在畜牧养殖业方面,枯草芽孢杆菌具有市场潜力,枯草芽孢杆菌能够增强畜禽免疫机能和抗氧化性能,提高畜禽的生产性能,但是由于其价格较贵,目前还主要应用于仔猪配合饲料等高附加值饲料产品。未来的研究重点应该放在进一步优化生产工艺,降低枯草芽孢杆菌类产品的成本,将其推广到畜禽配合饲料中;以及将枯草芽孢杆菌与其他功能性饲料添加剂(如啤酒酵母菌、菊糖和丝兰提取物等)进行合理搭配,充分发挥其增强畜禽免疫功能和抗氧化性能,提高畜禽生产性能的功效。在植物保护方面,枯草芽孢杆菌制剂可以与化学农药复配,实现优势互补、用量减少、防效增强的目的。铜绿假单胞菌为革兰氏阴性,不产芽胞。泛菌属
保存的铜绿假单胞菌复苏时,直接从菌种保存管挑取少量细菌移种普通琼脂平板或肉汤管,于37摄氏度培养18~24小时。主要生化指标检测,取较低温甘油保存法和半固体保存法两种保存法保存的菌种分别进行42摄氏度生长试验、氧化酶试验、氧化-发酵试验、动力试验及明胶液化试验检测。半固体保存法在3个月内复苏,细菌生长良好,但在6个月后复苏,存活率降低,只达30%。移种普通琼脂平板上无肉眼可见的蓝绿色的色素产生,需连续移种3~4次后才可见到色素产生。改良的方法使菌种保存已达27个月,期间分别在6、12、18、24、27个月时复苏,均可见绿脓杆菌在普通琼脂平板上生长良好,可见圆形、大小不一、光滑、湿润、边缘不整齐的扁平菌落,菌落周围的琼脂被染成蓝绿色;细菌存活率为100%。木蝴蝶假诺卡氏菌菌株大肠杆菌能发酵多种碳水化合物,也可以利用多种有机酸盐。
枯草芽孢杆菌分泌的多种胞外酶,已应用到许多不同领域中。脂肪酶具有多种催化能力,其在动物或人体的消化道中与原本存在的消化酶类共同发挥作用,使消化道处于健康的平衡状态。枯草芽孢杆菌还未直接用于食品中,但有研究表明枯草芽孢杆菌在酿酒过程中起到了非常重要的作用。芽孢杆菌,包括嗜热芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌以及地衣芽孢杆菌等都有较强的水解淀粉和蛋白质的能力,是酱香型白酒的风味物生成和风格形成的重要菌类。由于芽孢杆菌能够产生蛋白酶与淀粉酶,其水解原料形成丰富的前体环境,有利于风味物质的生成。
大肠杆菌表达系统的组成:(一)表达载体:一个完整的质粒载体需要有:复制起点、启动子、插入的目的基因、筛选标记以及终止子。(二)外源基因:在大肠杆菌表达体系中要表达的基因即外源基因,包括原核基因和真核基因。原核基因可以在大肠杆菌中直接表达,但是真核基因含有内含子,大肠杆菌不能对mRNA进行剪切,从而真核基因一般以cDNA的形式在大肠杆菌表达系统中表达。目的蛋白在大肠杆菌系统表达中的形式有二种。一种是在细胞内表现为不溶性的包涵体颗粒。另一种是在细胞内表现为可溶性的蛋白质。可溶性的目标蛋白质除可存在于细胞质中外,还可借助于本身的功能序列和大肠杆菌蛋白质加工、运输体系,至终分泌到周质空间,或外泌到培养液中。(三)宿主细胞:大肠杆菌蛋白表达过程中很重要的因素就是宿主细胞的选择。对于宿主细胞的选择主要根据宿主细胞各自的特征及目的蛋白的特性。对于是适合目的基因表达的宿主细胞主要有以下要求:①容易获得较高浓度的细胞。②能利用易得廉价原料。③不致病、不产生内毒。④发热量低、需氧低、适当的发酵温度和细胞形态。⑤容易进行代谢调控。在生物工程中,大肠杆菌被普遍用于基因复制和表达的宿主。
有些铜绿假单胞杆菌的保藏方法,如滤纸保藏法、液氮保藏法和冷冻干燥保藏法等均需使用保护剂来制备细胞悬液,以防止因冷冻或水分不断升华对细胞的损害。保护性溶质可通过氢和离子键对水和细胞所产生的亲和力来稳定细胞成分的构型。保护剂有牛乳、血清、糖类、甘油、二甲亚砜等。铜绿假单胞杆菌的多聚酶链式反应基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性、退火、延伸三个基本反应步骤构成模板DNA经加热至93摄氏度左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备。枯草芽孢杆菌能长期耐60°C高温,在120°C温度下能存活20分钟。苍黄链霉菌菌株
枯草芽孢杆菌能够很好的分解池中残饵、粪便、有机物等,具有很强的清理水中垃圾小颗粒的作用。泛菌属
铜绿假单胞菌是一种常见的条件致病菌,属于非发酵革兰氏阴性杆菌。菌体细长且长短不一,有时呈球杆状或线状,成对或短链状排列。菌体的一端有单鞭毛,在暗视野显微镜或相差显微镜下观察可见细菌运动活泼。铜绿假单胞菌为专性需氧菌,生长温度范围25~42摄氏度,较适生长温度为25~30摄氏度,特别是铜绿假单胞菌在4摄氏度不生长,而在42摄氏度可以生长的特点可用以鉴别。在普通培养基上可以生存并能产生水溶性的色素,如绿脓素与带荧光的水溶性荧光素等。在血平板上会有透明溶血环。铜绿假单胞菌有菌体o抗原和鞭毛h抗原。o抗原含有内毒养素和原内毒养素蛋白质两种成份。原内毒养素蛋白质是一种高分子、低毒性,原性强的保护性抗原,不只存在于不同血清型铜绿假单胞菌中。泛菌属
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