cns,pirb的功能和下游抑制性信号通路仍然未被阐明,因此迫切需要pirb的细胞和动物模型。目前对于pirb基因功能的研究,多采用可溶性的pirb的胞外段(pirbextracellularpeptide,pep)和抑制剂,或者采用慢病毒转染。前者受到是否能够透过血脑屏障和抑制剂效率的影响,后者慢病毒转染在原代细胞和在体的转染效率比较低,使研究pirb的功能受到极大的限制。为解决这些问题,我们通过crispr/cas9技术建立了pirb基因敲入小鼠,将pirb基因敲入c57bl/6j的rosa26位点,为研究pirb在免疫系统或者神经系统的作用和机制提供了很好的工具。技术实现要素:本发明的目的在于提供pirb基因敲入的小鼠动物模型。小鼠疾病模型有助于遗传性疾病致病基因的发现与验证。江苏疾病动物模型建模供应商
配制成2mg/kg顺铂注射液,按照10ml/kg连续腹腔注射7天。实施例2:建立大鼠卵巢早衰模型步骤如下:将%氯化钠溶液(齐鲁制药,批号:aa1a8029a)中,配制成3mg/kg顺铂注射液,按照10ml/kg连续腹腔注射7天。实施例3建立大鼠卵巢早衰模型步骤如下:将%氯化钠溶液25ml加入规格为10mg的医用顺铂(齐鲁制药,批号:aa1a8029a)中,配制成4mg/kg顺铂注射液,按照10ml/kg分别在***天及第八天腹腔注射。实施例4:建立大鼠卵巢早衰模型步骤如下:将%氯化钠溶液(齐鲁制药,批号:aa1a8029a)中。南京疾病动物模型建模能够准确模拟人相关特定功能与疾病特征。
pcrmix:反应条件:pcr扩增产物的电泳鉴定结果如图3所示,从图3中可以看出,6、8、9号为pirb基因敲入小鼠在、,wt小鼠pcr产物没有这两个扩增产物。(c)短链pcr反应,引物如下:primers(℃):forwardprimer(f4):5’-aacaatcaggctgccgaatctg-3’reverseprimer(r4):5’-ctttattagccagaagtcagatgc-3’expectedpcrproduct:targetedallele:344bppirb基因敲入型小鼠能够扩增出344bp的产物,而野生型没有。pcr体系:反应条件:(2)f1代小鼠测序:通过pcr扩增后测序鉴定小鼠基因型,如图4所示,为6号pirb基因敲入小鼠测序峰图,pcr所用引物如下:sequencingprimerforpcrproduct1:5’sequenceprimer(f3):5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’sequencingprimerforpcrproduct2:3’sequenceprimer(r3):5’-atactccgaggcggatcacaa-3’(3)southern杂交检测f1代小鼠基因型:采用bamhi和avrii核酸内切酶切割dna分子,切割示意图如图5。具体的southern杂交检测过程如下:步骤a、提取f1代小鼠尾部dna;步骤b、制备探针,通过pcr方法将dig-dutp渗入到步骤a的dna分子中。
动物模型编辑添加义项名B添加义项?所属类别:经济理论动物疾病模型主要用于实验生理学、实验病理学和实验学(包括新药筛选)研究。人类疾病的发展十分复杂,以人本身作为实验对象来深入探讨疾病发生机制,推动医药学的发展来之缓慢,临床积累的经验不仅在时间和空间上都存在局限性,而且许多实验在道义上和方法上也受到限制。而借助于动物模型的间接研究,可以有意识地改变那些在自然条件下不可能或不易排除的因素,以便更准确地观察模型的实验结果并与人类疾病进行比较研究,有助于更方便、更有效地认识人类疾病的发展规律验性动物模型是指研究者通过使用物理的、化学的和生物的致病因素作用于动物。
pirb的mrna和蛋白表达水平***增加。在cns,pirb是髓鞘抑制因子nogo-a、mag、omgp的受体,参与神经元突起芽发和生长锥塌陷,抑制神经元轴突再生和突触可塑性。pirb的细胞外免疫球蛋白结构域(d3-d6)介导了pirb与nogoa的结合。近年来关于阿尔茨海默病(alzheimer’sdisease,ad)研究还发现,pirb是aβ42寡聚体的高亲和力受体,亲和力达到纳摩尔水平。pirb的前两个细胞外免疫球蛋白结构域(d1-d2)介导了aβ42寡聚体和pirb的相互作用,导致丝切蛋白(cofilin)信号通路****组织化学染色结果发现。可以严格控制实验条件,增强实验材料的可比性。上海哪一家疾病动物模型建模
这类动物疾病模型是指各种疾病共同性的一些病理变化过程的模型。江苏疾病动物模型建模供应商
实验期间每天进行阴道涂片,观测动情周期变化。进一步地,检测***水平是指:检测雌***(e2)、促卵泡生长素(fsh)和促黄体生成素(lh)的水平。进一步地,检测对比卵巢重量是指:比较各组大鼠双侧卵巢脏器系数。进一步地,阴道涂片是指:采用阴道脱落细胞涂片法,使用染色剂为亚甲基蓝。本发明利用顺铂成功地建立了大鼠卵巢早衰模型,为基础研究建立稳定的卵巢早衰动物模型奠定了良好的基础。本发明使用的各种术语和短语具有本领域技术人员公知的一般含义。提及的术语和短语如有与公知含义不一致的,以本发明所表述的含义为准。附图说明图1:e2水平检测结果示意图。图2:fsh水平检测结果示意图。图3:lh水平检测结果示意图。图4:大鼠体重检测结果示意图。图5:大鼠卵巢重量统计示意图。图6:动情周期检测(光镜下10倍)示意图,其中,a、b、c、d依次为:动情前期,动情期,动情后期,动情间期。图7:he染色观察不同方法造模对卵泡形态的影响(光镜下10倍)示意图,其中,a、b、c、d依次为:空白组,2mg组,4mg组,6mg组。具体实施方式下面结合实施例对本发明作进一步的说明。然而,本发明的范围并不限于下述实施例。本领域的专业人员能够理解,在不背离本发明的精神和范围的前提下~江苏疾病动物模型建模供应商
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