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疾病动物模型建模基本参数
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疾病动物模型建模企业商机

该模型能够帮助我们研究pirb基因在免疫系统和神经系统的功能以及下游的调节机制。本发明的另一目的在于提供上述小鼠动物模型的构建方法。本发明所采用的第一种技术方案是:pirb基因敲入的小鼠动物模型,包括确定pirb基因的待敲入的特异性靶位点grna1和grna2,将pirb基因敲入c57bl/6j小鼠的rosa26基因的内含子1内,所述grna1的基因序列如seqid**所示,grna2的基因序列如。本发明所采用的第二种技术方案为:pirb基因敲入的小鼠动物模型的构建方法,具体按照以下步骤实施:步骤1、基于crispr/cas9技术构建针对c57bl/6j小鼠rosa26基因的特异性grna1和grna2,grna1的基因序列如seqid**所示,grna2的基因序列如;步骤2、构建“cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya”基因盒打靶载体,将打靶载体进行线性化处理;步骤3、步骤2中将含有loxp位点打靶载体、步骤1中有活性的grna1和grna2与cas9蛋白共同注射进入**小鼠受精卵中,获得f0代小鼠;步骤4、将步骤3中性成熟的阳性f0小鼠分别与野生型鼠交配繁一代,获得f1代杂合子小鼠,通过pcr、测序和southern杂交确定动物基因型;步骤5、将步骤4获得的f1代杂合子小鼠近交获得f2代纯合子小鼠。疾病动物模型建模厂家。肺病疾病动物模型建模

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1、自发性**动物模型:未经人为处理;自然发生;自发性**的总体评价--动物自发性**的病因往往是由动物的遗传特性决定的与人痒的病因有较大距离。各动物**生长速度差异较大很难在限定时间内获得大量生长均匀的荷瘤动物(tumor-bearinganimals)。因此,自发性**动物模型很少在抗**药物的常规筛选中广泛应用。2、诱发性**动物模型:在实验条件下:使用致*物(carcinogens);诱发动物发生**animalmodelofinducedtumor)指使用致*因素(carcinogens)在实验条件下诱发动物发生**的动物模型,它是进行实验**学研究的常用方法。常用于验证可疑致*因素的作用也越来越多地应用干**发生机理的研究及防治效果的观察上,在**病因学、遗传学、生物学等方面的研究中有重要地位。由于诱发因素和条件可人为控制,诱发率远高于自然发病率故在**实验研究中优于自发瘤。用于诱发实验性**的动物种类很多,它们因种族不同而对相同致*因素有不同的反应性。常用的动物以哺乳动物为主,其中啮齿类动物的使用**多,应用**广,包括各种大鼠、小鼠、际鼠等。。黄浦区疾病动物模型建模价格广泛应用于药效评价、转化医学等医学前沿领域。

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1、动物模型名称:碱烧伤致角膜损伤大鼠模型2、实验动物种属:SD大鼠3、实验动物性别:雌雄不限4、实验动物年龄:成年5、实验动物体重:160-200g6、实验动物环境:SPF级,1、实验方法:氢氧化钠致大鼠角膜化学性损伤。大鼠用戊巴比妥钠腹腔注射麻醉,用干棉棒拭去结膜囊多余液体,将统一规格直径3mm的圆形滤纸片浸入1mol/LNaOH溶液中20s,饱和后取出置于干燥滤纸上1秒以吸去过多的碱液,将滤纸片贴敷于大鼠右眼角膜**90s后移去,立即用灭菌水冲洗结膜囊及角膜2min。2、检测标准:肉眼或裂隙灯下观察到角膜有损伤。

步骤i.将步骤h的吸附柱放入收集管,12000rpm离心2min。步骤j.吸附柱放到一个新的,在吸附柱膜**加入50~200μl灭菌水或者洗脱液,停留5min。(将无菌水或者洗脱液加热到65℃能够增加洗脱的得率)。步骤i.基因组dna定量,洗脱的基因组dna可以通过电泳鉴定。方法2:一种低成本基因组dna的粗提方法:步骤a.每只小鼠剪下一段尾巴(2-5mm),放入离心管中,加入100μl尾部消化缓冲液,注意不要剪尾太长;步骤b.将离心管及其内容物于56℃孵育过夜;步骤c.过夜后将离心管于98℃孵育13min,使蛋白酶k失活;步骤d.在微型离心机以**大转速旋转15min,上清直接用于pcr体系(每50μlpcr体系加入上清2μl)。尾消化缓冲液成分:50mmkcl10mmtris-hcl()%tritonx-100(b)长链pcr反应:长链引物:pcrprimers1(℃):扩增片段:5’armforwardprimer(f1):5’-tacgccacagggagtccaagaatg-3’5’kireverseprimer(r1):5’-gatggggagagtgaagcagaacg-3’pcrprimers2(℃):扩增片段:3’kiforwardprimer(f2):5’-ctgctgtccattccttattccatag-3’3’armreverseprimer(r2):5’-ctggaaatcaggctgcaaatctc-3’pirb基因敲除型有上述两条扩增片段,野生型等位基因没有扩增产物。早期阶段科学假说与疾病潜在药物治疗效果评价始于小鼠疾病模型构建及其实验室研究。

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1、动物模型名称:FSH联合HCG致超排怀孕小鼠模型2、实验动物种属:KM小鼠或NIH小鼠3、实验动物性别:雌性4、实验动物年龄:3~4周龄5、实验动物体重:16~18g6、实验动物环境:SPF级1、实验方法:注射用重组人促卵泡***(FSH)联合注射绒促性素(HCG)诱导。对雌鼠于按5IU/只腹腔注射50IU/mL的FSH溶液,注射46~48h后按5IU/只再腹腔注射50IU/mL的HCG溶液,并于注射HCG当天下午约16:00~17:00按雌雄鼠1:1合笼。次日早上检查雌鼠阴栓情况。2、检测标准:合笼后次日雌鼠检查出现阴栓,表明成功构建了超排怀孕小鼠模型。查阅已有的相关小鼠模型综述文献。徐汇区阿尔兹海默症疾病动物模型建模

明确研究疾病的独特资源确定小鼠疾病模型的初步选择。肺病疾病动物模型建模

1、动物模型名称:高脂饲料致高脂血症大鼠模型2、实验动物种属:SD大鼠3、实验动物性别:雄性4、实验动物年龄:成年5、实验动物体重:180~220g1、实验方法:大鼠给予高脂饲料喂养20天。分别于造模前和造模20天,测定血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C的含量2、检测标准:造模20天后模型组大鼠血清TC、TG、HDLC、LDLC均增加,与对照组比较具统计学差异。1.提供动物模型构建过程中的原始实验记录及数据图片。2.根据要求提供构建成功的模型动物或相关组织材料.肺病疾病动物模型建模

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