细菌固体分离培养基是用于分离和培养细菌的固体培养基,通常包含琼脂作为凝固剂。这种培养基能够为细菌提供稳定的生长环境,并有助于观察微生物的菌落特征。以下是细菌固体分离培养基的一些关键特点:1.**成分**:细菌固体分离培养基通常包含蛋白质来源(如蛋白胨)、碳源(如葡萄糖)、无机盐(如氯化钠)和琼脂等。2.**pH值**:培养基的pH值对细菌的生长至关重要,通常需要调节至适宜的pH值,如7.3±0.1(25℃)。3.**灭菌**:培养基在制备过程中需要进行高压灭菌,通常是121℃灭菌15分钟或115℃灭菌30分钟。4.**用途**:主要用于细菌的分离、计数和鉴定。通过稀释倒平板法、涂布平板法或平板划线法等技术,可以从混合的微生物群体中分离出单一的细菌菌落。5.**保存**:培养基通常在室温、避光、干燥的条件下保存。6.**操作**:在无菌条件下操作,避免污染。使用时,将培养基加热至液态,然后倒入无菌培养皿中,冷却凝固后即可用于接种细菌。7.**菌落特征**:不同种类的细菌在固体培养基上形成的菌落具有特定的形态特征,如大小、形状、颜色、边缘等,这些特征可以用于细菌的鉴定。下层培养基成分则包括血消化汤、琼脂、葡萄糖和酚红溶液。这些成分为细菌提供碳源、氮源。OSA平板
半固体储存培养基是一种在微生物学研究和细胞培养领域中扮演重要角色的培养基。它主要用于观察微生物的动力、菌种的保藏与运输、厌氧菌的培养、菌种鉴定、细胞培养、噬菌体效价测定以及微生物趋化性研究等。半固体培养基通常由液体培养基加入少量凝固剂制成,例如琼脂的用量在0.2~0.7%之间。在具体应用上,半固体培养基可以用于以下方面:1.**微生物动力观察**:通过推测细菌是否有鞭毛来进行鉴定。2.**菌种保藏与运输**:便于菌种的短时间保存和长途运输。3.**厌氧菌培养**:适用于厌氧菌的培养,对于研究厌氧微生物的生长和代谢至关重要。4.**菌种鉴定**:通过观察菌落的形态和生长特性来区分不同的微生物种类。5.**细胞培养**:在细胞生物学领域,半固体培养基广泛应用于干细胞、细胞克隆、细胞表达和细胞毒性等实验。6.**噬菌体效价测定**:用于双层平板法测定噬菌体的效价,是研究病毒与宿主相互作用的重要手段。7.**微生物趋化性研究**:帮助研究微生物的趋化性,即微生物对化学物质的定向移动反应。SB琼脂平板明胶的凝固点在28℃左右,受运输过程的温度及震荡影响,出现培养基在管壁凝固形成不规则状,此为正常现象。
酵母浸粉葡萄糖琼脂(YPDA)是一种常用的微生物培养基,尤其是在酵母菌的培养中。以下是它的一些主要特点:1.**成分**:YPDA的主要成分包括酵母浸粉、蛋白胨(或胰化胨)、葡萄糖和琼脂。具体配方为1%酵母浸粉、2%蛋白胨、2%葡萄糖,若制固体培养基,加入2%琼脂粉。2.**pH值**:YPDA的pH值通常调节在6.0±0.2(25℃)。3.**灭菌处理**:制备好的培养基需要进行121℃高压灭菌15分钟。葡萄糖溶液灭菌后加入,以避免高温下可能发生的化学反应导致培养基成分变化。4.**用途**:YPDA主要用于酵母菌的培养,也用于药品和生物制品中含王浆和蜂蜜的合剂酵母菌数测定。5.**配制方法**:首先溶解10g酵母浸粉和20g蛋白胨于900ml水中,如制平板加入20g琼脂粉,然后进行高压灭菌。灭菌后加入100ml20g葡萄糖溶液。6.**储存条件**:液体YPDA培养基可常温保存;琼脂YPDA平板在4℃可保存几个月。7.**微生物生长特征**:不同细菌在酵母浸粉葡萄糖琼脂培养基上的生长特征不同,例如酵母菌形成白色凸起光滑菌落,白色念珠菌也形成白色凸起光滑菌落,而黑曲霉菌则有黑色孢子。
CIN-1培养基基础是一种用于分离小肠结肠炎耶尔森氏菌的选择性培养基。其配方包含胰蛋白胨、酵母浸粉、甘露醇、氯化钠、去氧胆酸钠、硫酸镁、琼脂、Irgasan、中性红、结晶紫和氯化锶等成分,pH值约为7.5±0.1(25℃)。这种培养基通过其成分的选择性作用,可以有效地促进目标菌的生长,同时抑制其他非目标菌。**CIN-1培养基基础的用途**:主要用于分离小肠结肠炎耶尔森氏菌(GB标准)。**添加剂**:每瓶需配套添加CIN-1添加剂,每200mlCIN-1培养基基础添加1支HB0269-2。**配制方法**:称取58.0gCIN-1培养基基础,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装三角瓶,每瓶200ml,121℃高压灭菌15分钟,冷却至50℃左右时,加入一支过滤除菌的CIN-1添加剂(含头孢菌素3mg,新生霉素0.5mg),混匀,倾入无菌平皿。**检验原理**:胰蛋白胨和酵母浸粉提供菌体生长所需要的氮源、碳源和微量元素;甘露醇作为可发酵碳源;氯化钠维持培养基体系渗透压;硫酸镁提供菌体生长的微量元素;去氧胆酸钠和结晶紫能够抑制革兰氏阳性菌;中性红作为酸碱指示剂;琼脂是培养基的凝固剂。由于双歧杆菌是厌氧菌,PYG培养基需要在厌氧或微需氧条件下使用,以确保细菌的正常生长 。
PALCAM琼脂基础(PalcamAgarBase)是一种用于分离单核细胞增生李斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)的选择性培养基。它的特点如下:1.**成分**:PALCAM琼脂基础包含酪蛋白胰酶消化物、心胰酶消化物、玉米淀粉、肉胃酶消化物、酵母膏粉、氯化钠、葡萄糖、甘露醇、柠檬酸铁铵、七叶苷、氯化锂、酚红和琼脂等成分。2.**pH值**:培养基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),为李斯特氏菌提供适宜的生长环境。3.**选择性**:氯化锂和抗生物质添加剂(如盐酸吖啶黄素、硫酸多粘菌素B和头孢他啶)能够抑制革兰氏阴性菌和大多数革兰氏阳性菌,从而提高对李斯特氏菌的选择性。4.**应用**:主要用于食品、水和污水样本中单核细胞增生李斯特氏菌的选择性分离培养。5.**配制方法**:通常称取71.9g培养基粉末,加入1升蒸馏水,加热至完全溶解,分装后进行高压灭菌。使用时,冷却至50℃,加入配套的添加剂,混匀后倾入无菌培养皿。6.**结果观察**:李斯特氏菌在PALCAM琼脂上生长时,会水解七叶苷生成黑色的6,7-二羟基香豆素,形成灰绿色菌落,中心凹陷,周围有黑色环。
尿素培养基主要用于鉴定革兰氏阴性菌中的尿素酶活性,如用于肠杆菌科细菌的鉴定,例如大肠埃希菌。OSA平板
蜡状芽孢杆菌琼脂基础(TSSB)是一种用于分离和培养蜡样芽孢杆菌(Bacilluscereus)的培养基。以下是它的一些主要特点:1.**成分**:蜡状芽孢杆菌琼脂基础的配方包含胰酪蛋白胨、牛肉浸粉、D-甘露醇、氯化钠、苯酚红和琼脂等成分。其中,胰酪蛋白胨和牛肉浸粉提供碳源和氮源,D-甘露醇作为可发酵的糖,氯化钠维持渗透压,苯酚红作为pH指示剂,琼脂作为凝固剂。2.**pH值**:该培养基的pH值通常调节在7.2±0.2(25℃)。3.**灭菌处理**:制备好的培养基需要进行121℃高压灭菌15分钟。4.**添加剂**:每瓶需配套添加多粘菌素B和50%卵黄乳液使用,每100ml蜡样芽孢杆菌选择性琼脂培养基基础中添加1支多粘菌素B和2支50%卵黄乳液。5.**用法**:称取本品43.0g加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装每瓶100ml,121℃高压灭菌15分钟,冷至50℃左右时,每瓶加入10ml50%的无菌卵黄乳液和多粘菌素B10000IU混匀,倾入无菌平皿,备用。6.**菌落特征**:蜡样芽孢杆菌在TSSB上生长时,菌落通常为微粉红色,周围有淡粉红色沉淀环,这有助于识别蜡样芽孢杆菌。7.**质量控制**:进行微生物灵敏度试验时,按标签用法制备培养基,接种质控菌株,放置36±1℃需氧培养24-48小时。OSA平板