细菌固体分离培养基是用于分离和培养细菌的固体培养基,通常包含琼脂作为凝固剂。这种培养基能够为细菌提供稳定的生长环境,并有助于观察微生物的菌落特征。以下是细菌固体分离培养基的一些关键特点:1.**成分**:细菌固体分离培养基通常包含蛋白质来源(如蛋白胨)、碳源(如葡萄糖)、无机盐(如氯化钠)和琼脂等。2.**pH值**:培养基的pH值对细菌的生长至关重要,通常需要调节至适宜的pH值,如7.3±0.1(25℃)。3.**灭菌**:培养基在制备过程中需要进行高压灭菌,通常是121℃灭菌15分钟或115℃灭菌30分钟。4.**用途**:主要用于细菌的分离、计数和鉴定。通过稀释倒平板法、涂布平板法或平板划线法等技术,可以从混合的微生物群体中分离出单一的细菌菌落。5.**保存**:培养基通常在室温、避光、干燥的条件下保存。6.**操作**:在无菌条件下操作,避免污染。使用时,将培养基加热至液态,然后倒入无菌培养皿中,冷却凝固后即可用于接种细菌。7.**菌落特征**:不同种类的细菌在固体培养基上形成的菌落具有特定的形态特征,如大小、形状、颜色、边缘等,这些特征可以用于细菌的鉴定。克氏双糖铁试验时间通常控制在18-24小时,以确保细菌发酵充分且不过度,避免影响判断结果。SDA+0.25%青霉素酶预装培养皿
酚红葡萄糖肉汤(PhenolRedGlucoseBroth)是一种常用的微生物学培养基,主要用于鉴定细菌是否具有发酵葡萄糖的能力。以下是它的一些主要特点:1.**成分**:酚红葡萄糖肉汤的配方包含月示胨(或称为蛋白胨)、牛肉浸粉、氯化钠、葡萄糖和酚红。其中,月示胨和牛肉浸粉提供氮源、维生素和生长因子;葡萄糖作为可发酵的糖类;氯化钠维持渗透压;酚红作为pH指示剂。2.**pH值**:该培养基的pH值通常调节在7.4±0.1(25℃)。3.**灭菌处理**:制备好的培养基需要进行121℃高压灭菌10-15分钟。4.**使用方法**:称取培养基粉末,溶解于蒸馏水中,分装试管,每管3ml。5.**质量控制**:接种蜡样芽孢杆菌后,在厌氧条件下35℃培养24小时,培养基由红色变为黄色,表明细菌发酵葡萄糖产酸。6.**用途**:酚红葡萄糖肉汤用于蜡样芽孢杆菌葡萄糖分解试验(SN标准),也用于检测大肠菌群。7.**结果观察**:如果培养基颜色由红色变为黄色,说明细菌发酵葡萄糖产酸;如果培养基颜色不变或红色加深,说明该微生物葡萄糖发酵阴性。8.**储存条件**:避光,密封,阴凉干燥处保存。小牛浸液琼脂培养皿哥伦比亚肉汤为非选择性培养基,大多数微生物都能在其上生长良好,因此常用于微生物的初步分离和培养。
叠氮钠血琼脂基础(AzideBloodAgarBase)是一种选择性培养基,主要用于从粪便、污水和其他样本中分离和检测链球菌和葡萄球菌。以下是它的一些特点和配制方法:**特点**:1.**成分**:含有胰蛋白胨、肉浸粉、氯化钠、叠氮钠和琼脂等成分,其中叠氮钠作为选择性抑制剂,对大多数革兰氏阴性菌具有抑制作用,但允许某些革兰氏阳性菌如链球菌和葡萄球菌的生长。2.**pH值**:培养基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),为细菌提供适宜的生长环境。3.**应用**:除了用于分离培养链球菌和葡萄球菌,叠氮钠血琼脂基础还可用于测定溶血反应。4.**溶血反应**:在该培养基上,可以观察到α溶血(培养基变绿)、β溶血(菌落周围培养基变透明)和γ溶血(培养基无变化)。**配制方法**:1.称取33.2g培养基粉末,加入1000mL蒸馏水或去离子水中。2.加热煮沸至完全溶解。3.121℃高压灭菌15分钟。4.冷却至50℃左右,加入50mL无菌羊血,混匀后倒入无菌培养皿中。**注意事项**:-避免摄入、吸入、皮肤接触叠氮钠,配制时应在通风橱中进行,并佩戴适当的个人防护装备。-培养基中含有的叠氮钠具有剧毒,应妥善处理和保存。
营养琼脂方瓶(罗氏瓶)通常是指营养琼脂培养基的一种包装形式,适合实验室进行微生物培养使用。营养琼脂是一种基础培养基,用于非苛养微生物的培养,以及在生化或血清学测试前的质量控制和纯度检查。以下是营养琼脂的典型配方:1.**成分**:-蛋白胨:10.0g/L-牛肉膏粉:3.0g/L-氯化钠:5.0g/L-琼脂:15.0g/L-终pH值:7.3±0.2(25℃)2.**配制方法**:-称取33g营养琼脂培养基粉末,加入1000mL蒸馏水或去离子水。-搅拌加热煮沸至完全溶解。-分装到方瓶(罗氏瓶)中,通常分装量为100mL或500mL。-121℃高压灭菌15分钟。3.**使用方法**:-灭菌完成后,取出方瓶并冷却至大约40-45°C。-如果需要富集,可在灭菌后加入血液或其他生物液体。-在无菌条件下,将培养基倒入无菌的培养皿中或作为液体培养基使用。-培养基凝固后,可将培养皿放置在热空气烤箱中,用较低温度烘烤几分钟,以去除使用前培养皿上的任何水分。4.**储存方法**:-粉末形式的培养基应储存在10至30°C之间,容器需紧密封闭。-制备好的培养基应在20-30°C的环境中储存。KI培养基有上层和下层培养基。上层培养基成分有血消化汤、琼脂、硫代硫酸钠、硫酸亚铁铵、乳糖和酚红溶液。
BM7培养基(ATCCMedium2870)是一种专门用于培养韧皮杆菌属(Liberibacter)的微生物培养基。这种培养基适用于培养营养要求较高的细菌。以下是BM7培养基的一些关键特点和配制方法:1.**配方组成**:-α-酮戊二酸(α-Ketoglutarate):2g-ACES缓冲液(ACES):10g-氢氧化钾(KOH):3.75g-去离子水(DIWater):550ml-琼脂(Agar)(如果需要固体培养基):15g-胎牛血清(FetalBovineSerum):150ml-TMN-FH培养基(SigmaT1032):300ml2.**配制方法**:-首先,将上述干粉成分溶解在550ml的去离子水中。-调节pH至6.9,并在121°C下高压灭菌15分钟。-冷却后,无菌地加入胎牛血清和TMN-FH培养基。3.**用途**:-主要用于培养和维持韧皮杆菌属(Liberibacter)的生长。4.**保存条件**:-粉末固体培养基应密封保存于阴凉干燥处。-液体培养基应在2-8°C下避光保存。5.**注意事项**:-配制过程中应避免吸入、摄入或皮肤接触。-应在通风橱中进行配制,并佩戴适当的个人防护装备,如口罩、手套和护目镜。这种培养基在微生物学研究和医学诊断中有着重要的应用,尤其是在研究和诊断与韧皮杆菌相关的植物疾病方面。明胶的凝固点在28℃左右,受运输过程的温度及震荡影响,出现培养基在管壁凝固形成不规则状,此为正常现象。DYS耶尔森菌琼脂培养皿
GC肉汤基础用于致病性奈瑟氏菌的分离,每100ml添加IsoVitaleX添加剂、V-C-N抑菌剂、无菌血红蛋白粉各1支 。SDA+0.25%青霉素酶预装培养皿
牛津琼脂(OXA)基础是一种用于分离培养李斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)的选择性培养基。它的成分包括特殊蛋白胨、可溶性淀粉、氯化钠、七叶苷、柠檬酸铁铵、氯化锂和琼脂等,pH值控制在7.0±0.2(25℃)。**特点**:1.**选择性**:含有氯化锂和抗生物质添加剂(如多粘菌素E、放线菌酮、吖啶黄素、头孢双硫唑甲氧、磷霉素),这些成分能够抑制革兰氏阴性菌和大多数革兰氏阳性菌的生长,特别是非李斯特氏菌。2.**应用**:主要用于食品、水和污水样本中李斯特氏菌的选择性分离培养,符合ISO和SN标准。3.**配制方法**:通常称取5.85g的OXA基础粉末,溶解在100mL蒸馏水中,高压灭菌15分钟后冷却至50℃,再加入配套的添加剂,混匀后倾入无菌平皿备用。4.**结果观察**:李斯特氏菌在OXA培养基上生长时,会形成黑色菌落,并且菌落周围可能有黑色环。牛津琼脂基础因其高选择性和特异性,是检测食品和水样本中李斯特氏菌污染的重要工具。SDA+0.25%青霉素酶预装培养皿