预装培养基是一种快速而方便的微生物培养技术,通常在无菌的纸板或管中提供。它们已经含有必要的营养成分,可以直接使用于微生物,从而将实验室的培养基制备时间从几个小时缩短到几分钟。此外,预装培养基通常具有长期的稳定性,可以存储数月甚至数年而不影响到较终的微生物培养结果。虽然预装培养基可以提供必要的营养成分,但它们不能提供微生物所需要的所有物质。一些微生物需要特定的营养成分,如果预装培养基缺少这些必要成分,它们将无法生长和繁殖。此外,某些微生物需要特定的肥料和环境条件来繁殖,而预装培养基通常无法满足这些要求。固体培养基包括琼脂或血琼脂,它们的主要作用是提供一个支撑基质以帮助细胞滋生。营养盐琼脂(ASTM)
在保存干粉培养基时还需要注意以下注意事项:尽可能缩减干粉培养基长时间不间断存储。因为长时间不使用,尤其是室温下,会受到光照、湿度等自然环境的影响,温湿度波动,会产生不稳定的物理与化学效应,导致化学反应发生,细菌及其他微生物生长。在保存时使用密封包装进行,使其隔绝空气和水分及其他微生物的进入。及时检查干粉培养基的保质期,避免超过保质期的使用,影响实验结果。准确记录干粉培养基的配方,标签上应说明干粉培养基的名称、生产日期、有效期,混合使用指导,以方便日后使用。肠球菌推定肉汤(EP肉汤)胰蛋白酶大豆琼脂(TSA) TGE肉汤(含TTC) 四号琼脂基础/4号琼脂基础 O/F试验用培养基(HLGB)。
使用过的预装培养基必须被按照正确的程序处理和处置。这意味着必须将预装培养基放置在专门用于处理微生物培养垃圾的容器中。这些容器通常是极度防护的,以避免包含在培养基中的微生物穿透到周围的环境中。在放入容器之前,预装培养基建议以封闭方式分装,以避免可能包含在其中的微生物侵入周围环境中。此外,使用过的预装培养基应该如实记录,以便跟踪以确定实验过程中是否出现任何异常结果。在处理使用过的预装培养基时,必须严格遵守实验室的安全和卫生标准。这包括穿戴适当的防护服、口罩和手套等防护用品。建议逐层穿戴,从内到外,以确保较大限度地减少微生物的扩散。在处理过程中,必须避免任何可能导致污染或扩散微生物的行为。应定期清洗处理容器和其他设备,以确保卫生和安全标准较大化。
生长基(也称为普遍培养基,Nutrient Agar)是较常用的预装培养基之一,由肉汤、酵母提取物和琼脂组成,其中肉汤作为氮源,酵母提取物是有机碳源,琼脂则提供了基础结构。这种培养基适用于大多数微生物的生长,可用于分离和纯化菌落。微生物筛选基涵盖了不同类型的预装培养基,例如:MacConkey Agar、Eosin Methylene Blue Agar(EMB)、Sabouraud Agar等等。这些培养基是为了筛选或区别不同类型的微生物而设计的,比如MacConkey Agar用于筛选革兰氏阴性杆菌,EMB用于筛选带有发酵代谢特征的细菌,而Sabouraud Agar则是用于细菌的培养。特定微生物培养基是为了培养和分离特定微生物而设计的,比如:Thayer Martin Agar是专门用于淋球菌的培养基,Lowenstein Jensen Agar是用于结核分枝杆菌的培养基。因为这些特定微生物通常较为难培养,所以特定的培养基在选择上尤为重要。液体培养基的配方和制备方法不同于干粉培养基,需要在满足卫生标准和生物安全操作指南的情况下进行。
干粉培养基的组成:干粉培养基通常由基础草料、营养(或培养)成分、缓冲剂、指示剂、氨基酸、维生素和其他有机化合物等组成。具体成分的选择和比例取决于所需培养的微生物类型和生长条件。基础草料通常由各种蛋白质来源(如动物肌肉、黄豆、酵母等)组成,提供微生物生长所需的碳、氮、磷、硫、镁、铁等元素。营养(或培养)成分则包括转化碳源、氮源、磷酸盐、微量元素等,是培养基的主要能量源和合成原料。缓冲剂用于维持培养基的 pH 值稳定,适当的 pH 值对于微生物生长和代谢至关重要。指示剂常用于检测微生物在培养基中的生长和代谢情况,如酚红、溴蓝、氧化亚铁等。氨基酸和维生素等是微生物在生长过程中所需的营养物质,能够促进微生物的代谢和生长。黄色布氏菌芽孢杆菌常用的培养基为营养琼脂平板培养基。硫酸盐还原菌培养基B
液体培养基的质量可以通过酚红试纸测试进行检测,从而确定其pH值和酸碱度是否适当。营养盐琼脂(ASTM)
干粉培养基在制备时需要先和水或其他液体混合,然后通过加热灭菌的方式进行消毒。在此之后,干粉培养基中的微生物都已经被有效地杀死。但是,如果在制备过程中或存储时破坏了其消毒状态,就可能对实验的结果产生负面的影响。因此,为了保证干粉培养基的消毒状态,通常也需要进行消毒处理。消毒干粉培养基的方法有许多种,比较常见的方法是用酒精喷雾消毒和紫外线消毒。使用酒精喷雾可以有效地消灭表面上的细菌和病毒,但是对于深层的细菌和孢子等微生物则不具有很好的杀菌作用。因此,对于已经受到外界环境污染的干粉培养基,通常还需要通过其他消毒手段进行消毒,以有效杀死内部细菌和病毒等。营养盐琼脂(ASTM)