称为基本培养基,是含有营养要求较低成分的合成培养基,常用“[-]”表示。这种培养基往往缺少某些生长因子,所以经过诱变过的营养缺陷型菌株不能生长。2.完全培养基,基础培养基添加血清等物质后,叫完全培养基,也叫(血清)细胞培养基。完全培养基可用来满足微生物的各种营养缺陷型菌株的生长需要,常以“[+]”表示。3.补充培养基,凡是只能满足相应的营养缺陷型生长需要的组合培养基,称为补充培养基,它是在基本培养基中加入该菌株不能合成的营养因子而组成的。根据在基本培养基中加入的是A或B等营养因子代谢物而分别用[A]或[B]等来表示。麦康凯液体培养基杂质会影响培养基的成分,因此制备培养基时需要进行灭菌。
什么培养基中可以省去加酚红?酚红在培养基中用作pH值的指示剂:中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时为紫色。酚红本身对生物制品质量并不会产生影响,可以通过纯化技术去除,但酚红在无血清培养基可能带来胞内钠/钾失衡,影响细胞生长,当然这种作用能被血清所中和或减轻。酚红并不是培养基中必需的一种成分,很多国外的疫苗或抗体生产企业在生产过程中都使用无酚红培养基。研究表明,酚红可以模拟固醇类的作用。为避免固醇类反应,培养细胞,尤其是哺乳类细胞时,用不加酚红的培养基。由于酚红干扰检测,一些研究人员在做流式细胞检测时,不使用加有酚红的培养基。
以MS培养基母液为基础,向洁净铝锅中顺序加入大量元素20×母液100mL,微量元素100×母液20mL,铁盐100×母液20mL,维生素100×母液20mL,肌醇200×母液10mL,甘氨酸200×母液10mL,配制得MS培养基后,再加入0.5mg·L-1的BA8mL,0.5mg·L-1的NAA8mL。然后加入实际配制培养基体积约2/3-3/4的蒸馏水,加入40g蔗糖后搅拌使其溶化,用0.5mol·L-1的NaOH和0.5 mol·L-1的HCl调整pH值至5.8-6.0。加入14g琼脂,将铝锅置于电炉上,搅拌加热使琼脂完全溶化,然后用蒸馏水定容至终体积2L,继续加热几分钟使之混合均匀后分装于三角瓶中。培养基中的各种成分会被微生物不同速率地利用,因此需要在适当的时间点更新培养基以维持细胞的生长状态。
培养基按成分分类有哪些?上海瑞楚生物科技有限公司小编介绍,根据培养基的组成成分,可分为天然培养基和合成培养基两大类。天然培养基(native medium) 含有不完全明了化学成分的天然物质。如蛋白胨、牛肉膏(粉)、肉浸液、玉米浆、血液、马铃薯等。用此类材料配成的培养基很难做到不同批号之间质量的稳定一致,因此在选用原料时务必注明其商品名称、生产厂家及批号,对不同来源的原料应先做小样试验。此种培养基成本较低,细菌繁殖较好,一般细菌培养以选用天然培养基为主。在培养细胞时通常还需要添加药物,以防止细菌污染。ER培养基添加剂
培养基的传递需要在制备和使用期间保持良好的无菌技术,避免细菌交叉污染。ER培养基添加剂
培养基,是指供给微生物、植物或动物(或组织)生长繁殖的,由不同营养物质组合配制而成的营养基质。一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)、维生素和水等几大类物质。培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质,也是细胞生长和繁殖的生存环境。培养基种类很多,根据配制原料的来源可分为自然培养基、合成培养基、半合成培养基;根据物理状态可分为固体培养基、液体培养基、半固体培养基;根据培养功能可分为基础培养基、选择培养基、加富培养基、鉴别培养基等;根据使用范围可分为细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基等。培养基配成后一般需测试并调节pH,还须进行灭菌,通常有高温灭菌和过滤灭菌。培养基由于富含营养物质,易被污染或变质。配好后不宜久置,现配现用。ER培养基添加剂
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2025-07-12