在制备培养基时,需要考虑如何选用合适的生化剂来适应实验要求、生物特性和研究目的等不同因素。不同类型的培养基需要添加不同种类的生化剂,这些剂在保证培养基无菌性的同时,还能为细胞和微生物的生长、繁殖提供必要的生长因子、维生素等物质。细胞和微生物的生长、繁殖还需要考虑一些物理条件,如温度、湿度、气体含量和pH等。不同类型的细胞和微生物对这些条件有不同的适应性,因此在制备培养基时,必须对这些因素进行适当的调节和控制,以确保细胞和微生物能够存活和繁殖。在制备培养基时,还需要遵循一些生物学原则。这些原则包括处理培养液过程中的显微镜检查、病毒消毒、无菌实验等方面,保证培养液安全并完全符合生物实验要求。使用液体培养基时,需要正确计量添加适量的生理盐水、葡萄糖和其他化学试剂。尿素肉汤基础
培养基中营养物质浓度合适时微生物才能生长良好,营养物质浓度过低时不能满足微生物正常生长所需,浓度过高时则可能对微生物生长起抑制作用,例如高浓度糖类物质、无机盐、重金属离子等不只不能维持和促进微生物的生长,反而起到抑菌或杀菌作用。另外,培养基中各营养物质之间的浓度配比也直接影响微生物的生长繁殖和(或)代谢产物的形成和积累,其中碳氮比(C/N)的影响较大。严格地讲,碳氮比指培养基中碳元素与氮元素的物质的量比值,有时也指培养基中还原糖与粗蛋白之比。例如,在利用微生物发酵生产谷氨酸的过程中,培养基碳氮比为4/1时,菌体大量繁殖,谷氨酸积累少;当培养基碳氮比为3/1时,菌体繁殖受到抑制,谷氨酸产量则大量增加。再如,在维生素发酵生产过程中,可以通过控制培养基中碳源与迟效氮(或碳)源之间的比例来控制菌体生长与维生素的合成协调。碳酸钠溶液培养基类型和配方可以根据需要进行定制,以满足特定的实验需求。
基础培养基:含有基础生长所需的基本营养成分,较常用的是肉浸液,俗称肉汤,主要成分含牛肉浸液和蛋白胨。基础培养基普遍用于细菌的增菌、检验,也是制备其他培养基的基础成分。营养培养基:在基础培养基中可加入葡萄糖、血液、生长因子等特殊成分,供营养要求较高的细菌和需要特殊生长因子的细菌生长。较常用的是血琼脂平板、巧克力血平板等。特殊培养基:包括厌氧培养基和细菌L型培养基等。前者是培养专性厌氧菌的培养基,除含营养成分外,还加入还原剂以降低培养基的氧化还原电势,如疱肉培养基、巯基乙醇酸钠培养基等。后者是针对细胞壁缺损的细菌L型,由于胞内渗透压较高,故培养基必须采用高渗低琼脂培养基。
天然培养基是指一类利用动物、植物或微生物体包括其提取物制成的培养基。例如。牛肉膏蛋白胨培养基、麦芽汁培养基和LB培养基等。常用的天然有机营养物质包括豆芽汁、玉米粉、土壤浸液、麸皮、牛奶、血清、椰子汁等。天然培养基成本较低,除在实验室经常使用外,也适于用来进行工业上大规模的微生物发酵生产。合成培养基是根据天然培养基的成分,用化学物质模拟合成、人工设计而配制的培养基。例如。高氏1号培养基和查氏培养基等。合成培养基有一定的配方,配制合成培养基时重复性强,但与天然培养基相比其成本较高,微生物在其中生长速度较慢,一般适于在实验室用来进行有关微生物营养需求、代谢、分类鉴定、生物量测定、菌种选育及遗传分析等方面的研究工作。培养基是一种供养分离的微生物和生物样品的营养物质基质。
在进行培养基pH值调节时,需要注意以下几点:在使用pH调节剂时,必须小心操作,以免皮肤和眼睛受到伤害。操作时应保持培养环境的清洁和卫生,避免受到污染。制备培养基时,应按照制备流程和比例添加化合物和添加剂。对于不同类型的细胞和微生物,需要根据其生长和繁殖的需求,选择合适的pH值范围。调节培养基pH值需要以下步骤:测量培养基的初始 pH 值。根据需要,添加 p H 调节剂或缓冲液来调节 pH 值。使用 pH 检测仪再次测量 pH 值,直到达到所需的 pH 值范围。确认 pH 值控制稳定后,开始进行实验或培养。半固态培养基是一种介于液态培养基和固体培养基之间的混合形式,常用于筛选微生物菌株。沙堡液体培养基 GB
人工合成基因可以在特定的培养基中得到表达,需要选择含有适当营养物质的培养基。尿素肉汤基础
干粉培养基是一种在体积很小的瓶子里包含了原材料、微量元素和保持pH缓冲液的粉末状态培养基。因其干燥的特点,具有很长时间的保存期限,在良好的保存环境下,可以达到数年乃至十年的保存。这使得干粉培养基非常适合涉及多个实验、多个批次的工作。干粉培养基只需要在配制时加入一定的水,就可以得到所需的液体培养基,降低了配制的难度和操作的复杂度。这种方法避免了由于不同配制批次需要不同的调整,从而导致实验结果的上下波动的情况。干粉培养基的优点之一是可以自由调整,根据需要添加不同的成分,达到特定实验目的的需要。例如,添加具有特定作用的内分泌物质,如去氧地酸、细胞因子等,可以促进细胞增殖或发育。此外,通过添加一些抑菌物质,如维生素或其他抑菌剂,可以有效地抑制不需要的微生物污染。尿素肉汤基础