BTB琼脂是一种用于微生物培养的培养基,其特点主要包括:1.**成分**:BTB琼脂的主要成分包括牛肉膏、蛋白胨、蔗糖、氯化钠、Teepol和溴麝香草酚蓝(BTB)。牛肉膏和蛋白胨提供细菌生长所需的基本营养,蔗糖作为可利用的碳源,氯化钠有助于弧菌的生长并抑制其他细菌,Teepol可抑制多数革兰氏阳性菌的生长,BTB作为酸碱指示剂。2.**pH值**:BTB琼脂的pH值通常控制在7.8±0.1(25℃)。3.**用途**:BTB琼脂常用于弧菌的选择性增菌培养,也可以加入琼脂制成固体培养基,用于弧菌的分离培养。4.**制备方法**:称取BTB培养基48.1g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装试管,每管5ml,115℃高压灭菌20分钟,备用。5.**质量控制**:按标签用法制备培养基,接种质控菌株,如创伤弧菌ATCC27562、霍乱弧菌、溶藻弧菌ATCC17749、副溶血性弧菌ATCC17802等,放置36±1℃需氧培养18-24小时。6.**储存条件**:BTB培养基应放置阴凉干燥处保存。7.**注意事项**:BTB指示剂应为绿色或蓝色溶液,pH在7.1~8.5较适宜,如变为黄色或黄绿色,说明pH降低,可滴加少量稀氨水或氢氧化钠等碱性试剂调整后即可正常使用。硝酸盐肉汤用于蜡样芽孢杆菌硝酸盐还原试验,也适用于其他细菌的硝酸盐还原能力测试,如肠杆菌科。放线菌分离琼脂
SSM琼脂是一种强选择性培养基,其成分包括胨、牛肉膏等氮、碳源,以及其他选择性抑制剂和缓冲剂。这种培养基的设计旨在分离致病的沙门氏菌和志贺氏菌。以下是SSM琼脂的一些关键特点和制备方法:1.**成分**:SSM琼脂的基础成分包括牛肉膏、蛋白胨、酵母膏粉等,这些提供碳源、氮源、维生素和矿物质。此外,还含有乳糖、三号胆盐、枸橼酸钠、硫代硫酸钠、枸橼酸铁铵、中性红和煌绿等特殊成分,这些成分有助于抑制其他微生物的生长,同时促进目标菌的生长。2.**pH值**:SSM琼脂的pH值通常控制在6.9-7.1之间,以保证微生物的生长环境。3.**制备方法**:首先,称取培养基粉末,加入到适量的蒸馏水中,加热煮沸并不断搅拌直至完全溶解。然后,冷却至50℃左右,倾入无菌平皿中备用。通常不需要高压灭菌,因为培养基中的某些成分可能在高压灭菌过程中失去活性。4.**应用**:SSM琼脂主要用于沙门氏菌的分离培养,也适用于志贺氏菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌等肠道致病菌的分离培养。在这种培养基上,多数沙门氏菌不发酵乳糖,并产硫化氢,菌落表现为无色透明并有黑色中心。改良察氏琼脂对于微生物的生化反应筛选,TSI 培养基具有较高的特异性和敏感性,结果准确可靠。
Littman琼脂是一种常用于菌分离培养的培养基。其基本成分包括蛋白胨、牛胆粉、葡萄糖、结晶紫和琼脂,以及具有中性pH值7.0±0.2。蛋白胨提供氮源和生长因子,牛胆粉提供维生素和其他营养物质,葡萄糖提供碳源,结晶紫作为抑制革兰氏阳性菌的生长抑制剂,琼脂作为凝固剂。**配制方法**:1.称取50克Littman琼脂干粉。2.加入1升蒸馏水或去离子水。3.搅拌加热煮沸至完全溶解。4.进行121℃高压灭菌15分钟。5.冷却至50℃左右时,加入过滤除菌的链霉素水溶液(3mg/ml)10ml。6.混匀后倾入无菌平皿。**质量控制**:-对于黑曲霉CMCC(B)98003和酿酒酵母菌ATCC9763,其生长率(PR)应≥0.7。-对于金黄色葡萄球菌ATCC6538和大肠埃希氏菌ATCC25922,其生长应≤1(G≤1)。**储存条件**:应贮存于避光、干燥处,未开封的保质期为三年。Littman琼脂对于菌的分离培养具有良好的效果,同时通过添加链霉素可以增强对细菌生长的抑制作用,从而更有利于菌的选择性生长。
肠球菌肉汤(EnterococcusBroth)是一种专门用于增菌培养肠球菌的微生物培养基。它的特点和应用如下:1.**成分**:肠球菌肉汤的主要成分包括胰蛋白胨、牛肉浸粉、酵母浸粉、牛胆粉、氯化钠、柠檬酸钠、七叶苷、柠檬酸铁铵和叠氮化钠等。这些成分为肠球菌提供氮源、维生素和生长因子,同时维持适宜的渗透压和提供选择性抑制其他非目标菌种的环境。2.**选择性**:牛胆粉和叠氮化钠作为选择性抑菌剂,有助于抑制非链球菌的细菌生长,特别是对革兰氏阴性细菌有抑制作用。3.**应用**:该培养基主要用于食品和水中肠球菌的鉴别培养,如GB/T5750.12-2023生活饮用水标准中提到的应用。4.**制备方法**:通常将肠球菌肉汤的粉末配方溶解在蒸馏水中,加热煮沸至完全溶解,然后进行高压灭菌,以确保无菌。5.**质量控制**:在36±0.5℃培养24小时后,可以观察到特定菌株的生长情况。例如,粪链球菌(CMCC(B)32223)在肠球菌肉汤中生长良好,呈现棕黑色,并具有棕色晕轮,而金黄色葡萄球菌(ATCC6538)和大肠埃希氏菌(ATCC25922)则被抑制,不生长或生长很差。TSI 培养基可根据细菌的不同反应特征,有效区分大肠埃希氏菌、沙门菌属等常见肠道菌。
改良DG18琼脂基础(DichloranGlycerolAgar,DG18)是一种用于分离和计数霉菌和酵母菌的选择性培养基。它通常用于食品工业中,尤其是在检测干制和半干制食品中的嗜渗霉菌时。这种培养基含有氯硝胺,可以抑制某些霉菌的生长,使得目标菌株更容易被分离和计数。以下是改良DG18琼脂基础的一些特点:1.**配方**:基础配方中含有酪蛋白胨、无水葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、氯硝胺、氯霉素和琼脂等成分。每升培养基中,酪蛋白胨5.0g,无水葡萄糖10.0g,磷酸二氢钾1.0g,硫酸镁0.5g,氯硝胺0.002g,氯霉素0.1g,琼脂15.0g,pH值为5.6±0.2。2.**检验原理**:该培养基利用氯硝胺抑制霉菌菌落蔓延生长,甘油维持较低的渗透压,适合嗜渗酵母的生长。3.**使用方法**:称取31.6gDG18琼脂基础,加入1升蒸馏水或去离子水,加热搅拌煮沸至完全溶解。加入200g甘油,混匀后,121℃高压灭菌15分钟。4.**质量控制**:酿酒酵母ATCC9763和黑曲霉ATCC16404的生长率(PR)应≥0.7,表现为奶油色菌落和白色菌丝、黑色孢子。枯草芽胞杆菌ATCC6633和大肠埃希氏菌ATCC25922的抑菌性应≤1。5.**储存条件**:应贮存于避光、干燥处,用后立即旋紧瓶盖;未开封产品保质期为三年。LB琼脂可以通过将粉末成分溶解在去离子水中,加热煮沸以帮助琼脂溶解,然后用NaOH调节pH至适宜值。亮绿胆盐琼脂
在DC培养基上,典型的大肠菌群菌落为粉红色、紫红色或红色,菌落周围可能有胆盐沉淀环。放线菌分离琼脂
Preston肉汤基础是一种专门用于培养空肠弯曲杆菌(Campylobacterjejuni)的选择性增菌培养基。其特点和应用如下:1.**成分**:Preston肉汤基础包含牛肉浸粉、蛋白胨、氯化钠、木酮酸钠、焦亚硫酸钠和硫酸亚铁等成分,这些成分为细菌提供碳氮源、维生素和生长因子,同时维持细菌平衡的渗透压,并提供细菌生长需要的金属离子。2.**pH值**:培养基的pH值通常控制在7.0±0.2(25℃)。3.**选择性添加剂**:Preston肉汤基础通常需要添加特定的添加剂,如多粘菌素B、利福平和甲氧苄啶,这些添加剂能够抑制其他细菌的生长,而放线菌酮则用于抑制菌生长。4.**制备方法**:称取Preston肉汤基础25.75g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装,每瓶200ml,121℃高压灭菌15分钟,冷至50℃左右时,每瓶加入一支Preston肉汤添加剂和10ml无菌裂解马血,混匀,分装试管,备用。5.**注意事项**:培养基中含少量硫酸亚铁,灭菌后可能出现微量沉淀。6.**应用**:Preston肉汤基础用于空肠弯曲杆菌的选择性增菌培养,特别适用于从食品和临床样本中分离和增菌空肠弯曲杆菌。放线菌分离琼脂