EdU细胞增殖检测试剂盒BeyoClick™ EdU细胞增殖检测试剂盒(DAB法)(BeyoClick™ EdU Cell Proliferation Kit with DAB)，是一种基于DNA合成过程中胸腺嘧啶脱氧核苷(thymidine)类似物EdU(5-ethynyl-2' -deoxyuridine)的掺入，并通过随后的点击反应(Click reaction)使EdU被生物素(Biotin)所标记，然后加入的辣根过氧化物酶标记链霉亲和素(HRP-Streptavidin)与生物素结合，再然后通过DAB显色，从而实现简单、快速、高灵敏地检测细胞增殖的试剂盒。EdU细胞增殖检测试剂盒在社会上的重要性。安徽EdU细胞增殖检测试剂盒价格
EdU法中的点击反应原理图。掺入到细胞DNA中的EdU与荧光探针或生物素等标记的叠氮化物，在铜离子的催化下发生共价反应，形成稳定的三唑环，使细胞DNA标记上荧光探针或生物素。细胞增殖检测是评估细胞活性、遗传毒性及抗药物效果等的基础实验手段。细胞增殖检测的方法按照原理通常可以分为五类：膜损伤检测、代谢活性检测、ATP水平测定、DNA合成检测和细胞荧光标记检测法。目前公认的精确的检测细胞增殖的方法是直接检测细胞中DNA的合成北京品质好的EdU细胞增殖检测试剂盒公司上海哪家EdU细胞增殖检测试剂盒厂家值得信赖？
EdU细胞增殖检测试剂盒通过基于EdU与荧光染料的特异性共轭反应，把荧光集团标记到新合成的含有EdU的DNA上面，这样就可以进行高效快速的检测出DNA复制活性，广泛应用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA损伤修复等方面的研究。传统的免疫荧光染色(BrdU)检测方法需要DNA变性、抗原修复、抗原抗体过夜孵育等复杂繁琐的操作步骤。而EdU检测方法不需要剧烈的DNA变性，只需温和的细胞固定化和透化处理，能够较好地保护细胞形态、DNA整体结构及细胞内抗原识别位点，操作步骤更加快速、灵敏和准确。EdU与胸腺嘧啶(T)结构非常相似，而EdU染料大小只有BrdU抗体的1/500,在细胞内很容易扩散，无需DNA变性(酸解、热解、酶解等)，可有效避免样品损伤，而且无需抗原抗体反应，能在细胞和组织水平更快速便捷地反映DNA复制活性。
EdU上的乙炔基能与生物素标记的叠氮化物(Biotinlabeledazide)通过一价铜离子的催化发生共价反应，形成稳定的三唑环，该反应非常迅速，被称作点击反应(Clickreaction)，其反应原理参见图1。通过点击反应，新合成的DNA会被相应的生物素探针所标记，从而可以使用适当的检测设备检测到增殖的细胞。EdU检测法中的点击反应(Clickreaction)原理图。生物素或荧光探针等标记的叠氮化物(LabeledAzide)与掺入到细胞DNA中的EdU，在铜离子的催化发生共价反应，形成稳定的三唑环，终使细胞DNA标记上生物素等探针。EdU细胞增殖检测试剂盒应用再哪些地方？
但该方法由于有放射性污染并且很难实现单细胞检测而受到很大的限制，随后逐渐被基于抗体检测的BrdU(bromo-deoxyuridine)法所替代。BrdU法步骤繁多，且需要使用BrdU抗体，影响因素较多，稳定性比较差。并且由于BrdU法需要使用抗体，有时会和其它目的蛋白基于抗体的检测相互产生干扰。EdU法基于EdU掺入和后续的点击反应，无需使用抗体、操作便捷、检测灵敏度高，是一种在BrdU法基础上升级换代的新方法，将会逐步取代BrdU法。MTT法(C0009)、WST-1法(C0035、C0036)、CCK-8法(C0037、C0038、C0039、C0040、C0041、C0042、C0043、C0046)和CellTiter-Lumi™化学发光法(C0065、C0068)都是基于细胞活性的细胞增殖检测方法，能检测到细胞的总体增殖效果，但无法检测到单个的增殖细胞。使用EdU细胞增殖检测试剂盒到底有什么好处？湖北品质好的EdU细胞增殖检测试剂盒购买
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细胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛细胞固定液，室温培养30分钟，弃固定液；(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸，摇床孵育5分钟，以中和过量的多聚甲醛；(c)弃甘氨酸溶液，每孔加入300ulPBS洗液，室温清洗5分钟；(d)每孔加入300ul0.5%TritonX-100细胞通透液，室温通透10分钟，弃细胞通透溶液；(e)每孔加入300ulPBS洗液，室温清洗5分钟；该产品是采用成像检测方法对贴壁细胞进行检测，适用于荧光显微镜、共聚焦显微镜等仪器。非贴壁细胞可在孵育EdU后进行细胞涂片处理，固定后再采用贴壁细胞的染色流程进行检测。也可以应用于流式细胞仪检测。安徽EdU细胞增殖检测试剂盒价格
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【详情】EdU与T非常相似，而EdU染料只有BrdU抗体的1/500，在细胞内很容易扩散，无需DNA变性（酸...
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【详情】注：1）培养时间取决于细胞的增殖速度和生长状态；2）孵育时间至少2小时，可延长至24小时后再...
【详情】4%多聚甲醛固定液或冷**固定液(-20℃预冷20min)。d,封闭液。e,／LPBS缓冲液...
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【详情】EdU标记(a)将细胞完全培养基中按照500:1的比例加入EdU溶液，制成2xEdU标记培养基；(b...
【详情】更准确--无需DNA变性(酸解、热解、酶解等)，可有效避免变性带来的样品损伤，确保细胞核边缘清晰完整...
【详情】使用本试剂盒所做结果可以用荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、流式细胞仪或荧光酶标仪进行检测，也可以用于高...
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