脱氧腺苷三磷酸(Deoxyadenosinetriphosphate,dATP)是一种去氧核苷酸三磷酸,它是DNA合成和复制过程中必需的原料之一。dATP的结构与腺苷三磷酸(ATP)相似,但dATP的五碳糖2号碳上缺少一个-OH基,取而代之的是一个氢原子。dATP是四种dNTPs(脱氧核糖核苷酸三磷酸)之一,四种dNTPs包括dATP、dCTP、dGTP和dTTP,它们分别对应DNA中的腺嘌呤、胞嘧啶、鸟嘌呤和胸腺嘧啶。dATP的化学式为C10H16N5O12P3,分子量为491.182,CAS登录号为1927-31-7。在实验室中,dATP通常以100mM的浓度提供,用于各种分子生物学技术,如PCR、DNA测序和分子克隆技术。dATP溶液需要在低温条件下保存,通常是-20℃,以保持其稳定性和活性。在DNA测序中,dATP与ddATP一起使用,ddATP是dATP的衍生物,它缺少3'-OH基团,用于Sanger测序中的链终止反应。在PCR中,dATP作为DNA聚合酶的底物,用于合成新的DNA链。dNTPs的浓度在PCR反应中非常重要,适当的浓度有助于减少错配和提高扩增效率。通常,四种dNTPs以等浓度混合使用,以减少PCR过程中的错配误差。在某些情况下,根据目标序列的长度和组成,可能需要调整dNTPs的浓度,以优化PCR反应。在基因编辑中,Pfu DNA Polymerase 可用于目的基因或编辑工具的克隆,减少克隆过程中的非目标突变。Recombinant Canine TAG-72 Protein,His Tag
Benzonase核酸酶残留检测试剂盒的组分经过优化,以确保高灵敏度、高重复性和高准确性的检测结果。以下是该试剂盒优化的组分:1.**2×BenzDetectionSolution**:这是检测中的关键组分,用于提供反应所需的缓冲环境,规格为1mL。2.**标准品**:试剂盒中包含多个浓度的标准品,包括25ng/ml、12.5ng/ml、6.3ng/ml、3.1ng/ml和1.5ng/ml的标准品,各100μL。这些标准品用于建立标准曲线,从而准确计算出样品中的Benzonase残留量。3.**样品稀释液**:提供1.5mL的样品稀释液,用于适当稀释待检测样品,以适应检测范围。4.**反应缓冲液(10XReactionBuffer)**:用于调整反应体系的pH值和离子强度,保证酶活的正常发挥。5.**Benzonase底物(5XBenzonaseSubstrate)**:这是含有荧光标记的DNA探针,用于检测Benzonase的活性。当底物被Benzonase切割后,荧光信号增强,从而可以检测到Benzonase的存在。6.**无核酸酶水(Nuclease-freeWater)**:确保在稀释和样品准备过程中不会引入额外的核酸酶污染。Recombinant Cynomolgus Siglec-15/CD33L3 Protein,His-Avi Tag在一项研究中,比较了具有不同NLS融合的Cas9蛋白和Cas9 mRNA在斑马鱼基因组编辑中的效率。
T4UvsX重组酶是一种来源于T4噬菌体的酶,它是RecA/Rad51家族的同源体。这种重组酶在双链DNA断裂的修复和复制叉重新启动的过程中起到重要作用。T4UvsX重组酶可以通过与其他DNA结合蛋白或辅助因子一起与单链DNA形成核酸蛋白复合物,并通过寻找与靶标DNA的互补区域进行杂交,以完成链置换反应。此外,T4UvsX重组酶在生产时由大肠杆菌表达和纯化。T4UvsX重组酶的产生过程涉及到基因工程和蛋白质表达的常规技术。首先,T4噬菌体的基因序列被识别并克隆到适合的表达载体中,然后这个载体被转化到大肠杆菌宿主细胞中。在宿主细胞内,T4UvsX基因被转录和翻译,产生重组酶蛋白。随后,通过一系列步骤包括细胞培养、蛋白质表达、细胞裂解、蛋白质纯化等,获得所需的T4UvsX重组酶。这一过程通常在生物技术实验室中进行,并且需要精确的分子生物学操作和蛋白质工程知识。
dNTPMix(脱氧核苷酸三磷酸混合溶液)的"特异性"一词在不同的上下文中可能有不同的含义。在分子生物学领域,特异性通常指的是分子识别和相互作用的精确性。对于dNTPMix,特异性可以指以下几个方面:1.**碱基特异性**:dNTPMix包含四种dNTPs(dATP、dCTP、dGTP、dTTP),每种对应DNA中的一个特定碱基。在DNA合成过程中,DNA聚合酶确保只有正确的互补dNTP与模板链上的碱基配对,这体现了碱基配对的特异性。2.**酶特异性**:某些DNA聚合酶具有校正(proofreading)功能,它们可以识别并修正配对错误,提高DNA合成的特异性。3.**应用特异性**:dNTPMix可以为特定的DNA合成应用提供所需的所有四种核苷酸,例如PCR、cDNA合成、DNA测序等。不同的应用可能需要特定的dNTP浓度或配方。4.**质量控制特异性**:dNTPMix在生产过程中会进行质量控制,以确保没有杂质、DNase和RNase污染,保证产品在实验中的特异性表现。5.**稳定性和纯度特异性**:dNTPMix的稳定性和纯度(通常≥99%)对于实验的成功至关重要,高纯度的dNTPMix可以减少非特异性反应的发生。6.**反应条件特异性**:使用dNTPMix时,需要考虑反应条件的特异性,如Mg2+浓度、pH值、温度等,这些条件都会影响DNA合成的特异性。利用His标签通过亲和层析从细胞裂解物中纯化目标蛋白,然后可能通过离子交换层析、等方法进一步提纯。
磁珠本身并不直接参与电泳过程,但它们可以用于电泳后的样品处理,特别是在核酸(DNA或RNA)的提取和纯化过程中。以下是使用磁珠进行电泳后样品处理的一般步骤:1.**凝胶电泳**:-首先,将DNA或RNA样品通过凝胶电泳进行分离。凝胶通常是琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶,根据样品的大小和类型选择合适的凝胶浓度和缓冲体系。2.**观察和切割**:-电泳完成后,使用紫外线照射凝胶并使用适当的染料(如EB或SYBRGreen)对DNA或RNA进行染色,以在紫外光下观察到DNA或RNA的条带。3.**样品提取**:-确定目标DNA或RNA条带后,使用干净的工具(如切割器或移液枪)从凝胶中切割出含有目标分子的凝胶片段。4.**磁珠准备**:-根据磁珠试剂盒的说明书,准备磁珠。通常包括磁珠的重悬和可能的表面修饰,以确保它们能够特异性地结合目标核酸。5.**样品与磁珠混合**:-将切割出的凝胶片段转移到含有磁珠的溶液中,温和地混合以促进磁珠与核酸的结合。6.**磁分离**:-将含有磁珠和核酸的混合物置于磁分离架上,利用磁场使磁珠快速聚集在管底,从而实现与溶液的分离。7.**洗涤**:-移除未结合的溶液,向磁珠上加入洗涤液,再次进行磁分离以去除杂质。牛痘DNA拓扑异构酶I具有解超螺旋的活性,可以解开双链闭合环状DNA的超螺旋结构,便于后续的酶切反应。GoldenView 吖啶橙核酸染料
在基因编辑过程中,Pfu DNA Polymerase 可用于合成高质量的单链或双链DNA修复模板。Recombinant Canine TAG-72 Protein,His Tag
Lambda核酸外切酶的活性表现在其高度特异性和过程性地消化5'端磷酸化的双链DNA。以下是一些关键点,描述了Lambda核酸外切酶的活性特征:1.**高度过程性(HighlyProcessive)**:Lambda核酸外切酶是一种高度过程性的5'→3'外切酶,这意味着它能够连续消化多个核苷酸,而不需要在每一步之后重新结合底物。2.**底物特异性(SubstrateSpecificity)**:该酶选择性地消化5'端磷酸化的双链DNA链,对单链DNA和非磷酸化DNA表现出低活性。3.**活性定义(ActivityDefinition)**:一个活性单位定义为在37°C下,30分钟内在50μl反应体积中,使用1XLambdaExonucleaseReactionBuffer和1μg声波破碎的双链[3H]-DNA底物,产生10nmol酸溶性脱氧核苷酸所需的酶量。4.**反应条件(ReactionConditions)**:通常在37°C下进行孵育,使用1XLambdaExonucleaseReactionBuffer,该缓冲液包含67mMGlycine-KOH,2.5mMMgCl2,50µg/mlBSA,pH值为9.4。5.**热失活(HeatInactivation)**:通过在75°C下加热10分钟可以使Lambda核酸外切酶失活。6.**特定活性(SpecificActivity)**:Lambda核酸外切酶的特定活性为50,000单位/毫克蛋白。
Probe qPCR Mix (2×, Low ROX):高特异性与低背景校正的qPCR解决方案Probe qPCR Mix (2×, Low ROX) 是一种为探针法实时荧光定量PCR(qPCR)设计的即用型预混液,适用于需要低浓度ROX校正染料的qPCR仪器。该预混液结合了热启动Taq DNA聚合酶、优化的反应缓冲液、dNTPs以及低浓度ROX,能够实现高效、特异的基因定量检测。产品特点高特异性和灵敏度:采用抗体修饰的热启动Taq DNA聚合酶,有效减少非特异性扩增,提高检测灵敏度。低浓度ROX校正:适用于需要低浓度ROX作为校正染料的qPCR仪器,如ABI 7500、ViiA 7、Qua...