不同的研究目的需要不同种类的培养基。例如,对于细胞的生化实验,需要使用无血清(serum-free)培养基,以避免血清中对实验结果造成的干扰;而在进行免疫细胞培养时,需要使用低血清(low-serum)培养基,以保证免疫活性。此外,在一些特定的研究领域中,需要使用小份量培养基、无菌培养基或其他特殊处理的培养基。实验室的环境也会对培养基的选择产生影响。例如,高温、高湿度或高气压等极端环境下,需要选择相应的抗旱、抗热或抗氧化的培养基,以确保实验的成功。此外,在空气中存在大量的微生物和气溶胶时,为避免微生物的污染,需要使用低菌量的培养基或实验室级别的干扰者。固体培养基则通过向液态培养基中加入凝胶剂来制成,以便在培养过程中提供可视化定位细胞的单元。6.5%氯化钠肉汤
预装培养基主要由以下成分组成:碳水化合物:如葡萄糖、半乳糖等。这些为微生物提供能源,帮助它们进行代谢和生长。氮源:如胨、氨基酸等。氮是微生物制造细胞壁和核酸的重要营养成分之一,也是蛋白质的主要组成部分。磷酸盐:如二氢磷酸钠和三钠磷酸等。这些物质含有的磷是组成核酸的重要成分之一,还能促进细菌的生长。硫酸盐:如硫酸钠、硫酸镁等。这些物质主要是为了促进微生物生长所需的微量元素的吸收,如铁离子、镁离子等。镁盐:如氯化镁、硫酸镁等。镁离子是生物体内许多重要酶的活性离子,可以帮助微生物进行代谢反应,同时也是良好的缓冲体系的组成部分。10%醋酸铅溶液在选择培养基之前,必须注意其抗性、生长速度和生长环境。
干粉培养基的制备首先需要准备所需的原材料。不同的干粉培养基制备方法可能需要不同的原材料,但大多数情况下都需要葡萄糖、胰蛋白酶胨、酵母提取物等基础成分。此外,还需要添加一些其他成分来满足特定实验需求,如氨基酸、维生素、某些特定类型的糖类等。在保持实验环境干净卫生的前提下,开始称量所需原材料。称量时应注意不同成分的比例和用量,确保配方的准确性。称量完毕后,将所有原材料放入搅拌桶中进行混合。混合时应充分搅拌,直到所有成分混合均匀。
干粉培养基是指干燥形态的培养基,通常需要加入适量的水或其他溶液以制成使用液体。干粉培养基通常包括可溶性和不溶性成分两种。其中可溶性成分为微生物和细菌等生物的生长提供必要的营养,而不溶性成分则为细胞提供支撑和保护作用。常见的干粉培养基包括TrypticSoyBroth(TSB)培养基、LB培养基、NutrientBroth(NB)培养基等。这些培养基通常需要在pH7.0-7.4之间保持稳定的酸碱度,并在适宜的温度和湿度下保存以确保培养基的质量。液体培养基通常是以水为基础配制而成的,或加入适量的薄荷醇等物质以调节酸碱度和渗透压等。与干粉培养基不同的是,液体培养基通常较少使用不溶性物质,而是依赖于水的流动性和原生质体膜的稳定性。液体培养基制备起来相对容易,且通常不需要使用过多的手段和工具即可获得较好的培养基。常见的液体培养基包括TSB液体培养基、LB液体培养基、Hanks培养基等。Hugh-Leifson培养基(O/F试验用)HL培养基 葡萄糖铵培养基 营养半固体琼脂(NSA) Rustigian氏尿素培养液。
培养基中营养物质浓度合适时微生物才能生长良好,营养物质浓度过低时不能满足微生物正常生长所需,浓度过高时则可能对微生物生长起抑制作用,例如高浓度糖类物质、无机盐、重金属离子等不只不能维持和促进微生物的生长,反而起到抑菌或杀菌作用。另外,培养基中各营养物质之间的浓度配比也直接影响微生物的生长繁殖和(或)代谢产物的形成和积累,其中碳氮比(C/N)的影响较大。严格地讲,碳氮比指培养基中碳元素与氮元素的物质的量比值,有时也指培养基中还原糖与粗蛋白之比。例如,在利用微生物发酵生产谷氨酸的过程中,培养基碳氮比为4/1时,菌体大量繁殖,谷氨酸积累少;当培养基碳氮比为3/1时,菌体繁殖受到抑制,谷氨酸产量则大量增加。再如,在维生素发酵生产过程中,可以通过控制培养基中碳源与迟效氮(或碳)源之间的比例来控制菌体生长与维生素的合成协调。有些细胞需要在低温下培养,这时需要特殊的培养基。富集培养基
使用干粉培养基需要添加适量的生理盐水、葡萄糖和其他化学试剂。6.5%氯化钠肉汤
在制备培养基的过程中,安全是第1原则。要保证培养基的无菌性、无致病性、无致变性,避免应用医疗性维生素、肽聚糖、半合成血清等,以避免在细胞培养等实验过程中产生的杂菌和微生物的病变,对实验过程的准确性和可靠性产生不利影响。培养基中含有营养成分,必须考虑基本食物成分(水、碳水化合物、蛋白质、脂肪、维生素、微量元素等)作为通用要素。不同类型的生物需要不同的营养成分,因此在制备培养基时必须注意保证各种营养成分的均衡和充足,以确保生物体生长、繁殖的需要和生理上的健康状况。6.5%氯化钠肉汤