斑马鱼作为模式生物的优势1、斑马鱼与哺乳动物生物结构与生理功能高度相似,实验结果可比性强。2、斑马鱼与人类基因同源性高达85%,信号传导通路基本近似。3、斑马鱼幼鱼通体透明,可直接观察多个组织和。4、实验周期短,通常实验1-5天能够完成。5、实验费用低,为鼠类实验费用的1/10到1/100。6、体积小,易观察,可实现高通量、高内涵及自动化分析。7、繁殖能力强,每对斑马鱼一次可产150-300枚,单组实验样本数量多。8、实验所需样品量小,毫克级样品即可完成实验。9、符合3R(替代、减少、优化)原则。10、获得欧美监管部门和跨国药食企业认可。斑马鱼为何适用于科研?环特生物安评
以下是多孔板实验的具体进程:1、准备实验设备和资料多孔板实验需求一个容器、一个多孔板、一些食物和一些斑马鱼幼鱼。容器应足够大,以包容多个斑马鱼幼鱼,但不要太大,以免影响幼鱼的行为。多孔板应该适合幼鱼的大小,而且可以放置在容器中。食物可以是小颗粒状的鱼食或其他恰当大小的食物。2、练习斑马鱼幼鱼在开端实验之前,需求练习斑马鱼幼鱼,以确保它们知道怎样通过多孔板来获得食物。为此,可以先将幼鱼放置在一个没有孔的板上,让它们学会在板上找到食物。之后,可以逐步增加孔的数量和大小,以练习幼鱼学会通过多孔板获取食物奖赏。3、开始试验:一旦幼鱼学会了如何经过多孔板获取食物奖赏,就能够开始正式的试验了。首先,将多孔板放置在容器的一端,并将食物放在多孔板的对面。然后将幼鱼放置在容器的另一端。幼鱼会测验经过多孔板来获得食物奖赏。如果幼鱼成功经过多孔板到达食物,则它们将获得食物奖赏。斑马鱼授权斑马鱼行为试验应该怎么去做啊?
报告基因选用GFP或RFP,**小启动子来自斑马鱼gata2基因;将上述载体与体外转录得到的Tol2转座酶的mRNA共同注射到斑马鱼的单细胞受精卵中,受精卵长大后成为founder;Founder外交(out-cross)得到F1代胚胎,从中挑选出对于报告基因具有组织特异性表达模式的胚胎,拍照记录后分类培养;F1长大后通过linker-mediatedPCR的方法鉴定对应于GFP(或RFP)表达图式的Tol2插入位点,并通过与已知基因组数据比较,对插入位点进行定位与分析;通过外交纯化得到转基因鱼,直至得到只含有单个插入品系的转基因鱼。
斑马鱼血管生成基因如血管内皮细胞生长因子(VEGF)、an-iopoietins、ephrions及相应受体与哺乳动物功能相似,而且斑马鱼血管系统及其对调节血管新生类药物的***反应与哺乳动物类似。另外斑马鱼胚胎在血液循环系统严重缺陷的情况下仍能存活,且胚胎透明,利用血管转基因荧光斑马鱼可以在24小时以内就定量评价药物的血管形成***作用。
与传统的鸡胚尿囊膜、小鼠角膜实验相比,斑马鱼更加便捷、快速、高效,而且结果定量分析的准确度更高。
目前多个出于临床试验阶段的抗血管生成靶向候选***药如SU5416、SU6668、TNP470、SU4312和AG1478等均对斑马鱼的血管形成有***的***效果。用斑马鱼筛选发现具有血管形成***活性的中***体化合物也有很多,如靛玉红、呋喃二烯等。 斑马鱼实验的常见问题。
1999年,Herbomel等在观察斑马鱼的巨噬细胞个体发育时发现,处于胚胎发育早期的斑马鱼巨噬细胞就具有对外源微生物大肠杆菌高效吞噬的能力。在受精30小时后,胚胎巨噬细胞就已经可以吞噬***血液内和局部组织中的外源微生物。当给非血液系统中注射大肠杆菌后,5小时后即可在局部被斑马鱼巨噬细胞***,且此时除了***局部的30——50个活化巨噬细胞外,血液中未接触病原体的巨噬细胞也同样表现出活化特性,这提示斑马鱼体内可能还存在与哺乳动物相类似的细胞因子或趋化因子系统。斑马鱼在工业实验室中常被用作毒理学检验。斑马鱼皮肤测试
为什么用斑马鱼做试验?环特生物安评
斑马鱼很容易在实验室饲养,一般3个月就可以达到生殖成熟期,雌鱼每次产卵200枚左右,一生可产卵数千枚,斑马鱼所产之卵经24小时即可胚胎发育成熟,仔鱼期只有1个月。更独特的是,斑马鱼的卵是透明的,整个胚胎发育在体外完成,也是透明的,这就使得人们不仅可以很容易得到胚胎,而且还可以在显微镜下直接观察斑马鱼胚胎发育的过程,不仅可作为脊椎动物模型来研究脊椎动物的胚胎发育过程,还是一种可用于人类疾病的研究的模式生物。环特生物安评
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